• MeSH
• Animal Experimentation MeSH
• Glutathione Reductase antagonists & inhibitors   MeSH
• Hepatocytes drug effects   MeSH
• Rats MeSH
• Culture Techniques MeSH
• Chemical and Drug Induced Liver Injury MeSH
• Mice MeSH
• Acetaminophen adverse effects   MeSH
• Drug Overdose MeSH
• Chromatography, High Pressure Liquid MeSH
• Prescription Drug Misuse MeSH
• Check Tag
• Rats MeSH
• Mice MeSH

• Conspectus
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NML Fields
• biochemie
• NML Publication type
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

The aim of the project is the description of a newly found toxic mechanism of acetaminophen toxicity that contributes to hepatotoxic effect of acetaminophen (APAP); our aim has been stated regarding our published and also unpublished data. After APAP overdose, the specific APAP metabolite, APAP-SG conjugate, is produced in the cell. This compound has been considered as non-toxic generally. However, we proved that APAP-SG is a potent inhibitor of glutathione reductase, a crucial intracellular enzyme. In this project, we intend to synthesize and purify APAP-SG in sufficient quantity. Therefore, we require purchase of preparative system. Consequently, we will use APAP-SG to detailed study of its effects in cultured hepatocytes in vitro and in vivo in mice and rats. As well, we will estimate the hepatoprotection against the conjugate effects. The last part of the project has been focused on the study of toxicity of APAP-SG cleavage product, APAP-Cys. This effect will be tested in renal tubular cell lines.

Záměrem projektu je popis zcela nového mechanismu, který se dle našich jak pilotních, tak i již publikovaných výsledků účastní toxického poškození hepatocytů při předávkování acetaminofenem (APAP). Během tohoto předávkování vzniká v buňce specifický APAP metabolit, tzv. APAP-SG konjugát, který byl až dosud považován za zcela netoxický. My jsme ale prokázali, že je schopný inhibice glutathionreduktasy, tj. nezastupitelného intracelulárního enzymu. V rámci projektu chceme nejprve tento konjugát APAP-SG syntetizovat a purifikovat v dostatečném množství (k tomuto účelu je plánován nákup preparativní sestavy) a následně ho využít k podrobnému studiu jeho účinků v podmínkách in vitro na kultivovaných hepatocytech a in vivo na myších a potkanech. Kromě toho se plánujeme zaměřit také na možnost hepatoprotekce před účinky tohoto konjugátu. Třetí část projektu je zaměřena na studium toxicity štěpného produktu APAP-SG konjugátu, kterým je APAP-cystein, na buněčných liniích renálních tubulárních buněk.

Doba řešení: 2013-2015