Human lysosomal β-N-acetylhexosaminidases from the family 20 of glycoside hydrolases are dimeric enzymes catalysing the cleavage of terminal β-N-acetylglucosamine and β-N-acetylgalactosamine residues from a broad spectrum of glycoconjugates. Here, we present a facile, robust, and cost-effective extracellular expression of human β-N-acetylhexosaminidase B in Pichia pastoris KM71H strain. The prepared Hex B was purified in a single step with 33% yield obtaining 10mg of the pure enzyme per 1L of the culture media. The enzyme was used in the inhibition assays with the known mechanism-based inhibitor NAG-thiazoline and a wide variety of its derivatives in the search for specific inhibitors of the human GH20 β-N-acetylhexosaminidases over the human GH84 β-N-acetylglucosaminidase, which was expressed, purified and used in the inhibition experiments as well. Moreover, enzyme-inhibitor complexes were analysed employing computational tools in order to reveal the structural basis of the results of the inhibition assays, showing the importance of water-mediated interactions between the enzyme and respective ligands. The presented method for the heterologous expression of human Hex B is robust, it significantly reduces the costs and equipment demands in comparison to the expression in mammalian cell lines. This will enhance accessibility of this human enzyme to the broad scientific community and may speed up the research of specific inhibitors of this physiologically important glycosidase family.

• MeSH
• acetylglukosamin analogy a deriváty   farmakologie   MeSH
• beta-hexosaminidasa, beta řetězec antagonisté a inhibitory   genetika   izolace a purifikace   MeSH
• exprese genu MeSH
• inhibitory enzymů farmakologie   MeSH
• katalytická doména MeSH
• kinetika MeSH
• lidé MeSH
• molekulární modely MeSH
• Pichia enzymologie   genetika   MeSH
• rekombinantní proteiny účinky léků   genetika   izolace a purifikace   MeSH
• thiazoly farmakologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Sandhoffova nemoc (SN) je fatální, autozomálně recesivní porucha lysozomálního katabolizmu. Mutace HEXB genu způsobují akumulaci GM2 gangliosidu, která vede k postižení neuronů a SD. Tak jak dochází k akumulaci gangliosidů v bazálních gangliích a rozvoji abnormit bílé hmoty, jsou na magnetické rezonanci v bazálních gangliích, obzvláště thalamických, patrné T2 hypointenzity. Toho je využíváno při diferenciální diagnostice. T2 hypointenzity bazálních ganglií mohou vzniknout na základě různých etiologií. V článku prezentujeme 18měsíčního pacienta, u kterého došlo k progresivnímu zhoršování motorických funkcí, záchvatům a na T2 váženém MRI byly zjištěny bilaterální thalamické hypointenzity. Celoexomové sekvenování pacienta odhalilo homozygotní c.1538T>C; p.Leu513Pro (RefSeq. NM_000521, GRCh38) mutaci HEXB. Naše klinická zjištění jsou ve shodě se zjištěními popsanými u pacientů s mutací HEXB. Sekvenování exomu umožnilo vyloučení genetických onemocnění postihujících bazální ganglia.

Sandhoff disease (SD) is a fatal, autosomal reces­sive lysosomal storage disease. Mutations in HEXB gene cause neuronal damage and SD due to accumulation of GM2 ganglioside. As ganglioside accumulates in the basal ganglia and white matter abnormalities occur, the T2 hypointensities of the basal ganglia, especially those of the thalamus, become observable on the magnetic resonance imaging (MRI). This is what leads to differential diagnosis. T2 hypointensities of the basal ganglia may be due to heterogeneous etiologies. Herein, we present an 18-month-old male patient who had progressive decline of motor functions, seizures, and bilateral thalamic hypointensity on T2-weighted MRI. Whole exome sequencing of the patient revealed homozygous c.1538T>C; p.Leu513Pro (RefSeq. NM_000521, GRCh38) HEXB mutation. Of note, our clinical findings were similar to those seen in patients with HEXB mutation. Exome sequencing allowed us to exclude genetic disorders with basal ganglia involvement.

