Východisko. Friedreichova ataxie je autozomálně recesivní neurodegenerativní onemocnění s incidencí 1 - 2 : 100 000. V 95 % případů je příčinou Friedreichovy ataxie expanze GAA tripletu uvnitř prvního intronu genu X25 lokalizovaného na 9q. Cílem práce bylo zavést jednoduchou a spolehlivou DNA diagnostickou metodu, která by pomohla při specifikaci spinocerebelárních ataxií. Metody a výsledky. Naše diagnostika je založena na rozlišení normální a mutované alely genu X25 pomocí PCR a následné elektroforézy v agarózovém gelu. U normální alely dosahuje velikost PCR produktu v našem případě 521 - 614 bp, což odpovídá 7 - 38 GAA tripletům v alele. Naproti tomu v případě mutantních alel s 200 až 1200 GAA triplety je délka produktu až 4100 bp. Po zavedení metody bylo analyzováno 12 vyšetřovaných, z nichž 4 byli diagnostikováni jako pozitivní pro Friedreichovu ataxii. Závěry. Podařilo se zavést rychlou, neradioaktivní, spolehlivou DNA diagnostickou metodu. Jejím přínosem je možnost rozpoznání přenašečů, což dovoluje provádět skríningová vyšetření rizikových rodin.

Background. Friedreich's ataxia is an autosomal recessive, neurodegenerative disease with a prevalence of 1 - 2 : 100 000. Ninety five % of cases are caused by Friedreich's ataxia expansion of GAA triplet repeat in the first intron of the X25 gene. The gene is mapped on chromosome 9q. The objective of the investigation was to introduce simple and reliable DNA diagnosis helping to specify of spinocerebellare ataxias. Methods and Results. Our diagnosis is based on the differentiation of normal and mutant alleles of gene X25 with PCR and electrophoresis on agarose gel. Size of PCR product of normal allele is in our case 521 - 614 bp. It is responding to 7 - 38 GAA triplets. Size of mutant alleles with 200 - 1200 GAA triplets is as 4100 bp. After the method was introduced, we analysed 12 probands. Four of them suffered from Friedreich's ataxia. Conclusions. We introduced a fast, non-radioactive, reliable DNA diagnostic method. The contribution of this method is defection of carriers and we can screen of families with the risk of Friedreich's ataxia.

Výzkumný ústav zdraví dítěte Odd biochemické a molekulární genetiky Brno

Direct DNA diagnosis of Friedreich's ataxia

Přímá DNA diagnostika Friedreichovy ataxie = Direct DNA diagnosis of Friedreich's ataxia /

Lit: 14

Souhrn: eng