Koi Herpes Virus (KHV or Cyprinid Herpesvirus 3, CyHV-3) is among the most threatening pathogens affecting common carp production as well as the highly valuable ornamental koi carp. To date, no effective commercial vaccine is available for worldwide use. A previous study reported that three intramuscular injections with an ORF25-based DNA vaccine, led to the generation of neutralizing antibodies and conferred significant protection against an intraperitoneal challenge with KHV. In the present study, we set out to optimize an ORF25-based DNA vaccination protocol that required fewer injections and would confer protection upon a challenge that better resembled the natural route of infection. To this end, ORF25 was cloned in pcDNA3 either as a soluble protein or as a full-length transmembrane GFP-fusion protein. We tested our ORF25-based DNA vaccines in multiple vaccination trials using different doses, vaccination routes (i.m. injection and oral gavage) and challenge methods (bath and cohabitation). Furthermore, we analysed local and systemic responses to the i.m. injected DNA vaccine through histological and RT-qPCR analysis. We observed a strong protection when fish received three injections of either of the two DNA vaccines. However, this protection was observed only after bath challenge and not after cohabitation challenge. Furthermore, protection was insufficient when fish received one injection only, or received the plasmid orally. The importance of choosing a challenge model that best reflects the natural route of infection and the possibility to include additional antigens in future DNA vaccination strategies against KHV will be discussed.
- MeSH
- aplikace orální MeSH
- DNA vakcíny aplikace a dávkování farmakologie MeSH
- Herpesviridae imunologie MeSH
- herpetické infekce imunologie prevence a kontrola veterinární virologie MeSH
- injekce intramuskulární veterinární MeSH
- kapři * MeSH
- nemoci ryb imunologie prevence a kontrola virologie MeSH
- vakcinace metody veterinární MeSH
- virové vakcíny aplikace a dávkování farmakologie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Klíčová slova
- imunopatogeneze,
- MeSH
- Cytomegalovirus imunologie patogenita MeSH
- Herpesviridae imunologie klasifikace patogenita MeSH
- imunitní únik fyziologie imunologie MeSH
- lidé MeSH
- lidský herpesvirus 1 imunologie patogenita MeSH
- přirozená imunita MeSH
- replikace viru fyziologie imunologie MeSH
- virové nemoci imunologie patofyziologie MeSH
- virus Epsteinův-Barrové imunologie patogenita MeSH
- virus spalniček imunologie patogenita MeSH
- viry hepatitidy imunologie patogenita MeSH
- viry * imunologie klasifikace patogenita MeSH
- zánět * etiologie imunologie patofyziologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
A monoclonal antibody (MAb) was generated against the capsid protein (ORF 72) of koi herpesvirus (KHV) isolated from diseased koi Cyprinus carpio in Taiwan. The clone of MAb-B2 was obtained by immunizing mice with whole virus particles and further identified using indirect enzyme-linked immunosorbent assay and Western blot assay. In addition, it detected KHV in KHV-infected cells but not in those of mock-infected cells as demonstrated by indirect immunofluorescence assay. The neutralization test showed that MAb-B2 neutralized KHV. Furthermore, we uncovered that MAb-B2 recognizes the ORF72 of KHV as revealed by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and Western blot assays. Additionally, MAb-B2 has been used as a diagnostic tool for detection of KHV in clinical samples by immunohistochemistry. Collectively, our results indicated that MAb-B2 could be used in the development of a diagnostic kit for diagnosis of KHV infections and ORF72 protein of KHV might be a candidate for future vaccine development.
- MeSH
- antigeny virové imunologie MeSH
- chromatografie kapalinová MeSH
- ELISA MeSH
- fluorescenční protilátková technika nepřímá MeSH
- Herpesviridae imunologie izolace a purifikace MeSH
- imunohistochemie MeSH
- kapři virologie MeSH
- monoklonální protilátky diagnostické užití imunologie izolace a purifikace MeSH
- myši inbrední BALB C MeSH
- myši MeSH
- neutralizující protilátky diagnostické užití imunologie izolace a purifikace MeSH
- protilátky virové diagnostické užití imunologie izolace a purifikace MeSH
- tandemová hmotnostní spektrometrie MeSH
- virové plášťové proteiny imunologie MeSH
- western blotting MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- myši MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Taiwan MeSH
OBJECTIVES: To investigate the associations between antibody responses to herpesviruses and the development of thalamic, total deep gray matter, cortical and central atrophy in high-risk clinically isolated syndromes (CIS) after the first demyelinating event. METHODS: We analyzed volumetric brain outcomes in 193 CIS patients enrolled in a multi-center study of high-risk CIS. All patients had 2 or more MRI brain lesions and two or more oligoclonal bands in cerebrospinal fluid. Serum samples obtained at the screening visit prior to any treatment were analyzed for IgG antibodies against cytomegalovirus (anti-CMV) and Epstein-Barr virus (EBV) viral capsid antigen (VCA). All patients were treated with interferon-beta. Clinical and MRI assessments were obtained at baseline, 6, 12, and 24 months. RESULTS: Anti-EBV VCA highest quartile status was associated with regional atrophy measures for percent decrease in thalamus. Anti-CMV positivity was associated with greater total deep gray matter atrophy and whole brain atrophy. Anti-EBV VCA highest quartile status was associated as trends with greater whole brain, gray matter atrophy and central atrophy. The associations of anti-EBV VCA antibodies with thalamic atrophy were mediated by its associations with T2 lesions whereas the associations of anti-CMV positivity with deep gray matter atrophy were relatively independent of T2 lesions. CONCLUSIONS: Antibody responses to EBV and CMV are associated with global and regional brain atrophy in CIS patients treated with interferon-beta.
