Cíl práce: Chemiluminiscenční metodou s luminolem vyhodnotit produkci reaktivních kyslíkových částic (ROS) v nativním ejakulátu a v suspenzi spermií a posoudit korelaci těchto dvou metod. Typ studie: Prospektivní laboratorní studie. Název a sídlo pracoviště: Porodnicko-gynekologická klinika LF UP a FN Olomouc. Metodika: Soubor tvořilo 17 fertilních dobrovolníků, 19 normospermiků z infertilních párů, kde byl prokázán ženský faktor neplodnosti a 15 normospermiků s idiopatickou neplodností páru. Produkce ROS byla vyšetřena stejnou chemiluminiscenční metodou s luminolem současně ve vzorcích nativního ejakulátu i vzorcích suspenze promytých spermií. Výsledky: Hodnoty ROS v nativním ejakulátu byly řádově nižší než v suspenzi spermií. Nebyly zjištěny statisticky významné rozdíly mezi produkcí ROS u fertilních dobrovolníků a mužů z neplodných párů. Byla potvrzena korelace mezi log ROS v nativním ejakulátu a v suspenzi promytých spermií v PBS u všech tří skupin (FV r=0,85, p=1,5×10-5; NM r=0,76, p<2×10-4; NMI r=0,75, p<1,5×10-3). Závěr: Měření ROS v nativním ejakulátu je jednodušší, rychlejší a lépe odráží aktuální úroveň oxidačního stresu než měření v suspenzi spermií. Zavedení této metody měření ROS může doplnit algoritmus diagnostiky i léčby mužské neplodnosti a být vodítkem pro antioxidační či antibiotickou léčbu.

Objective: To determine Reactive Oxygen Species (ROS) production in neat semen and spermatozoa suspension using chemiluminescence and to examine correlation between both methods. Subject: Prospective laboratory study. Setting: Department of Obstetric and Gynecology, University Hospital, Olomouc. Methods: The study included fertile volunteers (FV, n = 17), men from infertile couples (NM, n = 19) and men with idiopathic infertility (NMI, n = 15). ROS levels were determined by the same method in neat and washed semen samples. Results: The ROS production in neat semen was lower than that in spermatozoa suspension. There was no significant diference in ROS production between volunteers and males from infertile couples. There was a significant correlation between log ROS in neat semen and in spermatozoa suspension in studied groups (FV r=0.85, p=1.5×10-5; NM r=0.76, p<2×10-4; NMI r=0.75, p<1.5×10-3). Conclusions: Measurement of ROS in neat semen is simpler, faster and better reflecting the actual level of oxidative stress than the same measurement in spermatozoa suspension. The implementation of this method can complement the algorithm of diagnostics and treatment of male infertility and be helpful in selection of patients for antioxidant or antibiotic treatment.

Gynekologicko porodnická klinika FN a LF UP Olomouc

Laboratoř experimentální medicíny LF UP Olomouc

Ústav biologie LF UP Olomouc

Comparison of reactive oxygen species production in neat semen and washed spermatozoa

Lit.: 18