Závěrečná zpráva o řešení grantu Interní grantové agentury MZ ČR
1 svazek : ilustrace ; 30 cm
Biologické účinky látek manumycinového typu budou testovány pomocí modelu tkáňových kultivací s lidskými liniemi monocytů/makrofágů (THP-1) a epiteliálních linií. Pro screening potenciálního efektu testovaných látek na tvorbu prozánětlivých cytokinů a chemokinů bude využita multiplexová kvantitativní RT-PCR s následným měřením koncentrací cytokinů, imunofenotypizací a funkčními testy. Kmeny streptomycet produkující manumycinové látky budou identifikovány pomocí genového screeningu, bude provedena izolace a charakterizace nových látek, konstrukce kosmidových knihoven a genetická manipulace horního polyketidového řetězce manumycinů (délka, štěpení, saturace) včetně genového "shufflingu" mezi producenty.; Biological effects of manumycin-related compounds will be tested using a tissue culture models with human monocyte/macrophages (THP-1) and epithelial cell lines. For a screening of potential effect of tested compounds on pro-inflammatory cytokines and chemokines production, multiplex qRT-PCR will be used followed by measurement of proinflammatory cytokine concentrations, immunophenotypying and functional tests. Genetic screening will be used for identification of streptomycete strains producing manumycine-related compounds with consequent isolation and characterization of new compounds, construction of cosmid libraries, and genetic manipulations with the upper polyketide chain of manumycins (length, branching, saturation) including gene shuffling between producers.
- MeSH
- azithromycin MeSH
- cytokiny MeSH
- epitelové buňky MeSH
- genetické techniky MeSH
- imunofenotypizace MeSH
- imunomodulace MeSH
- klarithromycin MeSH
- kosmidy MeSH
- makrofágy MeSH
- polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí MeSH
- Streptomyces MeSH
- Konspekt
- Patologie. Klinická medicína
- NLK Obory
- alergologie a imunologie
- biologie
- farmacie a farmakologie
- NLK Publikační typ
- závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR
A cosmid bearing an insert of 38 217 bp covering the gene cluster and its flanking regions of type strain Streptomyces lincolnensis ATCC 25466 was sequenced. Two relatively extensive sequence changes and several hundred point mutations were identified if compared with the previously published sequence of the lincomycin (Lin) industrial strain S. lincolnensis 78-11. Analysis of the cluster-flanking regions revealed its localization within the genome of the ATCC 25466 strain. The cluster-bearing cosmid was integrated into the chromosome of Lin non-producing strains S. coelicolor CH 999 and S. coelicolor M 145. The modified strains heterologously produced Lin but the level dropped to approximately 1-3% of the production in the ATCC 25466 strain.
- MeSH
- antibakteriální látky biosyntéza chemie MeSH
- bakteriální proteiny genetika metabolismus MeSH
- biotechnologie MeSH
- bodová mutace MeSH
- genová knihovna MeSH
- kosmidy MeSH
- linkomycin biosyntéza chemie MeSH
- multigenová rodina MeSH
- sekvenční analýza DNA MeSH
- Streptomyces coelicolor genetika metabolismus MeSH
- Streptomyces genetika metabolismus růst a vývoj MeSH
- MeSH
- chromozom X MeSH
- dítě MeSH
- gliom genetika MeSH
- kosmidy MeSH
- lidé MeSH
- lidské chromozomy, pár 17 genetika MeSH
- nádory mozku genetika komplikace MeSH
- poruchy pigmentace genetika komplikace MeSH
- předškolní dítě MeSH
- translokace genetická MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- lidé MeSH
- předškolní dítě MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- MeSH
- aneuploidie MeSH
- Downův syndrom MeSH
- genetické techniky MeSH
- klonování DNA MeSH
- kosmidy MeSH
- lidé MeSH
- lidské chromozomy MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