- MeSH
- antigeny virové imunologie MeSH
- antivirové látky terapeutické užití MeSH
- atrofie farmakoterapie etiologie virologie MeSH
- časové faktory MeSH
- demyelinizační nemoci komplikace farmakoterapie MeSH
- dospělí MeSH
- Herpesviridae imunologie MeSH
- interferon beta terapeutické užití MeSH
- leukoencefalopatie etiologie MeSH
- lidé MeSH
- longitudinální studie MeSH
- magnetická rezonanční tomografie MeSH
- mladý dospělý MeSH
- neurodegenerativní nemoci etiologie MeSH
- pozorování MeSH
- protilátky virové krev MeSH
- thalamus patologie MeSH
- virové plášťové proteiny imunologie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- multicentrická studie MeSH
- MeSH
- antivirové látky aplikace a dávkování klasifikace terapeutické užití MeSH
- diferenciální diagnóza MeSH
- Herpesviridae imunologie patogenita účinky léků MeSH
- herpetické infekce epidemiologie etiologie terapie MeSH
- klinické laboratorní techniky metody využití MeSH
- lidé MeSH
- příznaky a symptomy MeSH
- vakcinace MeSH
- virové nemoci CNS epidemiologie etiologie terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Cíl práce: Sledování výskytu intratekálních protilátek proti herpetickým virům (EBV, HSV, VZV a CMV) u pacientů se zánětlivým onemocněním nervového systému a charakterizace jejich přínosu pro diferenciální diagnostiku těchto chorob. Materiál a metody: IgG protilátky proti herpetickým virům byly prokazovány v párových vzorcích séra a mozkomíšního moku (MM) metodami ELISA a nepřímé imunofluorescence (NIF). Intratekální syntéza protilátek byla hodnocena na základě výpočtu protilátkového indexu (AI). Výsledky: Serologicky bylo vyšetřeno 47 pacientů s polyneuropatiemi, 77 pacientů s akutní infekcí CNS, 67 pacientů s demyelinizačním onemocněním CNS a 41 s nezánětlivými dorsopatiemi a kompresivními radikulopatiemi jako kontrolní skupina. Výskyt protilátek indikujících aktivní infekci herpetickými viry v séru pacientů byl srovnatelný jak u pacientů všech sledovaných skupin, tak u kontrol. Nízké hladiny virově specifických intratekálních protilátek byly nalezeny jak u pacientů se zánětlivým onemocněním nervového systému (u 21 %) i u kontrolní skupiny (u 24 %). Vysoké hladiny virově specifických intratekálních protilátek (AI větší než 2) byly nalezeny pouze u pacientů se zánětlivým onemocněním nervového systému. U pacientů s neuropatiemi byly prokázány hlavně protilátky proti HSV (6 %), u pacientů s akutní infekcí CNS protilátky proti HSV a CMV (5 % a 4 %). Ve vzorcích MM s intratekálními protilátkami nebyla současně prokázána virová DNA. U pacientů s demyelinizací CNS dominovaly protilátky proti CMV (7 %). Závěr: Průkaz intratekálních protilátek proti herpetickým virům lze použít jako doplňkovou metodou v rámci diferenciální diagnostiky zánětlivých onemocnění nervového systému. Při interpretaci nálezů je však nutná opatrnost, neboť jejich přítomnost, zvláště v nízkých hladinách nemusí být vždy projevem recentní aktivní infekce.
Objective: To investigace the occurrence of intrathecal antibodies against herpesviruses (EBV, HSV, VZV and CMV) in patients (pts) with nervous system disorders of inflammatory nature and to determine the value of the findings for differential diagnostic considerations. Methods: IgG antibodies against the herpesviruses (as above) were determined in paired sample sof sera and cerebrospinal fluid (CSF) using ELISA and indirect immunofluorescence (NIF). Intrathecal synthesi sof antibodies was evaluated by computing the antipody index (AI). Results: Samples from 47 patients with polyneuropathies, from 77 pts with acute infections of the CNS, from 67 pts with demyelinizating diseases of the CNS, and from 41 pts with noninflammatory dorsopathies and compressive radiculopathies (kontrol group) were examined. The occurrence of antibodies indicaUng an aktive infection in the sera of patiens was comparable in all the tested Gross. Low levels of virus specific anfibodies in the CSF were found in pts with inflammatory disorders of the CNS (21 %) as well as in the kontrol group (24 %), however, only in pts with inflammatory CNS diseases high levels of virus specific intrathecal antibodies (AI >2) could be detected. In pts with neuropathies anti-HSV antibodies were detected mostly (6 %). In pts with an acute CNS infection anti-HSV (5 %) and anti-CMV (4 %) antibodies were found. No viral DNA was detected in any CSF sample showing detectable levels of antibodies. In pts with demyelinating disorders anti-CMV antibodies dominated (7 %). Conclusions: The assessment of intrathecal antibodies against herpesviruses can be used as an auxilliary method in the framework of differential diagnosfics of cetral nervous system disorders of inflammatory origin. However, the findings should be applied with urost caution as the presence of such antibodies, especially in low levels, need not point a tan active infection.
- MeSH
- finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
- Herpesviridae imunologie MeSH
- imunoterapie metody MeSH
- lidé MeSH
- lidské adenoviry imunologie MeSH
- nádory jater imunologie terapie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- přehledy MeSH
