Úvod: Brumenda jsou používána při rezonančních cvičeních vokálního traktu, tvz. semi-occluded vocal tract exercises. Jsou využívána v klinické praxi – terapii a jsou součástí hlasových školení. Cílem prezentované studie bylo ověřit tréninkový a edukační efekt těchto rezonančních cvičení prováděných po dobu 2,5 měsíců s pěti studentkami se zdravým hlasem, ale bez předchozího hlasového vzdělávání. Metody: Nahrávky hlasových úkolů před a po procesu tréninku, sledování vibro –akustických parametrů pořizovaných nahrávek (elektroglotografické záznamy, analýza hlasového pole a akustických parametrů). Vstupní pohovor se subjekty, subjektivní hodnocení vlastního hlasu každým subjektem před a po skončení studie, zhodnocení stavu hlasu pedagogem před a po, zpětná vazba subjektů do deníků. Poslechové testy: percepční hodnocení metodou seřaďování a škálování, hodnocení vlastnosti lesk. Hlasový trénink: 6 lekcí + domácí trénink s nahrávkou cvičení. Výsledky: Hodnocení poslechovými testy (Seřaďovací a škálovací test – opakované hodnocení) vlastnosti lesk - vysoká míra shody všech hodnotitelů- ICC1 všech hodnocení 0,925, shodli se, že po hlasovém tréninku subjekty statisticky významně zvýšily míru lesku v hlase. Výsledky analýzy hlasového pole ukázaly statisticky významné změny na obrysech maxim VRP, které jsou typické pro přechody rejstříků. Elektroglotografie – měření rozložení kontaktního koeficientu a parametru SPR (singing power ratio) v hlasovém poli ukázalo na strategii zesílení vyšší poloviny hlasového rozsahu pomocí zvětšení addukce. Ve spodní polovině změřeno významné zmírnění kontaktního koeficientu na přechodech mezi vibračními mechanismy. Měření SPR prokázalo zvýraznění spektrálních složek v oblasti 2 – 4 kHz, typické pro profesionální mluvu i zpěv. Celkové statistické porovnání dat dokladuje nárůst SPR v střední a vyšší dynamice. Lze předpokládat obohacení spektra, a tedy i výraznější zvonivost hlasu. Tento výsledek spolu s trendovým poklesem CQd v oblasti modálního mechanismu indikuje pokles addukce. Frekvenčně obohacený hlas po tréninku je tedy tvořen se stejnou intenzitou, ale menší addukcí. To ukazuje na zlepšenou efektivitu tvorby hlasu. Měřené parametry u mluvního hlasu obecně ukazovaly na vysoce individuální změny, statisticky se potvrdilo mírné zvýšení polohy hlasu. Účastníci potvrdili tato pozorování subjektivním hodnocením zlepšení hlasové kondice, větší lehkostí při mluvě, větší dechovou výdrží, menší únavou, možností použití většího hlasového rozsahu a plynulejšími přechody z nižších do vyšších poloh hlasu. Závěr: Cvičení s brumendem se prokazuje jako metoda využitelná v hlasové edukaci a rehabilitaci, která rozvíjí základní dovednosti práce s hlasem, zlepšuje jeho kvalitu a efektivnost tvorby.
Introduction: Humming is one of semi-occluded vocal tract exercise, which is used in clinical practice - therapy and is part of voice training. The aim of the study was to verify the training and educational effect of resonance exercises at 5 students with an undamaged voice, without voice training experience over a short period of time (2.5 m.). Methods: Voice recordings of tasks before and after the training process, monitoring of acquired vibro-acoustics parameters (electroglottography, voice range profile and acoustic parameters analysis). Personal history: interview with subjects, subjective assessment of subject's own voice before and after study, assessing the state of voice by the teacher - before and after, feedback of subjects in diaries. Listening tests: evaluation of brightness by visual sort and rate method. Voice training: 6 lessons + home training with exercises recording. Results: Acoustic measurements and evaluation by listening tests (visual ranking and rating procedure) of brightness feature - high degree of agreement among all evaluators - ICC1 all evaluations 0,925, they agreed that the brightness level was significantly increased by the test subjects after the voice training. Voice range profile (VRP) Analysis results demonstrated statistically significant changes to VRP peak contours that are typical of voice register transitions. Electroglottography - measurement of contact coefficient and parameter SPR (singing power ratio) distribution in VRP pointed at the strategy of amplifying the higher half of the voice range by increasing adduction. In the lower half a significant reduction in contact coefficient was measured at the transitions between the vibration mechanisms. SPR measurement has demonstrated the enhancement of spectral components in part 2 - 4 kHz, typical for professional speaking and singing. The overall statistical comparison of data shows an increase SPR medium and higher dynamics. There can be assumed spectrum enrichment and also more pronounced ringing voice quality. This result indicates a decrease in adduction along with the trend decline in CQd in the modal mechanism. The frequency-enriched voice is created with the same intensity after the training, but less adduction. This indicates improved voice production efficiency. Measured parameters in speech voice generally showed highly individual changes. A slight increase in voice pitch was statistically confirmed. Participants subjectively evaluated improvements in voice condition, easier speech production, longer breath phrases, less fatigue, increased usable voice range, and smoother transitions between registers from lower to high positions of voice. Conclusion: Humming proves to be a method that can be used in voice education and rehabilitation, developing basic vocal skills, improving its quality and effective production.
