TREC/KREC
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Těžký kombinovaný imunodeficit (SCID, severe combined immunodeficiency) představuje nejzávažnější formu primárních imunodeficiencí. Onemocnění je spojeno s hlubokou poruchou imunitních funkcí spojených s deficity T lymfocytární funkce, v některých formách se závažnými poruchami B funkce. V tomto krátkém přehledném článku předkládáme možnost vyšetření pomocí relativně jednoduchého a přímočarého testu na přítomnost naivních T, eventuálně B lymfocytů, který je možné provést ze suché kapky krve. Varianty tohoto testu, který se nazývá TREC (T cell receptor excision circles) pro T lymfocyty a KREC (kappa-deleting recombination excision circles) pro B lymfocyty, jsou ve světě užívány ke screeningovým programům k zachycení těžkých poruch imunity indikovaných k léčbě transplantací kmenových buněk krvetvorby či genovou terapií. Celoplošný novorozenecký screening SCID byl postupně zaváděn v jednotlivých státech v USA, kde v roce 2019 probíhá již ve všech státech. V Evropě screening probíhá v Norsku, v dalších zemích je ve stadiu příprav a pilotních projektů, s plánovaným startem v letech 2019 či 2020. Plně zaveden je screening v Izraeli a ve Švýcarsku. V České republice je v současné době test dostupný na dvou referenčních místech v akademických institucích pro Čechy a Moravu formou selektivního screeningu v indikovaných rizikových skupinách probandů. Test začínají nyní poskytovat i soukromé laboratorní firmy. Uvažuje se o pilotním projektu pro ověření schůdnosti novorozeneckého screeningu SCID v ČR. V tomto krátkém článku podáváme praktické informace o provádění a dostupnosti zmíněných testů v České republice. Informace je určena hlavně pediatrům, avšak nabízíme tento test k dispozici praktickým lékařům pro děti a dorost, eventuálně dalším lékařům, a zprostředkovaně rodičům dětí hlavně v rodinách, které mají pozitivní rodinnou anamnézu s podezřením na možný výskyt primární imunodeficience.
Severe combined immunodeficiency (SCID) represents the most serious form of primary immunodeficiencies. SCID is associated with a profound impairment of immune functions caused by T cell or combined T and B cell defects. In this short summary article, we present the possibility to use a relatively simple and straightforward test for the presence of naive T and/or B lymphocytes, which can be performed from a dry blood spots. Variants of this test, called TREC (T cell receptor excision circles) for T lymphocytes and KREC (kappa- -deleting recombination excision circles) for B lymphocytes, are used worldwide for screening programs for early detection and subsequent early treatment of severe immune disorders indicated for stem cell transplants or gene therapy. SCID neonatal screening is being progressively implemented in the US and in some European countries such as Norway and Switzerland. Pilot studies are underway in other countries such as the Netherlands and Sweden, France, Italy, Spain and the UK. Screening was recently fully implemented in Israel. In the Czech Republic, the test is currently available at two academic reference sites for Bohemian and Moravian regions for selective investigation in the indicated patients. Application for a pilot study is considered in a near future. In this short article, we provide practical information on the current implementation and availability of these tests in the Czech Republic. The information targets mainly pediatricians, but the test is available also to GPs for children and adolescents, possibly to other physicians, and to parents of children, mainly in families with a positive family history of suspected primary immunodeficiency.
