Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) represents the most prevalent type of non-Hodgkin lymphomas (NHL) in the Western hemisphere. BCL2 and MCL1 belong to key regulators of intrinsic (mitochondrial) apoptosis. BCL2 was repeatedly associated with poor prognosis in DLBCL. MCL1 was recently reported overexpressed in part of DLBCL patients. ABT-199 is a new, highly specific inhibitor of BCL2 protein, currently tested clinically in diverse B-cell malignancies. Homoharringtonine (HHT), a MCL1-targeting agent, was approved for the treatment of adult patients with chronic myeloid leukemia. Goal of the current project is to examine therapeutic potential of BCL2- and MCL1-targeting agents ABT-199 and HHT, single-agent, or in combination with currently used anti-lymphoma agents, in experimental therapy of DLBCL. The results will clarify the roles of BCL2 family proteins in the biology of DLBCL, and provide preclinical rationale for the design of future phase 2 clinical trials of these agents in pts with relapsed / refractory DLBCL.

Difuzní velkobuněčný lymfom (DLBCL) představuje nejčastější typ nehodgkinského lymfomu na západní polokouli. BCL2 a MCL1 patří mezi klíčové inhibitory vnitřní (mitochondriální) apoptózy. Zvýšená exprese BCL2 byla opakovaně asociována se špatnou prognózou u pacientů s DLBCL. Zvýšená exprese MCL1 byla recentně zjištěna u části pacientů s DLBCL. ABT-199 je nový, vysoce specifický inhibitor BCL2 proteinu. ABT-199 je v současné době klinicky testován na širokém spektru B-lymfoproliferací. Homoharringtonin (HHT) je inhibitor MCL1, schválený k terapii pacientů s návratem chronické myeloidní leukémie. Cílem projektu je objasnit terapeutický potenciál ABT-199 a HHT (specifických inhibitorů BCL2 a MCL1), v monoterapii či v kombinaci s dalšími protilymfomovými léky, v experimentální terapii DLBCL. Výsledky studie objasní roli BCL2 proteinů v biologii DLBCL a poskytnou předklinická data pro design pozdějších klinických studií fáze 2 na pacientech s relabovaným / refrakterním DLBCL.

• Klíčová slova
• ABT-199,
• MeSH
• apoptóza MeSH
• difúzní velkobuněčný B-lymfom terapie   MeSH
• homoharringtonin terapeutické užití   MeSH
• inhibitory proteinu aktivujícího 5-lipoxygenasu MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• myši MeSH
• protein MCL-1 antagonisté a inhibitory   MeSH
• protoonkogenní proteiny c-bcl-2 antagonisté a inhibitory   MeSH
• transplantace heterologní MeSH
• Check Tag
• myši MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• onkologie
• experimentální medicína
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

• MeSH
• alfa řetězce integrinu antagonisté a inhibitory   aplikace a dávkování   terapeutické užití   MeSH
• antivirové látky MeSH
• apoptóza účinky léků   MeSH
• chronická hepatitida C farmakoterapie   MeSH
• fixní kombinace léků MeSH
• gastrointestinální látky MeSH
• genotyp MeSH
• humanizované monoklonální protilátky MeSH
• idiopatické střevní záněty farmakoterapie   MeSH
• klinické zkoušky, fáze III jako téma MeSH
• kombinovaná farmakoterapie MeSH
• kyselina ursodeoxycholová farmakokinetika   farmakologie   škodlivé účinky   terapeutické užití   MeSH
• nemoci jater farmakoterapie   MeSH
• Publikační typ
• sborníky MeSH

• Konspekt
• Farmacie. Farmakologie
• NLK Obory
• farmacie a farmakologie
• gastroenterologie
• hepatologie

Apoptosis of colonic epithelial cells is of a very low degree in healthy humans. Factors, which influence (increase) apoptosis, have not been satisfactory explained yet. Not only primary disease itself (inflammatory bowel disease, adenoma, carcinoma), but also luminal pH and pH of the mucosa, different expression of blood group antigens, alteration of mucosal prostaglandines and S100 proteins, microbial population, nutrition etc. may play a role in apoptosis. The project will use advanced endoscopic methods, most modern possibilities of apoptosis determination in the bioptic samples (taken during colonoscopy), direct measurement of mucosal pH and bacteriocinogenotypization.

