Colorectal cancer (CRC) is a leading global cause of illness and death. There is a need for identification of better prognostic markers beyond traditional clinical variables like grade and stage. Previous research revealed that abnormal expression of cytokeratin 7 (CK7) and loss of the intestinal-specific Special AT-rich sequence-binding protein 2 (SATB2) are linked to poor CRC prognosis. This study aimed to explore these markers' prognostic significance alongside two extraintestinal mucins (MUC5AC, MUC6), claudin 18, and MUC4 in 285 CRC cases using immunohistochemistry on tissue microarrays (TMAs). CK7 expression and SATB2-loss were associated with MUC5AC, MUC6, and claudin 18 positivity. These findings suggest a distinct "non-intestinal" immunohistochemical profile in CRC, often right-sided, SATB2-low, with atypical expression of CK7 and non-colorectal mucins (MUC5AC, MUC6). Strong MUC4 expression negatively impacted cancer-specific survival (hazard ratio = 2.7, p = 0.044). Genetic analysis via next-generation sequencing (NGS) in CK7 + CRCs and those with high MUC4 expression revealed prevalent mutations in TP53, APC, BRAF, KRAS, PIK3CA, FBXW7, and SMAD4, consistent with known CRC mutation patterns. NGS also identified druggable variants in BRAF, PIK3CA, and KRAS. CK7 + tumors showed intriguingly common (31.6%) BRAF V600E mutations corelating with poor prognosis, compared to the frequency described in the literature and databases. Further research on larger cohorts with a non-colorectal immunophenotype and high MUC4 expression is needed.

• MeSH
• dospělí MeSH
• fenotyp MeSH
• fosfatidylinositol-3-kinasy třídy I genetika   metabolismus   MeSH
• imunohistochemie * MeSH
• keratin-7 metabolismus   genetika   MeSH
• kolorektální nádory * genetika   patologie   metabolismus   mortalita   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mucin 4 genetika   metabolismus   MeSH
• mucin 5AC genetika   metabolismus   MeSH
• mucin 6 genetika   metabolismus   MeSH
• mutace MeSH
• nádorové biomarkery * genetika   metabolismus   MeSH
• prognóza MeSH
• protoonkogenní proteiny B-Raf genetika   MeSH
• protoonkogenní proteiny p21(ras) genetika   MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• transkripční faktory MeSH
• vazebné proteiny DNA v oblastech připojení k matrix * genetika   metabolismus   MeSH
• vysoce účinné nukleotidové sekvenování MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

The mucus layer protects airway epithelia from damage by noxious agents. Intriguingly, Bordetella pertussis bacteria provoke massive mucus production by nasopharyngeal epithelia during the initial coryza-like catarrhal stage of human pertussis and the pathogen transmits in mucus-containing aerosol droplets expelled by sneezing and post-nasal drip-triggered cough. We investigated the role of the cAMP-elevating adenylate cyclase (CyaA) and pertussis (PT) toxins in the upregulation of mucin production in B. pertussis-infected airway epithelia. Using human pseudostratified airway epithelial cell layers cultured at air-liquid interface (ALI), we show that purified CyaA and PT toxins (100 ng/mL) can trigger production of the major airway mucins Muc5AC and Muc5B. Upregulation of mucin secretion involved activation of the cAMP response element binding protein (CREB) and was blocked by the 666-15-Calbiochem inhibitor of CREB-mediated gene transcription. Intriguingly, a B. pertussis mutant strain secreting only active PT and producing the enzymatically inactive CyaA-AC- toxoid failed to trigger any important mucus production in infected epithelial cell layers in vitro or in vivo in the tracheal epithelia of intranasally infected mice. In contrast, the PT- toxoid-producing B. pertussis mutant secreting the active CyaA toxin elicited a comparable mucin production as infection of epithelial cell layers or tracheal epithelia of infected mice by the wild-type B. pertussis secreting both PT and CyaA toxins. Hence, the cAMP-elevating activity of B. pertussis-secreted CyaA was alone sufficient for activation of mucin production through a CREB-dependent mechanism in B. pertussis-infected airway epithelia in vivo.