- Klíčová slova
- test TREC, test KREC,
- MeSH
- časná diagnóza MeSH
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- novorozenecký screening MeSH
- těžká kombinovaná imunodeficience * diagnóza MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
BACKGROUND: Severe combined immunodeficiency (SCID) is a fatal but treatable inborn error of immunity (IEI). Newborn screening (NBS) using T-cell receptor excision circles (TREC) has been adopted globally, with very few countries incorporating kappa recombination excision circles (KREC) to also detect early B-cell development disorders, such as X-linked agammaglobulinemia (XLA). OBJECTIVE: To evaluate the effectiveness of a 2-year pilot SCID NBS program in the Czech Republic, emphasising the utility of combined TREC/KREC screening. METHODS: Between January 2022 and December 2023, a dual TREC/KREC NBS pilot was conducted across the Czech Republic, alongside spinal muscular atrophy (SMA) screening. Approximately 200,000 newborns were screened using quantitative real-time PCR on dried blood spots collected 48-72 h after birth. RESULTS: The pilot referred 58 newborns, identifying 21 cases of IEI, including two SCID cases, with an overall incidence of TREC/KREC screenable IEI of 10.5/100,000 newborns. SCID incidence was 1/100,000. KREC screening proved invaluable, detecting 10 cases of congenital agammaglobulinemia including novel non-XLA forms, which increased the estimated incidence of agammaglobulinemia in the Czech Republic sixfold. Over one-third of low KREC results were linked to maternal immunosuppression. CONCLUSION: The Czech pilot demonstrated the effectiveness of integrated TREC/KREC NBS in detecting both T- and B-cell immunodeficiencies. As of 2024, SCID and SMA screening are included in the nationwide NBS, with KREC screening significantly improving early detection of B-cell disorders.
- MeSH
- agamaglobulinemie diagnóza MeSH
- B-lymfocyty imunologie MeSH
- genetické nemoci vázané na chromozom X MeSH
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- novorozenecký screening * metody MeSH
- pilotní projekty MeSH
- receptory antigenů T-buněk * genetika MeSH
- těžká kombinovaná imunodeficience * diagnóza genetika epidemiologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- novorozenec MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
UNLABELLED: DiGeorge syndrome (DGS) presents with a wide spectrum of thymic pathologies. Nationwide neonatal screening programs of lymphocyte production using T-cell recombination excision circles (TREC) have repeatedly identified patients with DGS. We tested what proportion of DGS patients could be identified at birth by combined TREC and kappa-deleting element recombination circle (KREC) screening. Furthermore, we followed TREC/KREC levels in peripheral blood (PB) to monitor postnatal changes in lymphocyte production. METHODS: TREC/KREC copies were assessed by quantitative PCR (qPCR) and were related to the albumin control gene in dry blood spots (DBSs) from control (n = 56), severe immunodeficiency syndrome (SCID, n = 10) and DGS (n = 13) newborns. PB was evaluated in DGS children (n = 32), in diagnostic samples from SCID babies (n = 5) and in 91 controls. RESULTS: All but one DGS patient had TREC levels in the normal range at birth, albeit quantitative TREC values were significantly lower in the DGS cohort. One patient had slightly reduced KREC at birth. Postnatal DGS samples revealed reduced TREC numbers in 5 of 32 (16%) patients, whereas KREC copy numbers were similar to controls. Both TREC and KREC levels showed a more pronounced decrease with age in DGS patients than in controls (p < 0.0001 for both in a linear model). DGS patients had higher percentages of NK cells at the expense of T cells (p < 0.0001). The patients with reduced TREC levels had repeated infections in infancy and developed allergy and/or autoimmunity, but they were not strikingly different from other patients. In 12 DGS patients with paired DBS and blood samples, the TREC/KREC levels were mostly stable or increased and showed similar kinetics in respective patients. CONCLUSIONS: The combined TREC/KREC approach with correction via control gene identified 1 of 13 (8%) of DiGeorge syndrome patients at birth in our cohort. The majority of patients had TREC/KREC levels in the normal range.
- MeSH
- biotest MeSH
- DiGeorgeův syndrom diagnóza genetika imunologie MeSH
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- kruhová DNA genetika MeSH
- kultivované buňky MeSH
- kvantitativní polymerázová řetězová reakce MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- novorozenec MeSH
- novorozenecký screening * MeSH
- předškolní dítě MeSH
- syndromy imunologické nedostatečnosti diagnóza genetika imunologie MeSH
- T-lymfocyty imunologie MeSH
- těžká kombinovaná imunodeficience diagnóza genetika imunologie MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- novorozenec MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Klíčová slova
- živé vakcíny, TREC/KREC,
- MeSH
- BCG vakcína škodlivé účinky terapeutické užití MeSH
- buněčná imunita MeSH
- časná diagnóza * MeSH
- diagnostické techniky a postupy MeSH
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- plošný screening MeSH
- syndromy imunologické nedostatečnosti diagnóza komplikace MeSH
- těžká kombinovaná imunodeficience * diagnóza komplikace terapie MeSH
- vakcíny * klasifikace škodlivé účinky MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
Časná diagnostika vrozených poruch imunity umožňuje adekvátní cílenou léčbu a zabránění infekčním komplikacím. Buněčné poruchy specifické imunity se projeví jako kombinované T a B buněčné imunodeficience. Z těchto důvodů neinvazivní vyšetření TREC a KREC z krevní kapky novorozenců zvýší včasný záchyt imunodeficiencí. Děti, které jsou transplantovány do 3 měsíců věku, mají mnohem větší šanci na přežití, než děti transplantované později.
Early diagnosis of immunodeficiency makes possible early definitive therapy and avoids the complications of pretreatment infections. T-cell immunodeficiency defects become apparent as combined T- and B-cell deficiencies. Therefore, implementation of TRECs and KRECs into the newborn screening from dried blood spot will increase the preventive approach to early immunodeficiency diagnostics. Infants undergoing transplantation in the first 3 months of life have a much higher rate of survival than those undergoing transplantation later.
- Klíčová slova
- subkutánní imunoglobulinová terapie, SCIG, TREC, KREC,
- MeSH
- anafylaxe prevence a kontrola MeSH
- atenuované vakcíny imunologie škodlivé účinky MeSH
- BCG vakcína imunologie škodlivé účinky MeSH
- časná diagnóza MeSH
- dítě MeSH
- imunoglobulin A imunologie MeSH
- imunoglobuliny terapeutické užití MeSH
- intravenózní imunoglobuliny terapeutické užití MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- novorozenecký screening MeSH
- pasivní imunizace * metody MeSH
- předškolní dítě MeSH
- protilátky imunologie krev MeSH
- subkutánní infuze MeSH
- syndromy imunologické nedostatečnosti * diagnóza terapie MeSH
- test suché kapky krve * MeSH
- těžká kombinovaná imunodeficience diagnóza terapie MeSH
- vakcína proti rotavirům imunologie škodlivé účinky MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- novorozenec MeSH
- předškolní dítě MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Severe combined immunodeficiency (SCID) screening je souhrnný název pro nástroj časné detekce řady závažných vrozených poruch imunity. Současná kvantifikace excizních DNA molekul TREC a KREC umožňuje časně diagnostikovat závažné buněčné i protilátkové vrozené defekty imunity. Do dvouletého pilotního programu screeningu se v letech 2022–2023 v České republice zapojilo > 90 % novorozenců (vyšetřeno bylo 198 675 vzorků). Diagnostikováni byli 2 pacienti se SCID na podkladě CD3 epsilon deficience a atypického kompletního DiGeorgova syndromu a dalších 17 pacientů s jinými vrozenými poruchami imunity, z toho 9 s agamaglobulinemií. U dvou pacientů se SCID umožnil screening časnou kauzální terapii, tj. transplantaci hematopoetických buněk / thymu, u non-SCID pacientů vedla časná znalost jejich diagnózy k zavedení adekvátních režimových a profylaktických opatření za účelem snížení jejich následné morbidity. Od 1. ledna 2024 byl screening závažných vrozených poruch imunity spolu se spinální muskulární atrofií integrován do celoplošného novorozeneckého laboratorního screeningu.
Severe Combined Immunodeficiency (SCID) screening is a collective term for an early detection tool for a range of serious inborn errors of immunity. The quantification of excision DNA molecules TREC and KREC allows for early diagnosis of severe cellular and antibody immune defects. The recently concluded Czech pilot screening program (2022-2023) included over 90% of newborns (with 198,675 samples examined). Two patients with SCID were diagnosed based on CD3 epsilon deficiency and atypical complete DiGeorge syndrome, and another 17 patients were found to have other inborn errors of immunity, including 9 agammaglobulinemia. Screening enabled early causal therapy, i.e., hematopoietic cell/thymus transplantation, for two SCID patients, while early diagnosis in non-SCID patients led to the implementation of appropriate regimen and prophylactic measures to reduce subsequent morbidity. As of January 1, 2024, screening for severe inborn errors of immunity, along with screening for spinal muscular atrophy, becomes integral part of the national laboratory newborn screening program.