Apoptóza buněk sliznice tlustého střeva je u zdravého člověka velmi nízkého stupně. Faktory, které apoptózu kolorekta ovlivňují (zvyšují), nejsou dosud uspokojivě objasněny. Vedle základního onemocnění (idiopatický střevní zánět, adenom, karcinom) to mohou být luminální a slizniční pH, odlišná exprese krevně skupinových antigenů, změny slizničních prostaglandinů a proteinů rodiny S100, mikrobiota, nutriční vlivy aj. Projekt využije pokročilé zobrazovací metody, nejmodernější možnosti stanovení apoptózy bioptických vzorků odebraných při koloskopii, proteomické mapy, direktní měření pH a bakteriocinogenotypizaci.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• biopsie MeSH
• epitelové buňky MeSH
• idiopatické střevní záněty MeSH
• kolonoskopie MeSH
• kolorektální nádory MeSH
• koncentrace vodíkových iontů MeSH
• mikrobiota MeSH
• proteiny S100 analýza   MeSH
• sliznice MeSH
• střevní sliznice patofyziologie   MeSH
• tlusté střevo patofyziologie   MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• gastroenterologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The project aims to improve our understanding of novel mechanisms of the effects of platinum (Pt) cytostatics, PPAR? ligands and their combinations at both molecular and cellular level. We will analyze specific genes and proteins regulating cell cycle and apoptosis in cell lines derived from colon and prostate carcinoma (incl. both sensitive and resistant cells, specific transfectants and knock-outs). We expect a distinct expression in cells derived from tumour and normal tissues. The identified differences will be compared with clinical samples derived from patients with analogous tumours, in order to improve the interpretation of results. The goal is understanding of significant differences from the point of view of cytokinetics, interpretation of their importance for prediction of therapy with Pt cytostatics (incl. novel complexes) and analysis of the role of PPAR? ligands in these potential cooperative effect using up-to-date methods of molecular biology and analytical cytometry.

Projekt je zaměřen na poznání nových mechanismů účinků vybraných platinových (Pt) cytostatik, ligandů PPAR? a jejich kombinací na molekulární a buněčné úrovni. U buněčných linií odvozených z nádorů kolonu a prostaty (senzitivních i rezistentních včetně specifických transfektantů a ?knock-out? linií) budou analyzovány specifické geny a proteiny regulující buněčný cyklus a apoptózu. Očekáváme odlišnou expresi u buněčných populací odvozených z normálních a nádorových tkání. Zjištěné rozdíly budou srovnávány s výsledky klinických vzorků z pacientů s analogickými nádory, což přispěje k lepšímu pochopení a nové interpretaci výsledků. Cílem je postihnout podstatné rozdíly z hlediska cytokinetiky a pokusit se odvodit jejich význam pro predikci účinnosti léčbyPt cytostatiky (včetně nových vysoce účinných komplexů) a posoudit úlohu ligandů PPAR? (potenciální kooperativní efekt) v těchto procesech s využitím nejmodernějších metod molekulární biologie a analytické cytometrie.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• buněčný cyklus MeSH
• cytostatické látky terapeutické užití   MeSH
• lidé MeSH
• molekulární biologie MeSH
• nádory prostaty farmakoterapie   MeSH
• nádory tračníku farmakoterapie   MeSH
• nádory farmakoterapie   MeSH
• platina terapeutické užití   MeSH
• PPAR gama terapeutické užití   MeSH
• průtoková cytometrie metody   využití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

• Konspekt
• Farmacie. Farmakologie
• NLK Obory
• farmacie a farmakologie
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Cardiovascular apparatus undoubtedly belongs to the systems where gender differences play an important role and can influence many structural and metabolic features. Nevertheless, knowledge about the tolerance to cold ischemia in the donor male and female myocardium and myocardium response during specific conditions such as transplantation female heart to men or men heart to female does not exist for the present. The present project is therefore focus on the gender differences of the apoptosis in the myocardium at patients after heart transplantation. The samples of the myocardium will be taken from right ventricle. Perioperative biopsy will be taken under direct vision, postoperative samples will be obtained by routine cardiology check-ups using endomyocardial biopsy. The frequency and amount of apoptotic cells will be assessed by TUNEL and electron microscopy; antiapoptotic and proapoptotic proteins (Bcl-2, caspase 3) will be determined imunohistochemically.

