Cílem studie bylo zhodnotit morfologické a genetické změny bronchiální sliznice v závislosti na nálezu při autofluorescenční bronchoskopii (AFB) a posoudit přínos této metody pro detekci časných stadií bronchogenního karcinomu v rizikové populaci. Do studie bylo zahrnuto 232 kuřáků s expozicí větší než 30 pack-years a s FEV1 pod 70 % normy, indikovaných k bronchoskopii v rámci standardního diagnostického postupu. Nejprve byla provedena bronchoskopie v bílém světle (WLB) a potom AFB zařízením Onco-LIFE firmy Xillix. Byly odebrány biopsie z míst pozitivních při WLB a/nebo AFB a kontrolní biopsie z míst normálního vzhledu. Vzorky byly vyšetřeny histologicky a molekulárně geneticky. Na histologii bylo odebráno 474 biopsií, z nichž 398 bylo hodnotitelných. Negativních biopsií (normální nález, zánětlivé změny, hyperplazie/metaplazie a lehká dysplazie) bylo 309 (77,6 % hodnotitelných biopsií), pozitivních biopsií bylo 89 (22,4 %), z toho 24x byla zachycena střední/těžká dysplazie, 7x karcinom in situ, jedenkrát mikroinvazivní karcinom a 57x invazivní karcinom. Celková senzitivita a specificita založená na histologii byla po vyloučení jednoznačných nádorů pro WLB 31,3 % a 91,6 % a pro AFB 34,4 % a 80,3 %. Nižší specificita AFB je statisticky významná. AFB neukázala při detekci premaligních změn větší efektivitu ve srovnání se standardní bronchoskopií. Molekulárně genetickým vyšetřením histologicky negativních vzorků (n=97) byl prokázán statisticky významně vyšší výskyt ztráty heterozygozity (LOH) v oblasti kódující mismatch repair gen hMLH1 na krátkém raménku 3. chromozomu (D3S1611) a v jednom z lokusů v oblasti tumor supresorových genů na 9. chromozomu (D9S259) a zvýšenou expresi mRNA telomerázové podjednotky hTERT v biopsiích z míst, která byla při AFB pozitivní, než v biopsiích odebraných náhodně jako kontroly. Dle našich výsledků nemá AFB význam pro detekci histologicky prokazatelných preneoplastických změn, umožňuje však záchyt časnějších stadií karcinogeneze, projevujících se pouze genetickými změnami.

The aim of the study was to estimate morphological and genetic changes of the bronchial mucosa in relation to autofluorescence bronchoscopy (AFB) findings, and to evaluate the benefit of the method for detection of early bronchogenic carcinoma in a high-risk population. 232 smokers with cigarette exposure higher than 30 pack-years and with FEV1 lower than 70 % of the predicted value, scheduled for bronchoscopy as a part of their standard diagnostic work up, were enrolled in the study. AFB with the Onco-LIFE system was performed following standard white light bronchoscopy (WLB). Biopsies were taken from positive or suspicious areas in WLB or AFB and also from areas vrith normal appearance. The samples were examined by histological and molecular genetic methods. From a total of 474 biopsies, 398 were suitable for analysis. Normal bronchial mucosa, inflammation, hyperplasia/squamous metaplasia or mild dysplasia were found in 309 (77.6 %) biopsies, which were classified as negative. The 89 (22.4 %) positive biopsies included 24 moderate/severe dysplasias, 7 carcinomas in-situ, one microinvasive carcinoma and 57 invasive carcinomas. The overall histology-based sensitivity and specificity values after excluding invasive carcinoma were 31.3 % and 91.6 % for WLB and 34.4 % and 80.3 % for AFB, respectively. The lower specificity of AFB was statistically significant. In detecting premalignant changes, AFB was not more effective than WLB. Molecular assessment of histologically negative samples (n = 97) demonstrated a significantly higher incidence of loss of heterozygosity (LOH) in the mismatch repair gene region on the short arm of chromosome 3 (D3S1611) and in one locus in the tumour suppressor gene region of chromosome 9 (D9S259), and higher expression of mRNA telomerase subunit hTERT in biopsies from sites positive in AFB than in randomly sampled biopsies, suggesting higher sensitivity of AFB in detection of early stages of Ccircinogenesis in comparison with standard histology. According to our results, AFB is not effective for the detection of histologically proven preneoplastic changes. but it is useful in detecting earlier stages of carcinogenesis manifested only by genetic alterations.

Pneumologická klinika UK 2 LF a FN Motol Praha

Detection of morphological and genetic changes of the bronchial mucosa by autofluorescence bronchoscopy in heavy smokers

Lit.: 22