• MeSH
• bazální ganglia patologie   MeSH
• beta-N-acetylhexosaminidasy MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• G(M2) gangliosid MeSH
• hexosaminidasa B * genetika   MeSH
• kojenec MeSH
• lidé MeSH
• magnetická rezonanční tomografie MeSH
• mutace MeSH
• Sandhoffova nemoc * diagnóza   genetika   patologie   MeSH
• thalamus * patologie   MeSH
• Check Tag
• kojenec MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Pozdní forma Tay-Sachsovy choroby patří mezi GM2 gangliosidózy. První příznaky se objevují během dospívání nebo v časném dospělém věku. Uvádíme kazuistiky dvou sester ve věku 19 a 29 let s typickým klinickým obrazem a výsledky pomocných vyšetření. Počátečními příznaky byla porucha řeči a neobratnost, postupně se objevila progredující slabost pletencového svalstva dolních končetin. Elektromyografie prokazovala postižení na úrovni míšního motoneuronu. Molekulárně genetickým vyšetřením nebyla zjištěna delece SMN1 (survival of motor neuron) genu. Na magnetické rezonanci mozku se zobrazila výrazná mozečková atrofie. V séru, plazmě a leukocytech byl prokázán významný pokles aktivity β-hexosaminidázy A. DNA analýza HEXA genu identifikovala heterozygotní mutaci: c.805G>A and c.1123delG. U starší z obou sester trvalo stanovení správné diagnózy 12 let. Při klinických příznacích spinální svalové atrofie nebo spinocerebellární ataxie doporučujeme zvažovat v diferenciální diagnostice pozdní formu Tay-Sachsovy choroby. Správná diagnostika může mít význam z hlediska budoucích možností léčby.

Late-onset Tay-Sachs disease is a form of GM2 gangliosidosis with the first manifestation in adolescence to young adulthood. We present clinical and paraclinical findings in two sisters (19 and 29 years). Speech impairment and clumsiness as the initial signs were followed by progressive proximal weakness in the lower extremities. Electromyography showed involvement of the lower motor neuron. Molecular genetic testing brought no evidence of deletion within the SMN1 (survival of motor neuron) gene. Magnetic resonance imaging of the brain revealed marked cerebellar atrophy. Marked decrease in β-hexosaminidase A activity was found in the serum, plasma and leukocytes. DNA analysis of the HEXA gene identified heterozygous mutations: c.805G>A and c.1123delG. It took 12 years to establish the diagnosis in the older sister. We recommend considering late-onset Tay-Sachs disease for the differential diagnosis of patients with clinical signs suggesting spinal muscular atrophy or spinocerebellar ataxia. Accurate diagnosis may be of prospective significance in terms of therapeutic management.

• Klíčová slova
• deficit hexosaminidázy A,
• MeSH
• beta-N-acetylhexosaminidasy genetika   krev   nedostatek   MeSH
• delece genu MeSH
• diferenciální diagnóza MeSH
• dospělí MeSH
• elektromyografie MeSH
• heterozygot MeSH
• hexosaminidasa A * krev   MeSH
• lidé MeSH
• magnetická rezonanční tomografie MeSH
• mladý dospělý MeSH
• mozek patologie   radiografie   MeSH
• mutační analýza DNA MeSH
• neurologické poruchy chůze etiologie   MeSH
• poruchy řeči etiologie   MeSH
• protein přežití motorických neuronů 1 genetika   MeSH
• psychomotorické poruchy * etiologie   MeSH
• spinální svalová atrofie diagnóza   MeSH
• svalová hypotonie MeSH
• Tay-Sachsova nemoc * diagnóza   genetika   patofyziologie   MeSH
• věk při počátku nemoci MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mladý dospělý MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Tayova-Sachsova choroba je raritné autozomálne recesívne podmienené ochorenie zapríčinené deficitom enzýmu β-hexozaminidázy A (HexA). Dochádza k akumulácii GM2 gangliozidov v lyzozómoch neurónov, čo potenciuje ich toxický účinok a navodzuje tak postupnú neurodegeneráciu. Presný mechanizmus spustenia zániku neurónov je stále neznámy. Pre zachovanú reziduálnu aktivitu enzýmu HexA má adultná forma ochorenia zvyčajne miernejší priebeh ako infantilná forma. Klinický obraz je nešpecifický, preto je ochorenie výrazne poddiagnostikované. V našej videokazuistike prezentujeme prípad 49-ročného pacienta s geneticky potvrdenou adultnou formou Tayovej-Sachsovej choroby.