- Klíčová slova
- hlasová terapie, rezonovaný hlas, brumendo,
- MeSH
- dospělí MeSH
- hlasový trénink * MeSH
- kvalita hlasu * MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mladý dospělý MeSH
- pilotní projekty MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mladý dospělý MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
BACKGROUND: The accumulation of the misfolded forms of cellular prion protein, i.e. prions (PrPSc), in the brain is one of the crucial characteristics of fatal neurodegenerative disorders, called transmissible spongiform encephalopathies (TSEs). Cellular prion protein is normally linked to the cell surface by the glycosylphosphatidylinositol (GPI) anchor. There is accumulating evidence that the GPI-anchorless prion protein may act as an accelerator of formation and propagation of prions. In the TSE affected human brain we have previously discovered a novel GPI-anchorless prion protein fragment, named PrP226*, which ends with the tyrosine 226. This fragment can be labeled specifically by the monoclonal antibody V5B2. METHODS: We developed a DELFIA based assay for quick and sensitive detection of the PrP226* fragment in human brain tissue homogenates. By calculating the ratio between the signals of native (N) and denatured (D) samples applied to the assay we were able to observe significant difference between 24 TSE affected brains and 10 control brains. The presence of PrP226* in brain tissue was confirmed by western blot. RESULTS: Our results demonstrate that PrP226* is present in small quantities in healthy human brain, whereas in degenerated brain it accumulates in prion aggregates, proportionally to PrPSc. Samples with high D/N ratio generally comprised more proteinase K resistant PrP, while no correlation was found between the quantity of PrP226* and standard classification of Creutzfeldt-Jakob disease (CJD). CONCLUSIONS: In the present study we show that the PrP226* fragment accumulates in prion aggregates and after being released from them by a denaturation procedure, could serve as a proteinase K digestion independent biomarker for human TSEs. The PrP226* assay described in this paper offers a tool to follow and study this unique anchorless PrP fragment in various parts of human brain and possibly also in other tissues and body fluids.
- MeSH
- Creutzfeldtova-Jakobova nemoc * patologie MeSH
- ELISA MeSH
- endopeptidasa K farmakologie MeSH
- glykosylfosfatidylinositoly metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- mozek * metabolismus účinky léků MeSH
- proteiny 14-3-3 metabolismus MeSH
- PrPSc proteiny metabolismus účinky léků MeSH
- statistika jako téma MeSH
- teplota MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
BACKGROUND: Epigenetic changes are considered to be a frequent event during tumor development. Hypermethylation of promoter CpG islands represents an alternative mechanism for inactivation of tumor suppressor genes, DNA repair genes, cell cycle regulators and transcription factors. The aim of this study was to investigate promoter methylation of specific genes in endometrial cancer by comparison with normal endometrial tissue. MATERIALS AND METHODS: We used MS-MLPA (Methylation-specific Multiplex ligation-dependent probe amplification) to compare the methylation status of 59 tissue samples of endometroid type of endometrial carcinoma with 20 control samples of non-neoplastic endometrium. RESULTS: Using 15% cut-off for methylation, we observed significantly higher methylation in the CDH13 gene in endometrial cancer group. We observed significantly higher methylation in both WT1 and GATA5 genes in IB stage of endometroid carcinoma. We also observed significantly higher methylation in GATA5 gene in the group of poorly differentiated endometroid carcinoma. CONCLUSION: The findings suggest the importance of hypermethylation of CDH13, WT1 and GATA5 genes in endometrial carcinogenesis and could have implications for future diagnostic and therapeutic strategies of endometrial cancer based on epigenetic changes.
- MeSH
- dospělí MeSH
- karcinom genetika MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- metylace DNA * MeSH
- multiplexová polymerázová řetězová reakce MeSH
- nádory endometria genetika MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- tumor supresorové geny * MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Transmisivní spongiformní encefalopatie neboli prionová onemocnění jsou smrtelné neurodegenerativní choroby s dlouhou inkubační dobou a rychlým průběhem. K definitivní diagnóze dochází obvykle až post mortem detekcí prionů v mozkové tkáni. Klíčovým krokem diagnostiky prionových chorob bývá použití proteinázy K, která rozštěpí fyziologické proteiny a umožní následnou imunochemickou detekci proteáza-rezistentního prionového proteinu. V posledních pěti letech se celosvětově objevuje stále více případů prionopatií zapříčiněných proteáza-senzitivními priony, které jsou běžnými metodami vyhodnocovány falešně negativně. Řešením problému by mohla být příprava diagnostického testu založeného na použití monoklonálních protilátek konformačně specifických pro patologický prionový protein, které by umožnily potvrzení diagnózy bez použití proteolýzy. Náš text shrnuje dostupné informace o připravených konformačně specifických protilátkách a diskutuje o jejich použití v diagnostice prionových chorob.
Transmissible spongiform encephalopathies, or prion diseases, are fatal neurodegenerative disorders with long incubation period and short clinical phase. The diagnosis is usually confirmed from post mortem detection of prions in the brain tissue. Most diagnostic methods are based on treatment with Proteinase K that cleaves out physiological proteins and makes the resistant form of pathological prion protein detectable with anti-prion antibodies. Over the last five years, there is a growing evidence of prionopathies caused by protease-sensitive prions escaping detection with the standard diagnostic methods. Conformation-specific monoclonal antibodies to the pathological prion proteins could overcome the problem simply by detecting the pathological conformation of both prion isoforms without the need for proteolysis. Our review summarizes available information on conformation-specific prion antibodies and discusses their use in the diagnosis of prion diseases.
- Klíčová slova
- transmisivní spongiformní encefalopatie, prionový protein,
- MeSH
- Creutzfeldtova-Jakobova nemoc MeSH
- financování organizované MeSH
- imunoanalýza metody MeSH
- lidé MeSH
- modely nemocí na zvířatech MeSH
- monoklonální protilátky MeSH
- myši MeSH
- prionové nemoci diagnóza patofyziologie MeSH
- priony analýza diagnostické užití izolace a purifikace MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
Transmissive spongiform encephalopathies (TSE) are neurodegenerative diseases characterized by depositions of abnormally folded prion protein (PrP(TSE)) in brain. PrP(TSE) is at present the only specific biochemical marker of human and animal TSE. As deposits of PrP(TSE) remain in the body for long periods, there is substantial chance of them being nonenzymatically modified by glycation. The detection of glycated PrP(TSE) may have potential to serve as a diagnostic marker. Monoclonal antibodies specific for carboxymethyl lysine/arginine-modified prion protein were prepared. Recombinant human prion protein (rhPrP) was bacterially expressed and purified by affinity chromatography. rhPrP was modified by glyoxylic acid that introduces carboxymethyl groups on lysine and arginine residues present within the molecule of the protein. Modified rhPrP (rhPrP-CML) was used for immunization of 6 mice, and 960 hybridoma cells were prepared. Screening of cell supernatants resulted in the selection of four promising clones. One of them (EM-31) strongly reacts with human and mouse recombinant PrP-CML, and three other clones react also with CML in vitro modified human and mouse brain PrP. Besides possible implication in TSE diagnostics, the antibodies may serve as tolls to advance our knowledge regarding the role of glycation in the prion pathophysiology.
- MeSH
- arginin analogy a deriváty chemie metabolismus MeSH
- glykosylace MeSH
- hybridomy imunologie metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- lysin analogy a deriváty chemie metabolismus MeSH
- monoklonální protilátky diagnostické užití imunologie metabolismus MeSH
- mozek imunologie metabolismus MeSH
- myši knockoutované MeSH
- myši transgenní MeSH
- myši MeSH
- peptidy chemie metabolismus MeSH
- prionové nemoci diagnóza imunologie metabolismus MeSH
- priony chemie diagnostické užití metabolismus MeSH
- rekombinantní proteiny chemie metabolismus MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
