Preparation of dsRNA for microinjection experiments in mouse
Jazyk angličtina Země Spojené státy americké Médium print
Typ dokumentu časopisecké články
PubMed
20147026
DOI
10.1101/pdb.prot5131
PII: 2009/1/pdb.prot5131
Knihovny.cz E-zdroje
- MeSH
- dvouvláknová RNA genetika MeSH
- genetická transkripce MeSH
- genetické techniky * MeSH
- mikroinjekce metody MeSH
- modely genetické MeSH
- molekulární biologie metody MeSH
- molekulární sekvence - údaje MeSH
- myši MeSH
- oocyty metabolismus MeSH
- plazmidy metabolismus MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody MeSH
- RNA interference MeSH
- RNA metabolismus MeSH
- sekvence nukleotidů MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Názvy látek
- dvouvláknová RNA MeSH
- RNA MeSH
RNA interference (RNAi) is a suitable method for sequence-specific post-transcriptional gene silencing for a number of model systems. The protocol presented here is designed for the preparation of microgram amounts of double-stranded RNA (dsRNA) for microinjection experiments in mouse oocytes and early embryos. Briefly, dsRNA is produced after annealing sense and antisense RNA strands, or spontaneously during in vitro transcription of an inverted repeat. We usually include RNase T1 treatment of the annealed RNA prior to the purification step in order to remove unannealed single-stranded RNA (ssRNA), which can interfere with the quantification of dsRNA in a nondenaturing agarose gel.
Citace poskytuje Crossref.org
Age-related differences in the translational landscape of mammalian oocytes