Growth temperature range, resistance to selective antibiotics, activities of 23 enzymes, protein fingerprints and fatty acids composition of the spirochaetal strain BR91, isolated from the Culex pipiens mosquito, were tested. The spirochaetes were grown in BSK-H Complete liquid medium. The optimal in vitro growth temperature of the strain was 33 °C. Strain BR91 was sensitive to trimethoprim, nalidixic acid, 5-fluorouracil, and tolerated phosphomycin. The strain produced acid and alkaline phosphatase, esterase (C4), esterase-lipase (C8), leucine arylamidase, naphthol-AS-BI-phosphohydrolase and α-fucosidase. Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) assay revealed several major proteins in the size range of 13-16 kDa, 22-30 kDa and 37-131 kDa. Fatty acid methyl ester (FAME) analysis showed that C₁₄:₀, C₁₆:₀, C₁₈:₁ ω9c and summed feature 5 (C₁₈:₂ ω6,9c and/or C₁₈:₀ anteiso) are major fatty acids. This study highlights certain phenotypic differences between strain BR91 and the Lyme disease spirochaete Borrelia burgdorferi, and supports the hypothesis that strain BR91 represents a unique taxonomical entity in a system of spirochaetal species.
- MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- bakteriální proteiny analýza MeSH
- Borrelia burgdorferi MeSH
- Culex mikrobiologie MeSH
- Culicidae MeSH
- enzymy analýza MeSH
- kultivační média chemie MeSH
- mastné kyseliny analýza MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- Spirochaetaceae chemie klasifikace izolace a purifikace fyziologie MeSH
- teplota MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- dospělí MeSH
- Flavivirus MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- neutralizační testy MeSH
- plakové testy MeSH
- protilátky virové krev MeSH
- virus západního Nilu imunologie izolace a purifikace růst a vývoj MeSH
- západonilská horečka epidemiologie krev MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
During the years 1999-2002, a total of 4,898 individuals of 26 species of hematophagous insects (4,149 mosquitoes, 583 black flies, and 166 tabanid flies) was examined for the presence of spirochetes using dark-field microscopy. There was an overall recovery of spirochetes from the midguts of Culicidae and Simuliidae of 23.5% and 11.4%, respectively. Spirochetes were not detected in Tabanidae. Seven spirochetal strains have been successfully recovered from mosquitoes and black flies: BR149 (Culex pipiens), BR151 (Cx. pipiens), BR173 (Cx. pipiens), BR177 (Cx. pipiens), BR193 (Aedes cinereus), BR208 (Cx. pipiens), and BR231 (Simulium noelleri). The strains have been adapted to laboratory conditions (BSK-H Complete medium). Their preliminary determination based on 16S rRNA gene sequencing has shown that they differ from the Lyme disease spirochete Borrelia burgdorferi sensu lato as well as other members of the Order Spirochaetales indicating novel bacterial species in the Family Spirochaetaceae.
- MeSH
- Culicidae mikrobiologie MeSH
- Simuliidae mikrobiologie MeSH
- Spirochaetales růst a vývoj MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
V letech 2005 a 2006 byly prováděny periodické sběry klíštěte obecného Ixodes ricinus na ostravských haldách Oskar (A) a Emma (B), částečně porostlých vegetací včetně dřevin, a na kontrolní lesní lokalitě (C) u nedalekého města Hlučín. Průměrná frekvence klíšťat (počet nasbíraných klíšťat za hodinu vlajkování) byla vysoká, na haldě A 35,3 nymf a 12,7 dospělců, na haldě B 23,3 nymf a 26,0 dospělců, a na lokalitě C 25,4 nymf a 16,8 dospělců. Mikroskopií v zástinu bylo na přítomnost borrelií Borrelia burgdorferi sensu lato vyšetřeno z každé lokality 100 nymf a 100 dospělců (50 samic a 50 samců). Průměrná prevalence B. burgdorferi s.l. v klíšťatech byla na haldě A 10,0 % u nymf a 12,0 % u dospělců, na haldě B 10,0 % u nymf a 24,0 % u dospělců, a na lokalitě C byl tento podíl 13,0 % u nymf a 17,0 % u dospělců. Rozdíly v celkové prevalenci borrelií v klíšťatech mezi haldami A nebo B a kontrolní plochou bez ohledu na stadium klíštěte nebyly statisticky průkazné, i když dospělá klíšťata z haldy B obsahovala borrelie signifikantně četněji než dospělci z haldy A. Lokality se mezi sebou lišily ve frekvenci průměrného počtu klíšťat infikovaných borreliemi za hodinu sběru: na haldě A to bylo 3,3 nymf a 1,2 dospělců, na haldě B 1,5 nymf a 2,9 dospělců, a na kontrolní lokalitě 3,1 nymf a 2,6 dospělců. Izolační pokusy byly provedeny u 16 klíšťat s přítomností většího počtu spirochét, a u 8 z nich se podařilo vykultivovat borrelie, které byly pomocí PCR-RFLP identifikovány jako B. garinii (3 izoláty: 1 Hlučín; 2 halda B), B. afzelii (4 izoláty: 1 halda A; 3 halda B) a B. burgdorferi s.s. (1 izolát halda A). Výsledky poněkud překvapivě naznačují, že ostravské haldy hlušiny, pokud jsou porostlé vegetací včetně dřevin a navštěvovány lidmi, mohou teoreticky představovat přibližně stejné potenciální riziko nákazy člověka lymskou borreliózou jako běžné lesní biotopy.