• MeSH
• adenylátcyklasový toxin toxicita   MeSH
• Bordetella pertussis metabolismus   patogenita   MeSH
• buněčné linie MeSH
• dýchací soustava metabolismus   mikrobiologie   MeSH
• epitelové buňky metabolismus   mikrobiologie   MeSH
• lidé MeSH
• mucin 5AC metabolismus   MeSH
• myši inbrední BALB C MeSH
• myši MeSH
• pertuse metabolismus   mikrobiologie   MeSH
• protein vázající cAMP responzivní element metabolismus   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Cystic fibrosis (CF) is the most common genetic disease in Caucasians. CF is manifested by abnormal accumulation of mucus in the lungs, which serves as fertile ground for the growth of microorganisms leading to recurrent infections and ultimately, lung failure. Mucus in CF patients consists of DNA from dead neutrophils as well as mucins produced by goblet cells. MUC5AC mucin leads to pathological plugging of the airways whereas MUC5B has a protective role against bacterial infection. Therefore, decreasing the level of MUC5AC while maintaining MUC5B intact would in principle be a desirable mucoregulatory treatment outcome. Fenretinide prevented the lipopolysaccharide-induced increase of MUC5AC gene expression, without affecting the level of MUC5B, in a lung goblet cell line. Additionally, fenretinide treatment reversed the pro-inflammatory imbalance of fatty acids by increasing docosahexaenoic acid and decreasing the levels of arachidonic acid in a lung epithelial cell line and primary leukocytes derived from CF patients. Furthermore, for the first time we also demonstrate the effect of fenretinide on multiple unsaturated fatty acids, as well as differential effects on the levels of long- compared to very-long-chain saturated fatty acids which are important substrates of complex phospholipids. Finally, we demonstrate that pre-treating mice with fenretinide in a chronic model of P. aeruginosa lung infection efficiently decreases the accumulation of mucus. These findings suggest that fenretinide may offer a new approach to therapeutic modulation of pathological mucus production in CF.

• MeSH
• aplikace orální MeSH
• buněčné linie MeSH
• cystická fibróza komplikace   genetika   patologie   MeSH
• fenretinid aplikace a dávkování   MeSH
• fosfolipidy metabolismus   MeSH
• hlen metabolismus   MeSH
• krysa rodu rattus MeSH
• kyselina arachidonová metabolismus   MeSH
• kyseliny dokosahexaenové metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• mucin 5AC metabolismus   MeSH
• mucin 5B metabolismus   MeSH
• myši inbrední CFTR MeSH
• myši MeSH
• plíce účinky léků   metabolismus   patologie   MeSH
• pneumonie mikrobiologie   patologie   prevence a kontrola   MeSH
• pseudomonádové infekce mikrobiologie   patologie   prevence a kontrola   MeSH
• Pseudomonas aeruginosa patogenita   MeSH
• respirační sliznice cytologie   metabolismus   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• krysa rodu rattus MeSH
• lidé MeSH
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

The airway epithelium restricts the penetration of inhaled pathogens into the underlying tissue and plays a crucial role in the innate immune defense against respiratory infections. The whooping cough agent, Bordetella pertussis, adheres to ciliated cells of the human airway epithelium and subverts its defense functions through the action of secreted toxins and other virulence factors. We examined the impact of B. pertussis infection and of adenylate cyclase toxin-hemolysin (CyaA) action on the functional integrity of human bronchial epithelial cells cultured at the air-liquid interface (ALI). B. pertussis adhesion to the apical surface of polarized pseudostratified VA10 cell layers provoked a disruption of tight junctions and caused a drop in transepithelial electrical resistance (TEER). The reduction of TEER depended on the capacity of the secreted CyaA toxin to elicit cAMP signaling in epithelial cells through its adenylyl cyclase enzyme activity. Both purified CyaA and cAMP-signaling drugs triggered a decrease in the TEER of VA10 cell layers. Toxin-produced cAMP signaling caused actin cytoskeleton rearrangement and induced mucin 5AC production and interleukin-6 (IL-6) secretion, while it inhibited the IL-17A-induced secretion of the IL-8 chemokine and of the antimicrobial peptide beta-defensin 2. These results indicate that CyaA toxin activity compromises the barrier and innate immune functions of Bordetella-infected airway epithelia.

• MeSH
• adenylátcyklasový toxin genetika   metabolismus   toxicita   MeSH
• AMP cyklický metabolismus   MeSH
• Bordetella pertussis genetika   metabolismus   MeSH
• bronchy cytologie   metabolismus   mikrobiologie   MeSH
• cytoskelet metabolismus   MeSH
• epitelové buňky metabolismus   mikrobiologie   MeSH
• interleukin-6 metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• mucin 5AC metabolismus   MeSH
• pertuse genetika   metabolismus   mikrobiologie   MeSH
• signální transdukce účinky léků   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Adenom pylorických žlázek je vzácný nádor charakterizovaný gastrickou diferenciací nádorových buněk. Prezentujeme sestavu 23 těchto adenomů, které se vyskytovaly v jícnu (3 případy), korporální sliznici žaludku (7 případů), duodenu (10 případů), žlučníku (dvakrát) a v choledochu (jednou) starších osob (průměrný věk 74,5 let). Histologicky tvořily převážnou část lézí hustě uspořádané tubulární žlázky vystlané kubickým nebo nízce cylindrickým epitelem s bazálně uloženými jádry. Povrch byl krytý vysokým cylindrickým epitelem foveolárního typu. Imunohistochemicky vykazovala většina žlázek pozitivitu hlenu pylorických žlázek MUC6, zatímco povrchový epitel a některé žlázky exprimovaly foveolární hlen MUC5AC. Ve všech nádorech se vyskytovaly disperzní neuroendokrinní buňky. Ve třech případech (dvakrát ve žlučníku a jednou v jícnu) byla prokázána ložisková intestinální metaplazie, která se vyznačovala pozitivitou CK20, CDX2 a MUC2. Ložisková low-grade dysplazie byla nalezena v 5 adenomech (21,7 %) a high-grade dysplazie v jednom adenomu jícnu (4,4 %), tj. celkem se dysplazie vyskytovala v 6 z 23 adenomů (26,1 %). V dalším nádoru jícnu byl diagnostikován invazivní adenokarcinom. Disperzní p53 pozitivní buňky se vyskytovaly ve všech nádorech. Jejich počet byl výrazně zvýšen v low-grade dysplazii a zvláště v high-grade dysplazii a v adenokarcinomu. Molekulárně genetické výsledky potvrdily nádorovou povahu těchto lézí s nejistým biologickým chováním, charakterizovanou akumulací p53, mutacemi v onkogenech GNAS, KRAS, CTTNB1, tumor supresorových genech SMAD4 aTP53. Klíčová slova: adenom pylorických žlázek – žaludeční hleny – gastrická metaplazie a heterotopie – dysplazie – adenokarcinom – mutace

