Úvod: I když je vrozený defekt femuru (PFFD) dobře charakterizován morfologicky, změny na molekulární úrovni nejsou v literatuře popsány. Tento informační nedostatek společně s neznámou etiologií vady nás vedl k myšlence analýzy procesů angiogeneze a osteogeneze v tkáni pakloubu pacientů s PFFD v porovnání s fyziologickou kostí. Očekávali jsme rozdíly v genové expresi, zejména kvantitativní. Materiál a metodika: Během plánovaných ortopedických výkonů jsme odebrali kostní bloček, vložili do prezervačního média (RNA stabilization reagent), které brání degradaci RNA, a hluboce zmrazili. Poté jsme izolovali RNA a transkripční profil studovali biočipovou analýzou (SuperArray Bioscience Corporation). Celkem je tímto způsobem možno detekovat 113 genů osteogeneze a 113 genů angiogeneze. Od října roku 2005 do konce roku 2008 jsme vyšetřili vzorky od 7 pacientů s PFFD a 3 kontrolní vzorky. Některé analýzy jsme pro ověření výsledků opakovali, celkem jsme použili 13 čipů pro osteogenezi a 11 pro angiogenezi. Výsledky: Zaznamenali jsme rozdíly v kvantitě i typech exprimovaných genů. Některé geny byly exprimovány u PFFD více proti kontrolnímu vzorku (gen pro kalcitoninový receptor, kolagen XII, kolagen I alfa2, kolagen II, kolagen IX, FGFR2, fibronektin, integrin), jiné naopak vykazovaly sníženou expresi (gen pro annexin A5, kolagen XVIII alfa 1, kolagen I alfa1, katepsin K, FGFR1, FGFR3, IGF2, VEGFB). Závěr: Naše původní předpoklady se potvrdily rozdílnou genovou expresí. Prozatím získané výsledky nedovolují zobecnění, jsou pouze prvním krokem k dalším experimentům, kterými je třeba potvrdit avizované informace a propojit je s klinickými nálezy, jako je alternativní cévní zásobení postižené končetiny u některých pacientů.

Ortopedická klinika IPVZ a 1 LF UK FN Na Bulovce Budínova 2 180 81 Praha

First experience with molecular analysis of pseudoarthrosis tissue in congenital short femur (PFFD)

Lit.: 12