In 2005 and 2006, Ixodes ricinus ticks were collected on two slag (waste rock) heaps from coal mines in the Ostrava area (North Moravia/Silesia, Czech Republic), Oskar (site A) and Emma (site B), partially covered by vegetation including trees, and at a control forest site near Hlučín (site C). The mean numbers of I. ricinus nymphs and imagoes flagged per person-hour were high: 35.3 nymphs and 12.7 imagoes, at site A, 23.3 and 26.0, respectively, at site B, and 25.4 and 16.8, respectively, at control site C. Using dark-field microscopy, 100 nymphs and 100 imagoes (50 females and 50 males) from each site were examined for borreliae. The mean prevalence rates of Borrelia burgdorferi sensu lato in nymphs and imagoes were 10.0 % and 12.0 %, respectively, at site A, 10.0 % and 24.0 %, respectively, at site B, and 13.0 % and 17.0 %, respectively, at site C. Differences in the prevalence of borreliae in nymphal and adult ticks from the slag heaps and control site were insignificant, but adult ticks from site B compared to site A contained borreliae significantly more frequently. The mean numbers of nymphs and imagoes infected with borreliae flagged per person-hour were 3.3 and 1.2, respectively at site A, 1.5 and 2.9, respectively, at site B, and 3.1 and 2.6, respectively, at site C. Isolation experiments for borreliae were carried out only in 16 ticks containing higher numbers of borreliae, with eight of these being culture-positive. The cultured borreliae were identified by PCR-RFLP as B. garinii (3 isolates: two from site B, one from site C), B. afzelii (4 isolates: one from site A, three from site B) and B. burgdorferi s.s. (one isolate from site A). Surprisingly, the results suggest that slag heaps, when covered by woody vegetation and frequented by humans, could theoretically pose roughly the same LB transmission risk to humans as common forest biotopes.
- MeSH
- Borrelia burgdorferi komplex izolace a purifikace MeSH
- ekosystém MeSH
- klíšťata virologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
A total of 305 ticks (21 larvae, 243 nymphs, 19 females and 22 males) were collected by flagging of vegetation in suburban woods of Pisarky Park (city of Brno) from July to October 2002. The midgut of each tick was dissected out and transferred individually into BSK-H medium. After cultivation, all specimens were examined by dark-field microscopy (DFM) for the presence of borreliae. Out of 305 tick samples, 45 were (14.8%) DFM positive. The following polymerase chain reaction (PCR) then revealed 37 (12.1%) samples positive for the presence of Borrelia burgdorferi sensu lato DNA. All 37 samples were further analysed by restriction fragment length polymorphism (RFLP) method. PCR-RFLP analysis revealed 14 strains of B. afzelii (37.8%), 15 strains of B. garinii (40.5%) and 2 strains of B. burgdorferi sensu stricto (5.4%). Four samples (10.8%) showed a mixed population of these genospecies. Two samples produced atypical RFLP pattern which were detected by sequence analysis as B. valaisiana (5.4%). Isolation attempts resulted in 21 spirochaetal strains (including two stains of B. valaisiana). The results show the diversity of B. burgdorferi s.l. in tick population and refer the risk of infection by pathogenic borreliae in Brno.
- MeSH
- arachnida jako vektory mikrobiologie MeSH
- Borrelia burgdorferi komplex genetika izolace a purifikace klasifikace MeSH
- DNA bakterií izolace a purifikace MeSH
- druhová specificita MeSH
- financování organizované MeSH
- fylogeneze MeSH
- klíště mikrobiologie MeSH
- larva mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- lymeská nemoc epidemiologie přenos MeSH
- monitorování životního prostředí MeSH
- nymfa mikrobiologie MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody MeSH
- polymorfismus délky restrikčních fragmentů MeSH
- prevalence MeSH
- rizikové faktory MeSH
- zdroje nemoci mikrobiologie veterinární MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
We report West Nile virus infection of the central nervous system in a 69-year-old man, residing in North Moravia (Czech Republic), who visited the USA from 6 July to 31 August 2002. He developed fever with fatigue at the end of his US stay, and was hospitalized in Ostrava after his return on 3 September with fever (up to 39.5 degrees Celsius), fatigue, anorexia, moderate laryngotracheitis, dizziness, insomnia, blurred speech, and a marked bradypsychism. EEG demonstrated a slow bifrontal theta-delta activity, and CT of the brain a slight hydrocephalus. A significant increase of antibodies neutralizing West Nile virus was detected between the first (1:16) and second (1:256) blood serum sample. The patient recovered gradually and was released from hospital on 16 September. This is the first recorded human case of West Nile fever (WNF) imported to the Czech Republic. Nine similar cases of WNF import from the USA have already been reported in other European countries - France, Denmark, the Netherlands, and Germany.
- MeSH
- cestování MeSH
- financování organizované MeSH
- lidé MeSH
- senioři MeSH
- západonilská horečka diagnóza MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
- Spojené státy americké MeSH
- MeSH
- Culicidae MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- infekce alfaviry epidemiologie MeSH
- katastrofy MeSH
- lidé MeSH
- prevalence MeSH
- protilátky virové krev MeSH
- virus Bunyamwera imunologie MeSH
- virus Sindbis imunologie MeSH
- viry kalifornské encefalitidy imunologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
Ve středočeském zátopovém území bylo pomocí hemaglutinačně-inhibičního testu (HIT) a plak-redukčníhoneutralizačního testu (PRNT) vyšetřeno 497 místních obyvatel na protilátky proti komárypřenášeným virům Ťahyňa (TAHV), West Nile (WNV), Sindbis (SINV) a Batai (BATV; synonymumČalovo). Krevní vzorky byly odebrány v září 2002 po kulminaci povodně v době kalamitního výskytukomárů. Séra 16,5 % vyšetřených osob obsahovala protilátky neutralizující TAHV (v HIT reagovalo14,9 % osob). Proti WNV v HIT sice reagovalo 6,8 % a v PRNT 1,2 % osob, ovšem za současné reakces virem klíšťové encefalitidy (KE); výsledek byl interpretován jako zkřížená reakce, a agens vyvolávajícímimunitní odpověď byl zřejmě virus KE. Protilátky k SINV i BATV byly prokázány v HITu 1,4 % osob; v PRNT se však podařilo prokázat protilátky k BATV pouze u 1 osoby (0,2 %). Rozborséroprevalence k TAHV v PRNT (obdobně i v HIT) ukázal její nezávislost na pohlaví (15,8 % u mužů,16,9 % u žen), průkazně stoupající míru s věkem (1,4 % u osob mladších 20 let, 11,2 % u osob mezi 20a 50 lety, 26,2 % u osob starších 50 let) a s intenzitou postižení místa bydliště komáří kalamitou (vkontrolní zóně D – převážně Praha – bylo séropozitivních pouze 5,0 % osob, v zóně C 14,7 %, v zóněB 20,5 %, a v nejrizikovější záplavové zóně A s maximem výskytu kalamitních komárů 28,0 % osob);nejvyšší séropozitivita (> 25 %) byla zaznamenána u obyvatel obcí Obříství, Kozly, Tuhaň, Chrást,Chlumín a Hostín. Druhé (párové) krevní vzorky byly odebrány od 150 osob z téhož souborus odstupem 6 měsíců: k infekci virem Ťahyňa během povodně anebo na podzim po ní došlo u