Nervově paralytické látky jsou v současné době často zneužívané při teroristických útocích nebo atentátech. V takových případech je potřeba jejich rychlé, přesné a snadné detekce přímo v terénu. To umožňují detekční trubičky, které obsahují jako náplň pelety s imobilizovanou cholinesterasou a detekční činidla. Princip jejich detekce je založen na vysoce citlivé enzymatické Ellmanově reakci, při které v nepřítomnosti inhibitorů cholinesteras dochází na peletách ke vzniku žluté barvy, naopak v jejich přítomnosti si nosič ponechává původní barvu. Rychlost reakce, její citlivost a zřetelnost barevného přechodu při detekci jsou pak stěžejními body výzkumu. V rámci experimentu byly připraveny pelety s dvojitým obalem, kde první obal obsahoval enzym butyrylcholinesterasu imobilizovanou v hypromelose a druhý obal byl tvořený ethylcelulosou a triethyl citrátem. Na základě vlastností těchto vzorků byly dále připraveny i šarže obsahující laktosu dispergovanou v ethylcelulosovém obalu, od které se očekával vliv na zvýšení permeability obalu, a tím i rychlosti detekce a intenzity zbarvení. U nosičů byla kromě vybraných fyzikálně-chemických vlastností hodnocena aktivita enzymu, jeho citlivost a intenzita barevného přechodu. Šarže vykazující nejlepší vlastnosti byly podrobeny 24měsíčnímu testu stability při třech různých teplotách a vlhkostech.

Currently, nerve agents are often used in terrorist attacks or assassinations. In such cases, it is necessary to detect them quickly, accurately and easily right in the field. Detection tubes, which are small devices containing pellets with immobilized cholinesterase and detection reagents, meet these conditions. Their detection mechanism is based on a highly sensitive enzymatic Ellman reaction, when in the absence of cholinesterase inhibitors the pellets develop a visible yellow color, whereas in their presence the carriers retain the original color. The rate of reaction, its sensitivity and the distinct color transition are the key points of the research. In this experiment, double-coated pellets were prepared. The first coating contained the butyrylcholinesterase immobilized in hypromellose, while the second coating consisted of ethylcellulose and triethyl citrate. Based on the properties of such carriers, samples containing lactose dispersed in the ethylcellulose coating were also prepared, which was expected to have an effect on increasing the permeability of the coating and hence the detection rate and color intensity. In addition to selected physicochemical properties, carriers were evaluated for enzyme activity, sensitivity and color transition intensity. Samples showing the best properties were subjected to a 24-months stability test at three different temperatures and humidity.

Department of Pharmaceutics Faculty of Pharmacy University of Veterinary and Pharmaceutical Sciences Brno Czech Republic

Oritest Ltd Prague Czech Republic Faculty of Biomedical Engineering Czech Technical University Prague Kladno Czech Republic

Dvojitě obalené pelety se semipermeabilním obalem z ethylcelulosy určené k detekci inhibitorů cholinesteras