Pyloric gland adenoma is a rare neoplasm with a gastric epithelial differentiation. We report 23 cases of pyloric gland adenoma in older persons, with a mean age of 74 years (range 52 - 87 years). They occurred in the esophagus (3 cases), corporal gastric mucosa (7 cases), duodenum (10 cases), gallbladder (2 cases), and choledochus (one case). Histologically, they were characterized by closely packed pyloric gland-type tubules with a monolayer of cuboidal to low columnar epithelial cells containing basally located round nuclei, and a superficial layer of tall, columnar, foveolar-type epithelium. Immunohistochemically, most tumor glands expressed pyloric gland mucin MUC6, whereas MUC5AC was positive in superficial gastric foveolar epithelium, and in a minority of glands. In addition, scattered neuroendocrine cells positive for chromogranin A and/or synaptophysin were seen in all cases. In 3 cases (two cases in the gallbladder and one case in the esophagus), areas of intestinal metaplasia with CK20, CDX2, and MUC2 positivity were found. Focal low-grade dysplasia was found in five cases (21.7%), and diffuse high-grade dysplasia was seen in one adenoma (4.4%), i.e., 6 of 23 PGAs (26.1%) showed dysplastic features. In one esophageal case, an invasive adenocarcinoma was diagnosed. Scattered p53 positive cells were found in all cases. Their number was higher in lesions with low-grade dysplasia and it was substantially increased in adenoma with high-grade dysplasia and in adenocarcinoma. Our molecular genetic results indicate that pyloric gland adenoma’s neoplastic nature is associated with p53 accumulation, mutations in oncogenes GNAS, KRAS, CTTNB1 and tumor suppressor genes SMAD4, and TP53. Pyloric gland adenoma can evolve into dysplasia and adenocarcinoma. Keywords: pyloric gland adenoma – gastric mucins – gastric metaplasia and heterotopia – dysplasia – adenocarcinoma – mutation

• Klíčová slova
• žaludeční hleny, gastrická metaplazie a heterotopie,
• MeSH
• adenokarcinom patologie   MeSH
• adenom * patologie   MeSH
• choristom patologie   MeSH
• gastritida komplikace   MeSH
• gastrointestinální nádory * patologie   MeSH
• imunohistochemie MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• metaplazie patologie   MeSH
• mucin 5AC metabolismus   MeSH
• mucin 6 metabolismus   MeSH
• multiplexová polymerázová řetězová reakce MeSH
• mutace MeSH
• mutační analýza DNA MeSH
• nádorová transformace buněk MeSH
• nádorové biomarkery genetika   MeSH
• nádory duodena genetika   patologie   MeSH
• nádory jícnu genetika   patologie   MeSH
• nádory žaludku genetika   patologie   MeSH
• nádory žlučníku genetika   patologie   MeSH
• prekancerózy imunologie   patologie   MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• žaludeční sliznice * imunologie   patologie   MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Intestinální metaplazie (IM) se v poslední době rozděluje podle imunohistochemických nálezů na dva typy: (1) smíšený gastrický a intestinální typ - nekompletní IM a (2) “čistý” intestinální typ - kompletní IM. V naší studii prezentujeme 30 případů IM žaludku a 30 případů IM jícnu hodnocených podle imunohistochemického průkazu žaludečních hlenů. V žaludku začínala metaplazie jako nekompletní IM v oblasti žlazových krčků a směrem k povrchu sliznice postupně vyzrávala do kompletního typu. V průběhu vyzrávání docházelo k postupnému úbytku exprese foveolárního žaludečního hlenu MUC5AC i hlenu pylorických žlázek MUC6. U dvou z 30 případů odpovídala IM nekompletnímu hyperproliferačnímu typu. V jednom případě byla v nekompletní IM prokázána high-grade adenomatózní dysplázie. V jícnu se IM nacházela v zánětlivě změněné sliznici typu kardie a byla obvykle nekompletní, s téměř difúzní pozitivitou MUC5AC a s ojedinělou expresí MUC6. Pohárkové buňky a nehojné cylindrické buňky produkovaly intestinální hlen MUC2. Buněčná proliferace byla v nekompletní IM difúzně zvýšená. V jednom případě se v nekompletní IM nacházela low-grade adenomatózní dysplázie. V kontrolní skupině jsme se zaměřili na výskyt žaludečních hlenů v normální a zánětlivě změněné sliznici střeva. Soubor tvořilo 50 biopsií duodenální sliznice, 50 biopsií sliznice ilea a 50 biopsií sliznice tlustého střeva. Zánětlivé změny zahrnovaly celiakii, Crohnovu nemoc a ulcerózní kolitidu. V normální sliznici exprimovaly nehojné pohárkové buňky MUC2 i MUC5AC. Četnější MUC5AC pozitivní pohárkové a cylindrické buňky byly prokázány u chronických zánětů a ojedinělé MUC6 pozitivní buňky u celiakie a Crohnovy choroby tenkého střeva. Závěr: naše nálezy prokázaly, že nekompletní IM představuje iniciální fázi vývoje IM, která může vyzrávat do kompletní IM nebo perzistovat a ohrožovat progresí do dysplázie a adenokarcinomu. Dále jsme zjistili pozitivitu “gastric-type” mucinů v normální a zánětlivě změněné sliznici střeva. U zánětů byla exprese MUC5AC výraznější než v normální sliznici. Exprese MUC5AC v kompletní IM, ale také v normální a zánětlivě změněné sliznici tenkého a tlustého střeva ukazuje, že přítomnost tohoto hlenu není možno považovat za projev nezralosti IM. V Barrettově jícnu odpovídaly naše nálezy výsledkům předchozích studií s výjimkou pozitivity CDX2, kterou jsme pozorovali ve stejné intenzitě v obou typech IM.

Recently, a new classification of intestinal metaplasia (IM) using immunohistochemical mucin markers was proposed. Two following types of IM were defined: (1) a mixed gastric and intestinal type also called incomplete IM; (2) a purely intestinal type, also called complete IM. We present a series of 30 cases of gastric IM and 30 cases of IM of the esophagus, using this new classification. In all gastric cases, IM developed in the mucus-neck region in the form of incomplete IM. Toward the mucosa surface, it matured gradually into complete IM. This maturation showed a gradual reduction of both foveolar mucin MUC5AC and pyloric gland mucin MUC6. In two of 30 cases, IM was of the incomplete hyperproliferative type. In one case, focal high-grade adenomatous dysplasia was found in the incomplete IM. In the esophageal cases, IM was found in inflamed cardiac-type mucosa, and it was usually of the incomplete type, with almost diffuse positivity for MUC5AC and with rare positivity of MUC6. The goblet cells and some cylindrical cells expressed intestinal mucin MUC2. The proliferation was higher than in the complete IM, and in one case, focal low grade adenomatous dysplasia was found. In addition, we examined the expression of mucins in normal and inflamed intestinal mucosa. These cases included 50 duodenal biopsies, 50 biopsies from the ileum, and 50 biopsies from the colon. The inflamed cases included celiac disease, Crohn's disease, and ulcerative colitis. Some goblet cells of the normal intestinal mucosa expressed both MUC2 and MUC5AC. More numerous MUC5AC+ goblet cells were found in the inflamed intestinal mucosa. In the duodenal and small intestinal mucosa, even the MUC6 positivity of a few goblet or cylindrical cells was found. In sum, our results indicate that incomplete IM is an initial step of the metaplastic process. It can mature into complete IM, or alternatively, it can develop dysplasia or adenocarcinoma. In addition, we found that gastric-type mucins are also present in normal or inflamed intestinal mucosa, and that the expression of these mucins is even enhanced in some inflammatory conditions. The expression of MUC5AC in complete IM and in normal or inflamed mucosa suggests that MUC5AC cannot be regarded as a marker of immaturity. In Barrett esophagus, our results were similar to those of previous studies, except for CDX2 of which reactivity was seen also in incomplete type of IM.

• MeSH
• Barrettův syndrom patologie   MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• biopsie MeSH
• dospělí MeSH
• duodenum patologie   MeSH
• ezofágus * patologie   MeSH
• gastritida MeSH
• Helicobacter pylori MeSH
• ileum patologie   MeSH
• imunohistochemie * využití   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• metaplazie * diagnóza   patologie   MeSH
• mucin 5AC MeSH
• mucin 6 MeSH
• muciny fyziologie   MeSH
• proliferace buněk MeSH
• protilátky MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• střevní sliznice patologie   MeSH
• žaludeční sliznice * patologie   MeSH
• žaludek patologie   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• senioři nad 80 let MeSH
• senioři MeSH
• ženské pohlaví MeSH