Cíl: Cílem naší studie bylo kvantifikovat a porovnat imunobarvení IL-2, IL-5, IL-6, IL-8 a TNFa ve tkáni endometriomu, nenádorových nádorech, benigních novotvarech a maligních novotvarech vaječníků. Materiál a metody: Studie se zúčastnilo 90 pacientek; bylo dia gnostikováno 15 nenádorových lézí ovaria, 28 ovariálních benigních novotvarů, 28 ovariálních maligních novotvarů a 19 ovariálních endometriomů. Imunohistochemie byla provedena pro cytokiny IL-2, IL-5, IL-6, IL-8 a TNFa a jejich koncentrace byly v těchto skupinách porovnány. Použili jsme Fisherův exaktní test, podle něhož jsou významné hodnoty p < 0,05. Výsledky: Imunobarvení epitelu na přítomnost IL-5 a IL-8 je silnější u endometriomů než u karcinomu vaječníků (p hodnoty 0,0046 a 0,0149). Stromální imunobarvení TNFa, IL-5, IL-6 a IL8 je silnější u endometriomů než u rakoviny vaječníků (p hodnoty 0,0008; < 0,0001; 0,0003 a 0,0006). Závěr: Silnější imunobarvení ně kte rých cytokinů u endometriomů ve srovnání s karcinomem ovaria odráží zánětlivou a imunitní odpověď, která by mohla být budoucím cílem nových objevů o infiltrativním chování endometriózy.

Objective: The objective of our study was to quantify and compare the immunostaining of IL-2, IL-5, IL-6, IL-8, and TNF-α in endometriomal tissue, non-neoplastic tumors, benign neoplasms, and malignant ovarian neoplasms. Materials and methods: The study involved 90 patients: 15 non-neoplastic ovarian lesions, 28 ovarian benign neoplasms, 28 ovarian malignant neoplasms, and 19 ovarian endometriomas were diagnosed. Immunohistochemistry was performed for cytokines IL-2, IL-5, IL-6, IL-8, and TNF-α and their concentrations were compared in these groups. Fisher‘s exact test was used, requiring a P-value of < 0.05 for significance. Results: IL-5 and IL-8 epithelial immunostaining is stronger in endometriomas than in ovarian cancer (P-values of 0.0046 and 0.0149, resp.). The stromal immunostaining of TNF-α, IL-5, IL-6, and IL8 is stronger in endometriomas than in ovarian cancer (P-values of 0.0008, < 0.0001, 0.0003, and 0.0006, resp.). Conclusions: Stronger immunostaining of some cytokines in endometriomas compared to ovarian cancer reflects an inflammatory and immune response that could be future targets for new discoveries about the infiltrative behavior of endometriosis.

• MeSH
• barvení a značení klasifikace   metody   MeSH
• cytokiny analýza   imunologie   klasifikace   MeSH
• endometrióza * diagnostické zobrazování   diagnóza   imunologie   MeSH
• imunohistochemie * klasifikace   metody   MeSH
• interleukin-6 analýza   imunologie   MeSH
• lidé MeSH
• nádory vaječníků * diagnostické zobrazování   imunologie   klasifikace   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• klinická studie MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Magnetic resonance imaging (MRI) relies on appropriate contrast agents, especially for visualizing transplanted cells within host tissue. In recent years, compounds containing fluorine-19 have gained significant attention as MRI probe, particularly in dual 1H/19F-MR imaging. However, various factors affecting probe sensitivity, such as fluorine content and the equivalency of fluorine atoms, must be considered. In this study, we synthesized fluorinated micelles with adjustable surface positive charge density and investigated their physicochemical properties and MRI efficacy in phantoms and labeled cells. While the micelles exhibited clear signals in 19F-MR spectra and imaging, the concentrations required for MRI visualization of labeled cells were relatively high, adversely affecting cell viability. Despite their favourable physicochemical properties, achieving higher labeling rates without compromising cell viability during labeling remains a challenge for potential in vivo applications.

• MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• fantomy radiodiagnostické MeSH
• fluor chemie   MeSH
• halogenace MeSH
• kationty * chemie   MeSH
• kontrastní látky chemie   MeSH
• lidé MeSH
• magnetická rezonanční tomografie metody   MeSH
• micely * MeSH
• myši MeSH
• viabilita buněk * účinky léků   MeSH
• zobrazování fluorovou magnetickou rezonancí metody   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Úvod: Flexibilní endoskopické vyšetření polykání (FEES) je jednou ze základních metod k objektivní diagnostice poruch polykání. Principem je polykání bolusů různých konzistencí pod endoskopickou kontrolou. Z dostupných údajů i našich zkušeností vyplývá, že kvalita a výtěžnost vyšetření závisí na viditelnosti testovaného bolusu. Cíl práce: Ověřit, zda použití fluoresceinu zlepšuje citlivost FEES vyšetření v porovnání se standardním potravinářským barvivem. Metodika: Ve studii jsme u 40 pacientů provedli FEES s polknutím vody obarvené zeleným potravinářským barvivem a vody obarvené fluoresceinem. Hodnocena byla přítomnost predeglutivního leaku, stagnace bolusu v hltanu (valekulách, na stěnách hltanu, piriformních recesech), průnik bolusu do dýchacích cest na základě Penetračně-aspirační škály podle Rosenbeka (PAS), tendence k penetraci přes zadní komisuru a také subjektivní porovnání obou metod ve sledovaných parametrech. Výsledky: Výsledky prokazují statisticky významně vyšší záchyt stagnace bolusu na stěnách hltanu (p < 0,001) a ve valekulách (p = 0,038) v případě tekutiny obarvené fluoresceinem. Při hodnocení průniku bolusu do dýchacích cest dosáhla hodnota reliability (spolehlivosti) statistické významnosti (k = 0,438; p < 0,001) mezi testovanými metodami (zelené barvivo oproti fluoresceinu), což svědčí pro dobrou citlivost obou metod. Na bodové škále podle Rosenbeka (1–8 bodů) se ale metody statisticky významně lišily v hodnocení závažnosti penetrace/aspirace (p = 0,001). Při použití fluoresceinu byla detekována statisticky významně větší hloubka průniku do dýchacích cest (PAS 3,13) než při použití zeleného barviva (PAS 2,10) (p = 0,001). Při subjektivním porovnání obou metod vyšetřujícím lékařem je statisticky významně lepší viditelnost fluoresceinu ve všech hodnocených parametrech. Závěr: Studie prokázala lepší senzitivitu FEES při použití fluoresceinu v porovnání s běžně používaným potravinářským barvivem. Fluorescein se jeví jako vhodné barvivo k vyšetřování poruch polykání.

Background: Flexible endoscopic evaluation of swallowing (FEES) is one of the basic methods for objective diagnostics of swallowing disorders. The principle is to swallow boluses of various consistencies under endoscopic control. According to available data and our experience, the quality and accuracy of the examination depends on the visibility of the tested bolus. Aim of the study: Verify that the use of fluorescein improves the sensitivity of the FEES compared to a standard food colouring. Methods: In the study, we performed FEES on 40 patients using green food colouring and fluorescein dyed water. The presence of pre-deglutive leak, bolus stagnation in the pharynx (valleculas, pharyngeal walls, piriform sinuses), bolus penetration into the airways based on the Rosenbek Penetration-Aspiration Scale (PAS), tendency to penetrate through the posterior commissure and subjective comparison of both methods in parameters mentioned above were evaluated. Results: The results show a statistically significantly higher detection of bolus stagnation on the pharyngeal walls (P <0.001) and in the epiglottic valleculas (P = 0.038) with fluorescein-dyed water. When assessing airway bolus penetration, the reliability value reached statistical significance (k = 0.438; P <0.001) between the tested methods (green food colouring vs. fluorescein), which indicates good sensitivity of both methods. However, on the Rosenbek score scale (1–8 points), the methods differed statistically significantly in the assessment of penetration/aspiration severity (P = 0.001). A statistically significantly greater depth of airway penetration was detected with fluorescein (PAS 3.13) compared to green food colouring (PAS 2.10) (P = 0.001). In a subjective comparison of both methods by the examining physician, the visibility of fluorescein is statistically significantly better in all evaluated parameters. Conclusions: The study showed a better sensitivity of FEES when using fluorescein compared to conventional food colouring. Fluorescein appears to be a good colouring for diagnostics of swallowing disorders.

• MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• diagnostické zobrazování metody   MeSH
• dospělí MeSH
• endoskopie klasifikace   metody   MeSH
• fluorescein * farmakologie   metabolismus   MeSH
• lidé MeSH
• orofarynx diagnostické zobrazování   patologie   MeSH
• poruchy polykání diagnostické zobrazování   diagnóza   etiologie   MeSH
• prospektivní studie MeSH
• sinus piriformis diagnostické zobrazování   patologie   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH

The reported method allows for a simple and rapid monitoring of DNA replication and cell cycle progression in eukaryotic cells in vitro. The DNA of replicating cells is labeled by incorporation of a metabolically-active fluorescent (Cy3) deoxyuridine triphosphate derivative, which is delivered into the cells by a synthetic transporter (SNTT1). The cells are then fixed, stained with DAPI and analyzed by flow cytometry. Thus, this protocol obviates post-labeling steps, which are indispensable in currently used incorporation assays (BrdU, EdU). The applicability of the protocol is demonstrated in analyses of cell cycles of adherent (U-2 OS, HeLa S3, RAW 264.7, J774 A.1, Chem-1, U-87 MG) and suspension (CCRF-CEM, MOLT-4, THP-1, HL-60, JURKAT) cell cultures, including those affected by a DNA polymerase inhibitor (aphidicolin). Owing to a short incorporation time (5-60 min) and reduced number of steps, the protocol can be completed within 1-2 h with a minimal cell loss and with excellent reproducibility.

• MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• bromodeoxyuridin aplikace a dávkování   MeSH
• buněčný cyklus * MeSH
• DNA analýza   MeSH
• fluorescenční barviva aplikace a dávkování   MeSH
• HeLa buňky MeSH
• HL-60 buňky MeSH
• Jurkat buňky MeSH
• karbocyaniny aplikace a dávkování   MeSH
• lidé MeSH
• průtoková cytometrie metody   MeSH
• replikace DNA * MeSH
• reprodukovatelnost výsledků MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• MeSH
• bakteriální nálož MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• Escherichia coli MeSH
• fenaziny * MeSH
• genciánová violeť * MeSH
• gramnegativní bakteriální infekce diagnóza   MeSH
• gramnegativní bakterie izolace a purifikace   MeSH
• krev mikrobiologie   MeSH
• kultivační vyšetření krve MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Staphylococcus aureus MeSH
• techniky typizace bakterií metody   MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Cytocentrifugation is a common technique for the capture of cells on microscopic slides. It usually requires a special cytocentrifuge or cytorotor and cassettes. In the study presented here, we tested the new concept of cytocentrifugation based on the threaded connection of the lid and the sample holder to ensure an adjustable flow of solutions through the filters and the collection of the filtered solutions in the reservoir during centrifugation. To test this concept, we developed a device for the preparation of cell samples on circular coverslips. The device was tested for the capture and sample processing of both eukaryotic and prokaryotic cells, cell nuclei, and mitochondria for microscopy analysis including image cytometry. Moreover, an efficient procedure was developed for capturing formaldehyde-fixed cells on non-treated coverslips without cell drying. The results showed that the tested arrangement enables the effective capture and processing of all of the tested samples and the developed device represents an inexpensive alternative to common cytocentrifuges, as only the paper filter is consumed during sample processing, and no special centrifuge, cytorotor, or cassette is necessary. As no additional system of solution removal is required during sample staining, the tested concept also facilitates the eventual automation of the staining procedure.

• MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• centrifugace přístrojové vybavení   metody   MeSH
• cytologické techniky přístrojové vybavení   metody   MeSH
• lidé MeSH
• mikroskopie metody   MeSH
• odběr biologického vzorku metody   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH

Chromoblastomykózy a feohyfomykózy jsou méně časté mykotické infekce, které jsou vyvolávány tmavě pigmentovanými houbami. Faktory virulence hrají významnou úlohu v patogenezi těchto onemocnění. Muriformní buňky jsou jedním z těchto faktorů a jsou také nejdůležitějším prvkem pro diferenciální diagnostiku chromoblastomykózy a feohyfomykózy z klinického materiálu pomocí různých technik barvení mikroskopických preparátů. Přesná identifikace původců chromoblastomykóz a feohyfomykóz je velmi důležitá z hlediska správného a včasného přístupu k antimykotické terapii, a proto je vhodné využít pro konfirmaci druhové identifikace etiologického agens sekvenaci DNA z narostlé kultury. Včasná diagnostika může být klíčová, zejména v případě invazivních forem těchto infekcí. Některé imunochemické metody mohou být při navádění diagnostika správným směrem nápomocné a detekce DNA metodou polymerázové řetězové reakce přímo z klinického materiálu se zdá být užitečná pro identifikaci původců těchto závažných a život ohrožujících infekcí.

Chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis are less common fungal infections caused by dark-pigmented fungi. Virulence factors play an important role in the pathogenesis of these diseases. One of these factors, muriform cells, are the most important element for differential diagnosis of chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis using clinical samples and various staining techniques. Accurate identification of pathogens causing chromoblastomycosis and phaeohyphomycosis is very important for correct and early antifungal therapy. Therefore, species identification of the etiological agent should be confirmed by sequencing of DNA from the culture. Early diagnosis may be crucial, especially in case of invasive forms of these infections. The diagnosis may be guided by some immunohistochemistry methods and DNA detection using polymerase chain reaction directly from clinical samples seems to be useful for identification of pathogens causing these severe and life-threatening infections.

• MeSH
• Ascomycota enzymologie   izolace a purifikace   patogenita   MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• chromoblastomykóza * mikrobiologie   patologie   MeSH
• faktory virulence analýza   imunologie   izolace a purifikace   MeSH
• histologické techniky metody   MeSH
• imunohistochemie metody   MeSH
• interakce hostitele a patogenu genetika   imunologie   MeSH
• kultivační média speciální MeSH
• lidé MeSH
• phaeohyphomykóza * mikrobiologie   patologie   MeSH
• polymerázová řetězová reakce metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

• MeSH
• antigen Ki-67 analýza   MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• biologické markery MeSH
• časná detekce nádoru metody   MeSH
• imunohistochemie metody   MeSH
• inhibitor p16 cyklin-dependentní kinasy analýza   MeSH
• lidé MeSH
• nádory děložního čípku * diagnostické zobrazování   patologie   MeSH
• Papanicolaouův test metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Výskyt syndromu suchého oka je v oftalmologické praxi častý. Terapeutický postup závisí na příčinách choroby. Léčba je obvykle zahajována aplikací umělých slz. Autoři diskutují aktuální diagnostické a terapeutické možnosti.

Dry eye syndrome is a common ocular disease. Treatment depends on the underlaying cause. Arteficial tears are the usual first line treatment. New tools available to help diagnose the presence of this syndrome and innovative therapeutic trends are discussed.

• MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• lidé MeSH
• mikroskopie atomárních sil metody   MeSH
• nemoci slzného ústrojí chirurgie   diagnostické zobrazování   komplikace   MeSH
• slzné ústrojí * anatomie a histologie   patofyziologie   účinky léků   MeSH
• slzy fyziologie   MeSH
• syndromy suchého oka * diagnóza   patofyziologie   terapie   MeSH
• zvlhčující oční kapky farmakologie   terapeutické užití   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

The thymidine analogues BrdU (5-bromo-2´-deoxyuridine) and EdU (5-ethynyl-2´-deoxyuridine) are routinely used for determination of the cells synthesizing DNA in the S-phase of the cell cycle. Availability of the anti-BrdU antibody clone MoBu-1 detecting only BrdU allowed to develop a method for the sequential DNA labelling by these two thymidine analogues for determining the cell cycle kinetic parameters.In the current step-by-step protocol, we present` two approaches optimized for in vivo study of the cell cycle and the limitations that such approaches imply: (1) determination of the cell flow rate into the G2-phase by dual EdU/BrdU DNA-labelling method and (2) determination of the outflow of DNA-labelled cells arising from the mitosis.

• MeSH
• analýza dat MeSH
• barvení a značení metody   MeSH
• bromodeoxyuridin metabolismus   MeSH
• buněčná diferenciace MeSH
• buněčný cyklus * MeSH
• buňky kostní dřeně metabolismus   MeSH
• deoxyuridin analogy a deriváty   MeSH
• DNA biosyntéza   MeSH
• imunofenotypizace MeSH
• mitóza MeSH
• myši MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• reologie MeSH
• S fáze MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH