Cílem projektu je ověření významu buněčných signálních drah řízených kinázami p38 a JNK pro proliferaci a přežití buněčných linií maligního melanomu a pro jejich odpověď na chemoterapii. Dále bude ověřena možnost indukce autofagie v buňkách maligního melanomu cílenou inhibicí signální dráhy kinázy p38 a budou otestovány možnosti využití modulace takto indukované autofagie v cílené terapii maligniho melanomu. Bude též stanoven možný význam autofagie pro odpověď maligního melanomu na cytotoxickou chemoterapii a na molekulárně-cílenou terapii sorafenibem. Při řešení projektu budou využity specifické inhibitory studovaných signálních drah a experimenty budou prováděny na panelu buněčných liní maligního melanomu. Budou používány zejména následující techniky: kultivace buněčných linií, transfekce siRNA a DNA, SDS-PAGE a "Western blotting", testy cytotoxicity, techniky pro detekci apoptózy, průtoková cytometrie, fluorescenční a elektronová mikroskopie.; The aim of the proposed project is to determine the importance of p38 and JNK MAPK pathways for the proliferation and survival of malignant melanoma cells, and for their response to chemotherapy. The possibility of autophagy induction by targeted inhibition of p38 signaling will be confirmed on a panel of melanoma cell lines. The possible use of the modulation of induced autophagy in the targeted therapy of melanoma will be also tested. This project will also determine whether autophagy plays any role in the response of malignant melanoma cells to cytotoxic chemotherapy and in their response to RAF inhibitor sorafenib. The planned experiments will be performed on a panel of melanoma cell lines. Specific inhibitors of the studied signaling pathways willbe used, together with the following techniques: cell culture, siRNA and DNA transfections, SDS-PAGE and Western blotting, cytotoxicity tests, techniques for the detection of apoptosis, flow cytometry, fluorescence microscopy and electron microscopy.

Doba řešení: 2009-2011

Obsahuje literaturu