- MeSH
- agamaglobulinemie diagnóza farmakoterapie genetika MeSH
- kojenec MeSH
- kombinovaná protilátková terapie terapeutické užití MeSH
- lidé MeSH
- novorozenecký screening MeSH
- předškolní dítě MeSH
- primární imunodeficience * diagnóza genetika terapie MeSH
- těžká kombinovaná imunodeficience diagnóza genetika terapie MeSH
- thymus abnormality patologie MeSH
- transplantace hematopoetických kmenových buněk metody MeSH
- transplantace orgánů MeSH
- Check Tag
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
PURPOSE: PFAPA syndrome is a benign, recurrent inflammatory disease of childhood. Tonsillectomy is one of the therapeutic options with a yet unexplained biological mechanism. We tested whether specific lymphocyte subsets recruited from blood to human tonsils participate in PFAPA pathogenesis. METHODS: Paired tonsils/peripheral blood (PB) samples were investigated (a) from children with PFAPA that successfully resolved after tonsillectomy (n=10) (b) from children with obstructive sleep apnoea syndrome as controls (n=10). The lymphocyte profiles were analysed using 8-colour flow cytometry, immunoglobulin (IGH) and T-cell receptor (TCR) gene rearrangements via PCR and next generation sequencing; a TREC/KREC analysis was performed using qPCR. RESULTS: The PFAPA tonsils in the asymptomatic phase had a lower percentage of B-lymphocytes than controls; T-lymphocyte counts were significantly higher in PB. The percentages of cytotoxic CD8pos T-lymphocytes were approximately 2-fold higher in PFAPA tonsils; the transitional B cells and naïve stages of both the CD4pos and CD8pos T-lymphocytes with a low expression of PD-1 molecule and high numbers of TREC were also increased. With the exception of elevated plasmablasts, no other differences were significant in PB. The expression levels of CXCL10, CXCL9 and CCL19 genes were significantly higher in PFAPA tonsils. The IGH/TCR pattern showed no clonal/oligoclonal expansion. DNA from the Epstein-Barr virus, Human Herpervirus-6 or adenovirus was detected in 7 of 10 PFAPA tonsils but also in 7 of 9 controls. CONCLUSIONS: Our findings suggest that the uninhibited, polyclonal response of newly derived lymphocytes participate in the pathogenesis of PFAPA. Because most of the observed changes were restricted to tonsils and were not present in PB, they partly explain the therapeutic success of tonsillectomy in PFAPA syndrome.
- MeSH
- Adenoviridae genetika izolace a purifikace MeSH
- aftózní stomatitida komplikace imunologie chirurgie MeSH
- antigeny CD279 biosyntéza MeSH
- B-lymfocyty imunologie MeSH
- CD8-pozitivní T-lymfocyty imunologie MeSH
- chemokin CCL19 biosyntéza MeSH
- chemokin CXCL10 biosyntéza MeSH
- chemokin CXCL9 biosyntéza MeSH
- dítě MeSH
- faryngitida komplikace imunologie chirurgie MeSH
- horečka neznámého původu komplikace imunologie chirurgie MeSH
- kojenec MeSH
- krční mandle cytologie imunologie chirurgie MeSH
- lidé MeSH
- lidský herpesvirus 6 genetika izolace a purifikace MeSH
- lymfadenitida komplikace imunologie chirurgie MeSH
- obstrukční spánková apnoe imunologie chirurgie MeSH
- počet lymfocytů MeSH
- předškolní dítě MeSH
- receptory antigenů T-buněk genetika MeSH
- T-lymfocyty - podskupiny imunologie MeSH
- tonzilektomie MeSH
- virus Epsteinův-Barrové genetika izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
