Východisko. DNA sekvence pocházející z chromozómu Y mohou u pacientek s Turnerovým syndromem (TS) vyvolat vznik gonadoblastomu. Riziko je u Y-pozitivních případů asi 30%. Cílem této práce je detekce Y-sekvencí na úrovni DNA, odhad mozaicizmu a jejich cytogenetická lokalizace. Klinickým vyústěním práce je preventivní gonadektomie pozitivních pacientek. Metody a výsledky. Dosud byly shromážděny vzorky od 110 pacientek. Byla porovnávána metoda PCR, kde je analýza produktu prováděna na agarózovém gelu, smetodou kvantitativní fluorescenční (QF) PCR s analýzou pomocí kapilární elektroforézy. K detekci byly zatím použity lokusy DYZ3, AMGX/Y a SRY. U lokusů DYZ3 a AMGX/Y byla použita metoda QF PCR. Pozitivní případy byly dále vyšetřeny metodou FISH. V lokusech DYZ3 a SRY bylo analýzou na agarózovém gelu detekováno 5 (4,5 %), resp. 3 (2,7 %) pozitivních případů. Kapilární elektroforézou bylo v lokusech DYZ3 a AMGX/Y detekováno 17 (15,5 %), resp. 7 (6,4 %) pozitivních pacientek. Odhad mozaiky se pohyboval v rozmezí 1:5 až 1:100 000. Závěry. Metoda QF PCR se ukázala pro diagnostiku Y-sekvencí jako jednoznačně nejcitlivější. Zároveň je možné odhadnout poměrně přesně zastoupení Y-pozitivních buněk. Metodou FISH byla potvrzena pozitivita pouze u pacientek, které měly v karyotypu marker.

Background. DNAsequences from chromosomeYcan cause gonadoblastoma development in patientswith Turner syndrome (TS). Estimated risk is about 30%. The aim of the study is detection of Y-sequences on DNA level, calculation of mosaicism and its cytogenetic location. Clinical result of the study is the recommendation to gonadectomy of proved positive patients. Methods and Results. Samples from 110 patients were collected. The PCR method and analysis of products on agarose gel was compared with analysis of DNA fragments from quantitative fluorescent (QF) PCR on capillary electrophoresis. The loci DYZ3, AMGX/Y and SRY were used for detection. The method QF PCR was effected for DYZ3 and AMGX/Y loci. The positive cases were examined by FISH method. Five (4,5 %) and 3 (2,7 %) positive cases were detected in DYZ3 and SRY resp. loci by electrophoresis on agarose gel. Seventeen (15,5 %) and 7 (6,4 %) positive cases were detected in DYZ3 and AMGX/Y resp. by capillary electrophoresis. The estimated mosaicism ranged from 1:5 to 1:100 000. Conclusions. QG PCR is the most sensitive method for diagnostics of Y-sequences. Simultaneously the incidency of Y-positive cells can be estimated. The positive cases with marker in karyotype were confirmed by FISH.

Ústav lékařské genetiky a fetální medicíny LF UP a FN Olomouc

Analysis of the specific Y-sequences in female patients with Turner syndrome

Analýza Y specifických sekvencí u pacientek s Turnerovým syndromem - úvodní studie = Analysis of the specific Y-sequences in female patients with Turner syndrome /

Lit: 14

Souhrn: eng