Tay-Sachs disease is a rare autosomal recessive disorder caused by β-hexosaminidase A (HexA) enzyme deficiency. There is accumulation of GM2 gangliosides in neuronal lysosomes, which potentiates their toxic effect, thus inducing gradual neurodegeneration. The exact mechanism triggering neuronal death is still unknown. Due to the preserved residual HexA enzyme activity, the adult form of the disease tends to have a milder course than the infantile form. The clinical presentation is non-specific; hence, the disease is significantly underdiagnosed. Our video case report presents a 49-year-old patient with a genetically confirmed diagnosis of adult Tay-Sachs disease.

• MeSH
• cerebelární ataxie MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• Tay-Sachsova nemoc * diagnóza   terapie   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

• MeSH
• lékařství MeSH

• Konspekt
• Lékařské vědy. Lékařství
• NLK Obory
• lékařství
• NLK Publikační typ
• vzácné tisky

• O autorovi
• Hippokratés, 460 př. Kr.-asi 380 př. Kr Autorita

Odborná monografie, jejímž autorem je lékař-internista, podává souborný výklad o opomíjené součásti nukleových kyselin, pentosách (monosacharidech o pěti atomech uhlíku) a jejich fysiologické funkci. Probrána je nejprve chemie a systematika pentos, otázky vzniku a přetváření pentos v organismu, jejich vstřebávání, vylučování a využité savčím organismem, jakož i příčiny a formy pentosurif.; Oborná monografie, jejímž autorem je lékař-internista, podává souborný výklad o opomíjené součásti nukleových kyselin, pentosách (monosacharidech o pěti atomech uhlíku) a jejich fysiologické funkci. Probrána je nejprve chemie a systematika pentos, otázky vzniku a přetváření pentos v organismu, jejich vstřebávání, vylučování a využité ssavčím organismem, jakož i příčiny a formy pentosurif.

• MeSH
• pentosy MeSH
• Publikační typ
• monografie MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biochemie
• fyziologie

• MeSH
• infekční nemoci MeSH
• pediatrie MeSH
• Publikační typ
• klasické články MeSH

• Konspekt
• Pediatrie
• NLK Obory
• pediatrie

Kniha je věnována aktuální verzi 3.9 jazyka Python. Využijí ji ti, kteří potřebují občas napsat jednoduchý program, je také vhodná jako doprovodná učebnice ke kurzům programování i jako referenční příručka.; Python vznikl jako jazyk, který měl laikům usnadnit vstup do světa programování a umožnit jim s co nejmenším úsilím vytvářet jednoduché programy.

Orientujete-li se na vysoce profesionální webovou tvorbu a nestačí-li vám PHP pro realizaci vašich představ, pak právě Perl je tou nejvhodnější volbou. Kniha je určena všem zájemcům, kteří se chtějí s jazykem Perl poprvé seznámit, i těm, kteří s ním přicházejí pravidelně do styku. Začíná stručnou charakteristikou jazyka a postupuje přes všechny důležité prvky jazyka až do podrobností. Čtenář má také k dipozici popis všech standardních funkcí jazyka včetně příkladů.

• MeSH
• lymfom klasifikace   diagnóza   terapie   MeSH
• směrnice pro lékařskou praxi jako téma MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství