Cyklosporin A (CyA) je lék s úzkým terapeutickým rozmezím u něhož se projevuje významná interindividuální variabilita, která má za následek rozdílnou odpověď na terapii. V klinické praxi neexistují imunologické testy, kterými by bylo možno účinnost imunosuprese cyklosporinem sledovat, a proto se monitorování CyA omezuje na stanovení jeho koncentrací v krvi. Pro terapeutické monitorování (TDM) cyklosporinu A se používají především metody imunoanalytické, metody vysokoúčinné kapalinové chromatografie (HPLC) a kapalinová chromatografie ve spojení s hmotnostní detekcí (LC-MS, popř. LC-MS/MS). Výhodou imunoanalytických metod je analýza velkého množství vzorků během krátkého času a snadná ovladatelnost přístrojů. Jejich nevýhodou jsou zkřížené reakce s metabolity CyA. HPLC metody se považují za referenční metody stanovení CyA. Vyžadují však časově náročné extrakční postupy přípravy vzorků, které jsou důležité pro dobrou separaci. HPLC metody jsou také používány k měření CyA společně s jeho metabolity. V tom případě je celkový čas analýzy až několik desítek minut. Metody LC-MS a LC-MS/MS jsou selektivní, velmi citlivé a specifické. Výhodou těchto metod oproti klasické HPLC je zejména v případě LC-MS/MS rychlá průchodnost vzorků a možnost stanovení CyA s metabolity nebo s dalšími imunosupresivy v jedné analýze. Nevýhodou je vysoká pořizovací cena přístroje a nutnost odborné obsluhy.

Cyclosporine A (CyA) is a drug with narrow therapeutic range and high interindividual variability. No immunologic tests are known to verify immunosuppressive effect of cyclosporine in clinical practice and that's why CyA monitoring is limited mainly to determine its concentration in blood. Immunoanalytic methods, high performance liquid chromatography (HPLC) and liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS or LC-MS/MS) are regularly used to determine CyA concentration in therapeutic drug monitoring (TDM). Immunoanalytic methods can analyze a lot of samples in short time and they are easy practicability, but the disadvantage is crossed reactions with CyA metabolites. HPLC methods are considered to be referential for CyA determination, but they require time-consuming extraction procedures important for successful separation. The analysis may take even tens of minutes. HPLC methods are also used to determine CyA together with its metabolites. LC-MS and LC-MS/MS methods are selective, very sensitive and specific. The advantage of these methods especially in the case of LC-MS/MS is high sample throughput and the possibility to determine CyA simultaneously with its metabolites or other immunosuppressives in one analysis. On the other hand the initial instrumentation cost and a requirements of skilful staff are limitations of these methods.

Ústav klinické farmakologie FN Ostrava a Fakulty zdravotnických studií Ostravské univerzity Ostrava

Possibilities of cyclosporine A determination in therapeutic drug monitoring

Lit.: 78