Kardiovaskulární aparát patří bezpochyby mezi systémové soustavy, u kterých se zásadním způsobem uplatňuje vliv pohlaví na řadu strukturálních i metabolických vlastností. Ty pak mohou vést k odlišné odpovědi na nejrůznější fyziologické i patologické podněty. Předmětem našeho výzkumu je apoptóza v myokardu a hlavně její změny po transplantaci srdce v závislosti na pohlaví dárce či příjemce.Vzorky budeme odebírat z pravé komory srdeční jednak peroperačně přímou biopsií, pooperačně budou vzorky odebírány při pravidelných kardiologických kontrolách, u kterých bude plánovaná EMB.Z odebraných vzorků bude přítomnost apoptózy hodnocena pomocí metody TUNEL, anti a proapoptotických proteinů(bcl-2, kaspáza 3)a taky elekron.mikroskopií.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• srdce MeSH
• studená ischemie MeSH
• Check Tag
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• Konspekt
• Lékařské vědy. Lékařství
• NLK Obory
• transplantologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The project is aimed at the study of molecular mechanisms underlying apoptosome pathway dysfunction in non-small cell lung carcinoma (NSCLC) cells and tissues, with using the methods of derepression of apoptosome apparatus activation and activity and bymeans of the methods analyzing the expression of inactivatable phosphorylated procaspase-9 forms and the expression of apoptosome pathway regulators such as PHAPI/pp32, APIP, and nucling/UACA.

V projektu budou studovány molekulární podklady poruchy aktivace apoptosomové dráhy v buněčných liniích a tkáních nemalobuněčného karcinomu plic (NSCLC) s použitím metod dereprese aktivace a aktivity apoptosomového aparátu a s pomocí metod analyzujícíchexpresi neaktivovatelných forem fosforylované prokaspasy-9 a expresi regulátorů apoptosomové dráhy, APIPu, PHAPuI/pp32 a nuklingu/UACA.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cytochromy c MeSH
• cytosol MeSH
• down regulace MeSH
• faktor 1 aktivující apoptotickou proteasu MeSH
• genetická transkripce MeSH
• kaspasa 9 MeSH
• nemalobuněčný karcinom plic MeSH
• regulace genové exprese u nádorů MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• pneumologie a ftizeologie
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of the proposed project is to determine the importance of p38 and JNK MAPK pathways for the proliferation and survival of malignant melanoma cells, and for their response to chemotherapy. The possibility of autophagy induction by targeted inhibition of p38 signaling will be confirmed on a panel of melanoma cell lines. The possible use of the modulation of induced autophagy in the targeted therapy of melanoma will be also tested. This project will also determine whether autophagy plays any role in the response of malignant melanoma cells to cytotoxic chemotherapy and in their response to RAF inhibitor sorafenib. The planned experiments will be performed on a panel of melanoma cell lines. Specific inhibitors of the studied signaling pathways willbe used, together with the following techniques: cell culture, siRNA and DNA transfections, SDS-PAGE and Western blotting, cytotoxicity tests, techniques for the detection of apoptosis, flow cytometry, fluorescence microscopy and electron microscopy.

Cílem projektu je ověření významu buněčných signálních drah řízených kinázami p38 a JNK pro proliferaci a přežití buněčných linií maligního melanomu a pro jejich odpověď na chemoterapii. Dále bude ověřena možnost indukce autofagie v buňkách maligního melanomu cílenou inhibicí signální dráhy kinázy p38 a budou otestovány možnosti využití modulace takto indukované autofagie v cílené terapii maligniho melanomu. Bude též stanoven možný význam autofagie pro odpověď maligního melanomu na cytotoxickou chemoterapii a na molekulárně-cílenou terapii sorafenibem. Při řešení projektu budou využity specifické inhibitory studovaných signálních drah a experimenty budou prováděny na panelu buněčných liní maligního melanomu. Budou používány zejména následující techniky: kultivace buněčných linií, transfekce siRNA a DNA, SDS-PAGE a "Western blotting", testy cytotoxicity, techniky pro detekci apoptózy, průtoková cytometrie, fluorescenční a elektronová mikroskopie.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• autofagie MeSH
• cílená molekulární terapie MeSH
• diagnostické techniky molekulární metody   využití   MeSH
• inhibitory proteinkinas MeSH
• MAP kinasový signální systém MeSH
• melanom MeSH
• nádorová transformace buněk MeSH
• signální transdukce MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• dermatovenerologie
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Mantle cell lymphoma (MCL) is incurable B-cell non-Hodgkin lymphoma and thus improving an outcome of MCL patients with new treatment options is of great importance. We plan to evaluate impact of experimental combinatorial approaches on MCL cell lines both in vitro and in vivo (xenotransplants into immunodeficient mice) via targeting the MCL-associated aberrant molecular events by new generation of cytotoxic agents, e.g. roscovitine, gemcitabine or temsirolimus, and the death-receptor pathway by the proapoptotic cytokine TRAIL. We presuppose to identify novel TRAIL "sensitizers" among the new-generation anti-lymphoma drugs. We expect to elucidate yet undescribed molecular mechanisms, by which such sensitizers augment proapoptotic effects of the recombinant TRAIL. The results of this proposed project may have important implications for the therapy of mantle cell lymphoma and will provide substantiation for design of novel combinatorial approaches that may grant or prolong survival of MCL patients.