jednéobyvatelky Obříství (sérokonverze v HIT i PRNT), méně přesvědčivé výsledky byly zaznamenányu dalších 3 osob, obyvatel Chlumína a Obříství (sérokonverze či průkazné zvýšení titru protilátekse projevilo pouze v HIT). Náš výzkum tak indikoval existenci přírodního ohniska valtické horečky(infekce TAHV) podél toku Labe v okolí města Neratovice (Obříství, Chlumín, Tuhaň; Kozly, Tišice,Chrást). Nízká aktivita TAHV byla zjištěna na dolním toku Vltavy od Zlončic až po Bukol/Zálezlice.Zvýšení populační denzity komárů po záplavách může vytvořit podmínky pro větší incidencivirových nákaz jimi přenosných, v podmínkách středních Čech, konkrétně valtické horečky. Optimálnísystémovou strategií pro kontrolu těchto nákaz je epidemiologická surveillance (zahrnujícímonitorování početnosti komárů a jejich promořenosti viry v přírodních ohniscích), na jejímžzákladě je možno navrhovat a uskutečňovat preventivní protiepidemická opatření, např. integrovanoukontrolu populací komárů.
In the Central-Bohemian area affected by the flood of 2002, 497 residents were screened forantibodies against the mosquito-borne viruses Ťahyňa (TAHV),West Nile (WNV), Sindbis (SINV) andBatai (BATV; syn. Čalovo) using the haemagglutination-inhibition (HIT) and plaque-reductionneutralization (PRNT) tests. Blood samples were collected in September 2002 when the mosquitopopulations showed the maximum density following the flood. Antibodies against TAHV (16.5 %persons in PRNT, 14.9 % in HIT), SINV (1.4 % in HIT) and BATV (1.4 % in HIT, 0.2 % in PRNT) weredetected. Although 6.8 % and 1.2 % of the subjects tested reactive with WNV in HIT and PRNT,respectively, the results were interpreted as cross-reactivity with tick-borne encephalitis virus. Theseroprevalence of TAHV(both inPRNTand HIT) showed no association with gender (15.8%of males,16.9 % of females), increased with age (1.4 % of persons younger than 20 years, 11.2 % of persons agedbetween 20 and 50 years, and 26.2 % of persons older than 50 years were positive), and correlatedwith the mosquito peri-residential challenge (5.0% residents seropositive in a mosquito-free control zone D – mostly Prague, 14.7 % in a mild-risk zone C, 20.5 % in a moderate-risk zone B, and 28.0 % inthe most heavily mosquito-infested risk zone A). The highest TAHV seropositivity rate (> 25 %) wasfound amongst the inhabitants of the villages Obříství, Kozly, Tuhaň, Chrást, Chlumín and Hostín.Paired blood samples were obtained from 150 of the persons at a 6-month interval: an infectionepisode with TAHV during or after the flood was clearly evidenced in one person living in Obříství,and less convincing findings of recent TAHV infections were found in other three residents ofChlumín and Obříství (seroconversion and/or significant antibody titres increase detected in HITonly). This serosurvey indicated the existence of an active natural focus of Valtice fever (TAHVinfection) stretched along the river Labe nearby Neratovice (Obříství,Chlumín,Tuhaň; Kozly, Tišice,Chrást), and a low TAHV activity area along the lower reaches of the river Vltava between Zlončiceand Bukol/Zálezlice.Anincreased population density of mosquitoes after the floodmayhave boostedthe incidence of mosquito-borne virus diseases, particularly Valtice fever, in Central Bohemia. Anoptimum prophylactic strategy to control these diseases would be epidemiological surveillance(including monitoring of both the density of mosquitoes and their rate of infection with viruses innatural foci) on the basis of which antiepidemic measures such as integrated mosquito control canbe taken.
- MeSH
- Culex imunologie patogenita virologie MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- lidé MeSH
- protilátky virové imunologie krev MeSH
- testy inhibice hemaglutinace využití MeSH
- virus Sindbis imunologie MeSH
- virus západního Nilu imunologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH