- MeSH
- lidé MeSH
- meningokoková meningitida diagnóza mikrobiologie MeSH
- mladiství MeSH
- Neisseria meningitidis genetika izolace a purifikace patogenita MeSH
- přenašečství MeSH
- sérologické testy MeSH
- Waterhouseův-Friderichsenův syndrom diagnóza mikrobiologie mortalita MeSH
- ženy MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
Cílem práce je prezentace výsledků klonální analýzy izolátů Neisseria meningitidis z invazivního meningokokového onemocnění v České republice z období 1993–2005. Metodou multilokusové sekvenční typizace (MLST) byla zjištěna genetická heterogenita izolátů séroskupiny B a homogenita izolátů séroskupiny C. U izolátů séroskupiny B prevalovaly tři sekvenční klonální komplexy (STC-18, STC-32 a STC-41/44) a téměř čtvrtina izolátů vykazuje ST nezařaditelné do klonálních komplexů. U izolátů séroskupiny C byla zjištěna výrazná prevalence STC-11. Hypervirulentní klonální komplex STC-11 prevaloval v letech 1993–2004, v roce 2005 byl poprvé zjištěn vyšší výskyt jiného klonálního komplexu: STC-41/44. MLST analýza ukázala odlišnost populace českých meningokoků od západoevropských a ostatních populací. Výsledky klonální analýzy izolátů Neisseria meningitidis z invazivního meningokokového onemocnění jsou podkladem k hodnocení správnosti doporučených opatření v ohnisku onemocnění a k aktualizaci doporučené vakcinační strategie v České republice.
The study objective is to present results of clonal analysis of Neisseria meningitidis isolates from invasive meningococcal disease in the Czech Republic in 1993–2005. The method of multilocus sequence typing (MLST) revealed genetic heterogeneity of serogroup B isolates and homogeneity of serogroup C isolates. Three clonal sequence type complexes (STC-18, STC-32 and STC-41/44) prevailed among serogroup B isolates and almost a quarter of isolates have ST unclassifiable into clonal complexes. STC-11showed clear predominance among serogroup C isolates. Hypervirulent clonal complex STC-11 prevailed in 1993–2004 while another clonal complex, STC-41/44, became more widespread for the first time in 2005. MLST analysis showed differences between the meningococcal population in the Czech Republic and those in western European countries and elsewhere. The results of clonal analysis of Neisseria meningitidis isolates from invasive meningococcal disease provide background information for evaluation of the adequacy of recommended measures in the focus of the disease and for updating the recommended vaccination strategy in the Czech Republic.
- MeSH
- epidemiologická měření MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- lidé MeSH
- meningokokové infekce diagnóza epidemiologie mikrobiologie MeSH
- meningokokové vakcíny normy zásobování a distribuce MeSH
- Neisseria meningitidis genetika klasifikace MeSH
- sekvenční analýza DNA využití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
- MeSH
- antibakteriální látky aplikace a dávkování terapeutické užití MeSH
- latex fixační testy využití MeSH
- lidé MeSH
- meningokoková meningitida diagnóza terapie MeSH
- mozkomíšní mok mikrobiologie MeSH
- Neisseria meningitidis MeSH
- polymerázová řetězová reakce využití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
Cílempráce bylo studium dlouhodobosti a mnohočetnosti nosičství Neisseriameningitidis ve zdravépopulaci. V prospektivní studii bylo sledováno 206 studentů ve věku 15–19 roků od října 2002 dobřezna 2003. V měsíčních intervalech byly prováděny výtěry nazofaryngu a laryngu, které bylykultivovány na selektivním médiu. Ke studiu byly uchovány všechny kolonie zjištěné v primokultuře,v případě masivního růstu maximálně 20 kolonií. Celkem bylo získáno 1242 izolátů, které bylyvšechny vyšetřeny molekulárněbiologickou metodou RAPD (randomly amplified polymorphic DNAanalysis). Dalšími metodami (určení fenotypu sklíčkovou aglutinací a celobuněčným ELISA testem,určení sekvenačního typu, ST multilokusovou sekvenační typizací – MLST, testování citlivosti naantibiotika) byly testovány vždy první zjištěné izoláty od jednotlivých nosičů a izoláty od téhožnosiče s odlišnými RAPD charakteristikami, celkem 35. Mezi 206 sledovanými studenty bylo zjištěno33 nosičů N. meningitidis (16 %). Nosičství N. meningitidis mělo dlouhodobý charakter. Studiumkmenů N. meningitidis molekulárněbiologickými metodami ukázalo, že nosičská populace meningokokůje heterogenní. Populace nosičských meningokoků má klonální charakter a jsou nalézánypřevážně nevirulentní ST-komplexy. Mnohočetné nosičství různých klonů N. meningitidis je vzácnéa má krátkodobý charakter. Kolonizace horních cest dýchacích jedním klonem N. meningitidisnechrání proti kolonizaci jiným klonem.
The aim of the study was to investigate the long-term duration and multiple carriage of Neisseriameningitidis in a healthy population. In this prospective study, 206 students at the age of 15 to 19years were monitored from October 2002 to March 2003. Nasopharyngeal and laryngeal swabs weresampled in one-month intervals and cultured on a selective medium. All colonies detected in primaryculture were saved for the study, a maximum of 20 colonies in cases of massive growth. A total of1.242 isolates were obtained, all of them being examined by a molecular biology method RAPD(randomly amplified polymorphic DNA analysis). By other methods (determination of phenotype byslide agglutination and whole-cell ELISA test, the determination of sequence type, ST by multilocussequence typing, testing of susceptibity to antibiotics) were always tested the first isolates fromindividual carriers and isolates from the same carrier with different RAPD characteristics, being35 altogether. There were thirty three carriers of N. meningitidis detected among the 206 students(16%). The carriage of N. meningitidis was of long-term duration. The study of strains of N. meningitidiswith molecular biology methods made it clear that the carrier population of meningococciis heterogeneous. The population of carrier meningococci was of clonal character and mostlynon-virulent ST-complexes were detected. Multiple carriage of different clones of N. meningitidis israre and usually of short-termduration.The colonization of upper respiratory tract by a single cloneof N. meningitidis does not protect from colonization by other clone.
- MeSH
- antibiotická rezistence MeSH
- diagnostické techniky molekulární metody MeSH
- dospělí MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- Neisseria meningitidis patogenita MeSH
- odběr biologického vzorku MeSH
- přenašečství MeSH
- prospektivní studie MeSH
- studenti MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
- srovnávací studie MeSH
Jsou prezentovány první výsledky charakterizace kmenů Haemophilus influenzae novou metodoumultilokusové sekvenační typizace (MLST). Charakterizace souboru 28 kmenů H. influenzae izolovanýchz invazivních onemocnění v České republice ukázala klonální homogenitu těchto kmenů:z 26 testovaných kmenů H. influenzae b vykazovalo 22 kmenů jednotný sekvenční typ: ST-6. U 4kmenů byly zjištěny námi nově popsané sekvenční typy: ST-83 (3 kmeny) a ST-84 (1 kmen). U 2netypovatelných kmenů H. influenzae byly zjištěny jiné sekvenční typy než ST-6: ST-3 a námi nověpopsaný ST-85. První výsledky MLST ukazují, že ST-6 je typický pro H. influenzae b izolovanéz invazivních onemocnění v České republice. Námi nově popsané sekvenční typy ST-83, ST-84 a ST-85byly registrovány v celosvětové databázi MLST H. influenzae (http://haemophilus.mlst.net).
First results of multilocus sequence typing (MLST) of Haemophilus influenzae strains are presented.MLST of 28 H. influenzae strains isolated frompatients with invasive diseases in the Czech Republicis indicative of clonal homogeneity of these strains: 22 out of 26 H. influenzae b strains tested wereof the same sequence type, ST-6. Four strains were of two sequence types newly described in thisstudy: ST-83 (3 strains) and ST-84 (1 strain). Two nontypeable H. influenzae strains were assigned tosequence types other than ST-6: ST-3 and ST-85 newly described in this study. First MLST resultsshow ST-6 to be typical of H. influenzae b isolated from patients with invasive diseases in the CzechRepublic. The sequence types newly described in this study, i.e. ST-83, ST-84 and ST-85, weresubmitted to the worldwide H. influenzae MLST database (http://haemophilus.mlst.net).
Cíl práce: Smrtnost invazivního meningokokového onemocnéní je v České republice v posledních letech relativně vysoká (10 %). Analýza anamnestických údajů může přispět ke stanovení jednoduchých diagnostických kritérií, která umožní včasné rozpoznání potenciálně závažného onemocnění, a může stanovit faktory, které upozorní na těžký průběh onemocnění. Soubor pacientů a metody: V letech 1996-2001 bylo v 5 regionálních nemocnicích hospitalizováno 164 pacientů s meningokokovým onemocněním (14 úmrtí, smrtnost 9 %). Meningokoková sepse byla prokázána u 48 pacientů (9 úmrtí, smrtnost 19 %), meningitida s hemorhagickým enantémem u 87 pacientů (5 úmrtí, smrtnost 6 %), a meningitida bez kožních změn u 29 pacientů, z nichž nikdo nezemřel. Anamnestické údaje byly hodnoceny ve vztahu ke klinické formě onemocnění, séroskupině meningokoků, diagnostice onemocnění a riziku úmrtí pacientů. Výsledky: Šest nemocných zemřelo do 24 hodin od vzniku prvních klinických příznaků, všichni měli sepsi. U více než 70 % pacientů s meningitidou se vyskytly meningeální příznaky, psychická alterace, petechie a skuse; u shodného počtu pacientů se sepsí byly prokázány petechie a skuse, psychická alterace a teploty nad 39,0 °C. Vyšší riziko úmrtí bylo prokázáno u pacientů se známkami soku (29 % vs. 3 %, p < 0,001) a změnami vědomí (11 % vs. O %, p = 0,07). U pacientů s předhospitalizační antibiotickou léčbou byla zaznamenána nižší smrtnost (8 % vs. 10 %, p = 0,55). Závěr: Pro časnou diagnostiku meningokokového onemocnění jsou nejdůležitější petechie a sufuse, meningeální příznaky a psychická alterace. Bolesti bricha a průjmy, afebrilní průběh a nepřítomnost meningeálních příznaků mohou zpomalit rozpoznání onemocnění. Diagnostika je často opožděna v nočních hodinách. Vyšší riziko úmrtí je u pacientů s meningokokovou sepsí, u pacientů se známkami šoku a alterací psychiky.
Objectives: The fatality rate of meningococcal disease is recentiy relatively high (10 %) in the Czech Republic. Analysis of anamnestic data can contribute to determination of simple diagnostic criteria for early recognition of possible serious disease, and can determine factors, whose signalize serious course of the disease. Methods: A total of 164 patients with meningococcal disease (14 deaths, fatality rate 9 %) were treated in 5 regional hospital during 1996-2001. Meningococcal sepsis was proved in 48 patients (9 deaths, mortality 19 %), meningitis with haemorrhagic rash in 87 patients (5 deaths, mortaUty 6 %), and meningitis without skin lesions in 29 patients (nobody died). Anamnestic data were evaluated concerning clinical form of disease, meningococcal serogroup, diagnosis of disease and risk of patient's death. Results: Six patients died vsrithin first day after beginning of their first clinical symptoms, all of them suffered from sepsis. Neck stiffness, drowsiness or irritability, petechiae or purpura were observed in more than 70 % patients with meningitis. Petechial or purpuric rash, lethargy or irritability and temperature above 39,0 °C were observed in more than 70 % patients v^th sepsis. High risk of death was proved in patients with shock (29 % vs. 3 %, p < 0,001) and depressed mental status (11 % vs. 0 %, p = 0,07). Lower mortality (8 % vs. 10 %, p = 0,55) was observed in patients treated with antibiotics given before admission. Conclusions: Haemorrhagic rash, neck stiffness and lethargy or irritability are principal for early diagnostics of meningococcal disease. Abdominal pain, diarrhoea, afebrile course and absence of neck stiffness can retard disease recognition. Diagnostics are often delayed during night-time. Patients with meningococcal sepsis, patients with shock or depressed mental status are in dgher risk of death.
- MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- lidé MeSH
- meningokoková meningitida diagnóza mortalita terapie MeSH
- meningokokové infekce mikrobiologie MeSH
- sepse diagnóza mortalita MeSH
- sérotypizace metody mortalita MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
Cíl práce: Zavedení další bezkultivační metody invazivního meningokokového onemocnění, polymerase chain reaction (PCR), která obohatí současně užívané bezkultivační metody a zvýší procento laboratorně potvrzených onemocnění. Materiál a metody: Metoda PCR byla optimalizována na kmenech Neisseria meningitidis B a C. Senzitivita a specificita PCR detekce Neissera meningitidis B a C z klinického materiálu byla hodnocena na 195 vzorcích likvoru od pacientů s invazivním meningokokovým onemocněním (80 vzorku likvoru), non-meningokokovou bakteriálni meningitidou (49 vzorku likvoru) a virovou meningitidou (66 vzorků likvoru). Výsledky: Pro PCR detekci Neisseria meningitidis B a C z likvoru byly zjištěny následující parametry, senzitivita = 0,85, specificita = 0,95, pozitivní předpovědní hodnota = 0,88 a negativní předpovědní hodnota = 0,93. Metoda PCR posada laboratorní potvrzení etiologie u 47,4 % z 19 vyšetřených likvoru u pravděpodobných invazivních meningokokových onemocnění, jejichž meningokoková etiologie nebyla potvrzena klasickými metodami. V současné době je zaváděna semi-nested PCR strategie k detekci Neisseria meningitidis z likvoru, krve a séra, jakož i rozšířená PCR metoda pro detekci Haemophilus influenzae b a Streptococcus pneumoniae z likvoru, krve a séra. Závěr: V Národní referenční laboratoři pro meningokokové nákazy SZÚ Praha byla zavedena PCR metoda detekce Neisseria meningitidis B a C z likvoru a je nabízena k rutinnímu použití.
Objectives: To introdukce a further non-culture method for diagnosis of invasive meningococcal dinase, polymerase chain reaction (PCR), in addition to those currently used to increase the percentage of laboratory confirmed cases. Materials and methods: The PCR method was optimist on Neisseria meningitidis B and C strains. Sensitivity and specificity of PCR detection of Neisseria meningitidis B and C from clinical material was assessed in 195 samples of the cerebrospinal fluid obtained from patiens with invasive meningococcal dinase (80 CSF samples), non-meningococcal bacterial meningitis (49 CSF samples) and viral meningitis (66 CSF samples). Results: The following parameters of the PCR method for detection of Neisseria meningitidis B and C from the CSF were found: sensitivity = 0.85, specificity = 0.95, positive predictive value = 0.88 and negative predictive value = 0.93. PCR gave laboratory confirmation in 47.4 % of 19 CSF samples from patiens with suspected invasive meningococcal dinase, whose meningococcal infection was not confirmed by classical methods. The semi-nested PCR strategy and an extended PCR method for detection of Haemophilus influenzae h and Streptococcus pneumoniae from CSF, blood and serum has been introduced recently in our laboratory. Conclusions: The PCR method for detection of Neisseria meningitidis B and C from the cerebrospinal fluid was introduced in the National Reference Laboratory for Meningococcal Infections in NIPH, Prague and is propřed for routine use.
