Dle současných doporučených kritérií pro diagnostiku a staging nemoci s Lewy tělísky je nezbytné hodnocení přítomnosti Lewyho tělísek a Lewyho neuritů v konkrétních oblastech mozku. Nejpoužívanější systémy pro staging určují míru postižení na podkladě přítomnosti Lewyho patologie v konkrétních anatomických oblastech mozku v kaudo-rostrálním směru. Výběr správného klonu protilátky a využití optimalizovaného protokolu včetně efektivního odmaskování epitopu je pro vizualizaci diagnostických depozit nezbytné. Cílem naší studie bylo zhodnocení využitelnosti některých komerčně dostupných a široce používaných primárních protilátek proti alfa-synukleinu v kontextu post mortem diagnostiky a stagingu nemoci s Lewyho tělísky. Zaměřili jsme se na imunohistochemický a imunofluorescenční průkaz Lewyho patologie pomocí protilátek proti všem základním částem polypeptidového řetězce alfa-synuklein, včetně konformačně specifického klonu a klonu pro detekci posttranslačně modifikovaného proteinu.

According to the current recommended criteria for the diagnosis and staging of the Lewy body disease, it is necessary to evaluate the presence of Lewy bodies and Lewy neurites in specific areas of the brain. The most widely used staging systems assess the degree of neurodegeneration based on the distribution of Lewy pathology across specific anatomical regions of the brain, progressing in a caudo-rostral trajectory. Choosing the right antibody clone and using an optimized protocol including effective antigen retrieval is essential for the visualization of diagnostic deposits. The aim of our study was to evaluate the utility of some commercially available and widely used primary antibodies against alpha-synuclein in the context of post mortem diagnosis and staging of Lewy body disease. We focused on immunohistochemical and immunofluorescence analysis of Lewy pathology using antibodies with epitopes in all parts of the alphasynuclein polypeptide chain, including a conformation-specific clone and a clone for the detection of post-translationally modified protein.

Neurologická klinika Lékařská fakulta Univerzity Palackého a Fakultní nemocnice Olomouc Olomouc

Ústav klinické a molekulární patologie Lékařská fakulta Univerzity Palackého a Fakultní nemocnice Olomouc Olomouc

Variability of antibody clones against alpha-synuclein and their use in the detection of Lewy pathology