U pacientek s předčasným odtokem plodové vody bude ve vzorcích plodové vody odebrané transabdominální amniocentézou stanovena: a) bakteriální nálož genitálních mykoplazmat a Streptococcus agalactiae rozdílnými kvantifikačními technikami. b) intenzita intraamniální inflamatorní odpovědi na přítomnost bakterií v plodové vodě stanovením vybraných cytokinů, chemokinů a alarminů. Budou identifikovány “kritické” bakteriální nálože těchto mikroorganizmů v plodové vodě zodpovědné za rozvoj závažné intraamniální infekce a zánětu. Tento proces je zřejmě závislý na gestačním stáří, proto budou hodnoty stanoveny pro tři rozdílné periody těhotenství mezi 24.-36. týdnem gravidity. Klinické pozorování budou verifikována na experimentálním modelu vytvořeném z plodových obalů. Možnost klinického využití jednoduchého relativního kvantifikačního přístupu ke stanovení nálože genitálních mykoplazmat - threshold cycle (Ct) hodnoty z real-time PCR bude validována absolutní kvantifikací.; The sample of amniotic fluid will be retrieval by transabdominal amniocentesis. The bacterial load of genital mycoplasmas/Streptococcus agalactiae with different quantification approach along with intensity of intraamniotic inflammatory response to bacteria by a panel of cytokines, chemokines and alarmins will be determined. The “critical” values of microbial burden responsible for exhibition of intensive intraamniotic infection and inflammation will be proposed. These values will be described for three different periods of pregnancy. Clinical observations will be verified with using of amnio-chorion explant model. The efficacy of threshold cycle value of real time PCR will be validated by absolute quantification approach.

Doba řešení: 2012-2015