Inorganic polyphosphate is involved in architecture and functioning of yeast cell wall. The strain of Saccharomyces cerevisiae constitutively overexpressing acid phosphatase Pho5 was constructed for studying the Pho5 properties and its possible participation in polyphosphate metabolism. The parent strain was transformed by the vector carrying the PHO5 gene under a strong constitutive promoter of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase of S. cerevisiae. The culture liquid and biomass of transformant strain contained approximately equal total acid phosphatase activity. The levels of acid phosphatase activity associated with the cell wall and culture liquid increased in the transformant strain compared to the parent strain ~ 10- and 20-fold, respectively. The Pho5 preparation (specific activity of 46 U/mg protein and yield of 95 U/L) was obtained from culture liquid of overproducing strain. The overproducing strain had no changes in polyphosphate level. The activity of Pho5 with long-chained polyP was negligible. We concluded that Pho5 is not involved in polyphosphate metabolism. Purified Pho5 showed a similar activity with p-nitrophenylphosphate, ATP, ADP, glycerophosphate, and glucose-6-phosphate. The substrate specificity of Pho5 and its extracellular localization suggest its function: the hydrolysis of organic compounds with phosphoester bonds at phosphate limitation.
- MeSH
- kyselá fosfatasa genetika izolace a purifikace metabolismus MeSH
- polyfosfáty metabolismus MeSH
- promotorové oblasti (genetika) genetika MeSH
- rekombinantní fúzní proteiny genetika izolace a purifikace metabolismus MeSH
- Saccharomyces cerevisiae - proteiny genetika izolace a purifikace metabolismus MeSH
- Saccharomyces cerevisiae enzymologie metabolismus MeSH
- substrátová specifita MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- MeSH
- barvení a značení metody využití MeSH
- barvicí látky diagnostické užití MeSH
- cytofotometrie metody využití MeSH
- histocytochemie metody využití MeSH
- interferenční mikroskopie metody využití MeSH
- játra cytologie enzymologie chemie MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kyselá fosfatasa diagnostické užití izolace a purifikace MeSH
- naftoly diagnostické užití MeSH
- statistika jako téma MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- krysa rodu rattus MeSH
- zvířata MeSH
- MeSH
- alkalická fosfatasa klasifikace krev MeSH
- enzymy krev metabolismus MeSH
- esterasy izolace a purifikace klasifikace krev MeSH
- granulocyty enzymologie MeSH
- hematologie metody MeSH
- hemoglobiny izolace a purifikace klasifikace MeSH
- histocytochemie metody využití MeSH
- krev imunologie metabolismus MeSH
- kyselá fosfatasa izolace a purifikace klasifikace krev MeSH
- leukemie diagnóza MeSH
- lidé MeSH
- peroxidasa izolace a purifikace klasifikace krev MeSH
- vyšetřování kostní dřeně metody využití MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- MeSH
- centrální nervový systém enzymologie chemie MeSH
- histocytochemie metody využití MeSH
- játra cytologie enzymologie chemie MeSH
- králíci MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- kyselá fosfatasa diagnostické užití chemie izolace a purifikace MeSH
- ledviny cytologie enzymologie chemie MeSH
- methionin sulfoximin diagnostické užití MeSH
- mozeček cytologie enzymologie chemie MeSH
- naftoly diagnostické užití MeSH
- statistika jako téma MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- králíci MeSH
- krysa rodu rattus MeSH
- zvířata MeSH
- MeSH
- adenosintrifosfatasy izolace a purifikace metabolismus MeSH
- alkalická fosfatasa izolace a purifikace metabolismus MeSH
- epifýza mozková cytologie enzymologie fyziologie MeSH
- esterasy izolace a purifikace metabolismus MeSH
- histocytochemie metody přístrojové vybavení využití MeSH
- kyselá fosfatasa izolace a purifikace metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- multienzymové komplexy izolace a purifikace metabolismus MeSH
- oxidoreduktasy izolace a purifikace metabolismus MeSH
- peroxidasa izolace a purifikace metabolismus MeSH
- pitva metody MeSH
- proteasy izolace a purifikace metabolismus MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