Lymfom z plášťových buněk (MCL) je nevyléčitelná forma B-nehodgkinského lymfomu (B-NHL). Vývoj a preklinické testování nových protilymfomových léků / léčebných strategií představuje proto zásadní prioritu. Cílem předkládaného projektu je vyhodnotit efektexperimentálních terapeutických postupů kombinujících cílený zásah do deregulovaných molekul / signálních drah nově zaváděnými protilymfomovými cytostatiky (např. bortezomib, temsirolimus, roscovitine) a indukci receptorové apoptotické dráhy proapoptotickým ligandem TRAILem. Experimenty budou prováděny in vitro na MCL buněčných liniích a in vivo na myším modelu lidského MCL (systémová xenotransplantace). Předpokládáme, že identifikujeme cytostatika, která budou vykazovat synergistický cytotoxický účinek s TRAILem. Očekáváme, že se nám podaří objasnit molekulární podstatu látkového synergismu. Výsledky studie mohou mít zásadní dopad na vytváření nových, klinicky účinnějších terapeutických postupů v léčbě lymfomu z plášťových buněk u člověka.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cytostatické látky MeSH
• experimentální terapie MeSH
• Jurkat buňky MeSH
• kaspasa 10 MeSH
• lymfom z plášťových buněk terapie   MeSH
• modely u zvířat MeSH
• myši MeSH
• nehodgkinský lymfom terapie   MeSH
• protein TRAIL MeSH
• synergismus léků MeSH
• transplantace heterologní MeSH
• Check Tag
• myši MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Study of interactions between nuclear and nucleolar factors controlling cell proliferation and effectors of programmed cell death. Modifications and translocations during leukemogenesis and drug induced apoptosis in normal leukocytes and leukemic cells.The study of interaction complexes in normal blood cells and leukemic cell lines using: qRT-PCR, immunoblotting, yeast two-hybrid system, affinity chromatography, mass spektrometry, flow cytometry, immunofluorescence microscopy.

Interakce mezi regulátory buněčné proliferace a apoptotickými efektory protinádorové obrany v normálních a leukemických buňkách. Změny tvorby a lokalizace interakčních komplexů při vzniku krevních malignit, význam v časné diagnostice a léčbě leukémií. Studium interakčních komplexů v normálních krevních buňkách a v buňkách leukemických linií metodami: imunoblot, afinitní chromatografie, kvasinkový 2-hybridní systém, hmotová spektrometrie, průtoková cytometrie, fluorescenční mikroskopie.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cytotoxiny MeSH
• genetická epistáze MeSH
• leukemie diagnóza   terapie   MeSH
• nádorové supresorové proteiny MeSH
• onkogeny MeSH
• organizátor jadérka MeSH
• proliferační antigen buněčného jádra MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• hematologie a transfuzní lékařství
• onkologie
• biologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

Clinical manifestation of ototoxicity will be followed-up in the patient group treated with cisplatin in which hearing is intact. Samples of peripheral venous blood will be obtained from that probands and DNA will be isolated in which genetic polymorphisms of the genes of antioxidative enzymes and proteins controlling cell apoptosis will be assessed. Results of clinical and genetic assessments will be statistically compared to find a significant associations between genetic polymorphisms and higher riskof ototoxicity. If these associations are found, they could be used in clinical practice to predict the individual risk ototoxicity induced by cisplatin.

V souboru pacientů s klinicky intaktním sluchem a indikovaným podáním cisplatiny budou sledovány klinické projevy ototoxicity. Bude odebrána periferní žilní krev a z ní izolována DNA jednotlivých probandů, kde bude provedena genotypizace polymorfismů genů pro antioxidativní enzymy a enzymy regulující buněčnou apoptózu. Výsledky klinického a genetického vyšetření budou vzájemně statisticky porovnány s cílem najít statisticky signifikantní asociaci genetického polymorfismu s vyšším rizikem ototoxicity. Pokud budou takové asociace nalezeny, bude moci těchto výsledků dále využít v praxi k predikci ototoxických účinků cisplatiny.

• MeSH
• apoptóza MeSH
• cisplatina toxicita   MeSH
• otoakustické emise spontánní genetika   účinky léků   MeSH
• oxidační stres MeSH
• polymorfismus genetický MeSH
• poruchy sluchu chemicky indukované   MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• biologie
• farmacie a farmakologie
• otorinolaryngologie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR