Východisko: Reziduální leukemické buňky, jsou-li přítomny v autologní kostní dřeni či CD34 + koncentrátech progenitorových buněk periferní krve, mohou zvýšit riziko relapsu po autotransplantaci. Je popsáno využití nového principu používaného ve fotodynamické terapii, jímž je indukce syntézy endogenního fotosenzibilizátoru, protopor- fyrinu IX, v nádorových buňkách, aplikací jeho metabolického prekurzoru, 5-aminolevulové kyseliny, ke specifické destrukci leukemických buněk. Metody a výsledky. Stanovením viability buněk redukcí tetrazoliové soli MTT, průtokovou cytometrií s použitím propidium jodidu a stanovením buněčné proliferace inkorporací bromodeoxyuridinu jsme studovali účinek fotody- namické terapie, založené na aplikaci 5-aminolevulové kyseliny, na buňky leukemických linií HL60 (promyelocy- tární leukémie), HEL (erytroleukémie), DAUDI (B-buněčná leukémie), JURKAT (T-buněčný lymfom), na blastické buňky pacientů s akutní myeloidní leukémií a na normální lymfocyty a progenitorové buňky normální kostní dřeně. V in vitro experimentech fotodynamická terapie založená na aplikaci 5-aminolevulové kyseliny (1 mM, 4 h, 18 J/cm 2 ) snížila počty viabilních leukemických buněk o více než dva řády (s výjimkou buněk HEL) a eliminovala blastické buňky v preparátech mononukleárních buněk u šesti ze sedmi pacientů s akutní myeloidní leukémií. Naproti tomu viabilita normálních klidových lymfocytů byla postižena jen nepatrně (nárůst počtu nekrotických buněk po fotodynamické terapii ze 6 na 11 % ) a klonogenní aktivity progenitorových buněk normální kostní dřeně byly sníženy na přijatelnou míru (CFU-GM na 60 % a BFU-E na 55 % původní aktivity). Závěry: Fotodynamická terapie založená na aplikaci 5-aminolevulové kyseliny je perspektivní metodou pro specifickou destrukci leukemických buněk v autologních transplantátech.

Background. Residual leukemic cells if present in autologous bone marrow grafts or CD34 + concentrates obtained from peripheral blood may increase the risk of relapse after autotransplantation. We are presenting the employement of a new method which was introduced into the photodynamic therapy, namely enhancement of synthesis of the photosensitizing compound, protoporphyrin IX, in cancer cells, following application of its metabolic precursor, 5-aminolevulinic acid, for the specific destruction of leukemic cells. Methods and Results. By determining cell viability using tetrazolium salt reduction (MTT), by flow cytometry- propidium iodide assay and by determining cell proliferation using bromodeoxyuridine incorporation we studied the effect of photodynamic therapy based on the application of 5-aminolevulinic acid on the cells of leukemic cell lines HL60 (human promyelocytic leukemia), HEL (erythroleukemia), DAUDI (B-cell leukemia), JURKAT (T-cell lymphoma), blast cells of patients with acute myelogenous leukemia as well as on normal lymphocytes and normal human bone marrow progenitors. In in vitro experiments photodynamic therapy based on an administration of 5-aminolevulinic acid (1 mM, 4 h, 18 J/cm 2 ) lowered the number of viable leukemic cells by over 2 orders (with the exception of HEL cells) and eliminated blast cells in mononuclear cell preparations of six out of seven patients with acute myelogenous leukemia. On the other hand the viability of normal resting lymphocytes was little affected by photodynamic therapy (number of necrotic cells increased from 6 to 11 %) and also the clonogenic activity of the progenitor cells of normal bone marrows did not decrease substantially (CFU-GM to 60 % and BFU-E to 55 % of the original activity). Conclusions. Photodynamic therapy based on the application of 5-aminolevulinic acid is a perspective method for the specific destruction of leukemic cells in autologous transplants.

Ústav hematologie a krevní transfuze Praha

Selective photodynamic destruction of leukemic cells

Selektivní fotodynamická destrukce leukemických buněk = Selective photodynamic destruction of leukemic cells /

Selective photodynamic destruction of leukemic cells /

Lit: 33

Souhrn: eng