The blood group system AB0 is determined by the composition of terminal oligosaccharides on red blood cells. Thanks to this structural feature, these groups can be recognized by saccharide-recognizing compounds. Lectins are proteins that are able to reversibly bind saccharide structures. They generally occur as multimers and are known as hemagglutination agents. Hemagglutination is a process in which blood cells are cross-linked via multivalent molecules. Apart from lectins, hemagglutination can also be caused by antibodies or viruses. A hemagglutination assay is commonly used for the detection of multivalent molecules that recognize blood cells, in order to search for their sugar specificity. It is traditionally performed on a microtiter plate, where the lectin solution is serially diluted and the lowest concentration of lectin causing agglutination is detected. This experimental set-up is utilized further for testing lectin specificity via a hemagglutination inhibition assay. We have developed a new way of detecting hemagglutination using microscopy, which was tested on purified lectins as well as cell lysates. Hemagglutination was performed on a microscope slide directly and detected using a microscope. Comparison with the standard hemagglutination assay using microtiter plates revealed that microscopic approach is faster and more robust and allows fast determination of lectin activities immediately in bacterial cytosols.
- MeSH
- hemaglutinace * MeSH
- hemaglutinační testy metody MeSH
- hemolýza MeSH
- lektiny metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- mikroskopie metody MeSH
- testy inhibice hemaglutinace metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
Sérologické vyšetření hraje v diagnostice chřipky důležitou roli, především v určení postvakcinačních a postinfekčních protilátek. Vzhledem k různým diagnostickým možnostem je nutné metodiku sérologického vyšetření volit podle konkrétních okolností – zda se jedná o párové sérum či jednovzorek, zda je k dispozici adekvátní anamnéza pacienta a případné epidemiologické souvislosti a především – jakému účelu bude výsledek sloužit (diferenciálnědiagnostická rozvaha, postinfekční sledování, postvakcinační zhodnocení). Virusneutralizace představuje jeden z nejcitlivějších a nejobjektivnějších sérologických testů, je však velmi závislá na přesném vyvážení reakce a kvalitě viru, který je do reakce použit. Stanovení protektivního titru je pro rutinní praxi nezbytné. V našem testovaní jsme došli k závěru, že virusneutralizační titry jsou v porovnání s HIT či KFR až osminásobně vyšší, korelace však není nikterak pevná a je významně ovlivněná individuální výší protilátek proti neuraminidáze a některým vnitřním proteinům. Autoři předběžně uzavírají, že výše protektivního titru ve virusneutralizačním testu bude nejméně 1 : 80. Informativní význam titrů nižších než 1 : 40 je sporný.
Serology plays an important role in the diagnosis of influenza, particularly in the detection of post-vaccination and post-infection antibodies. When considering the range of diagnostic options, the serological method should be selected depending on the circumstances – whether single or paired serum samples are tested, whether adequate patient medical history data are available, whether epidemiological links are suspected, and, in particular, to what purpose the result will be used (differential diagnosis, post-infection follow-up, post-vaccination monitoring, etc.). The virus neutralization assay is one of the most sensitive and most objective serological tests, but it is highly dependent on the reaction balance and quality of the virus used. Determining the protective titer is crucial for the routine practice. Based on our experiments, we concluded that the virus neutralizing antibody titers are up to eight times as high in comparison with the hemaglutination inhibition test (HIT) or complement fixation reaction (CFR), but the correlation varies and is significantly influenced by interindividual variation in anti-neuraminidase antibodies and those against some internal proteins of influenza virus. We assume that the protective titer in the virus neutralization assay will be not less than 1 : 80. The predictive value of the titers below 1 : 40 is questionable.
- Klíčová slova
- virusneutralizace, virus chřipky, ochranné titry,
- MeSH
- aglutinační testy metody využití MeSH
- chřipka lidská diagnóza epidemiologie virologie MeSH
- hemaglutinační testy metody využití MeSH
- klinické laboratorní techniky metody využití MeSH
- komplement fixační testy metody využití MeSH
- lidé MeSH
- neuraminidasa antagonisté a inhibitory izolace a purifikace krev MeSH
- neutralizační testy metody využití MeSH
- pandemie prevence a kontrola MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody využití MeSH
- sérologické testy metody využití MeSH
- sérologie metody MeSH
- statistika jako téma MeSH
- testy inhibice hemadsorpce metody využití MeSH
- testy inhibice hemaglutinace metody využití MeSH
- virus chřipky A, podtyp H1N1 izolace a purifikace MeSH
- virus chřipky A izolace a purifikace MeSH
- virus chřipky B izolace a purifikace MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
We examined 138 saliva samples for the presence or absence of the blood antigens ABH using haemagglutination inhibition methodology. The outcomes of the tests were scanned and examined by special software, which used the HSV colour model, allowed setting the parameters in a way that enabled differentiation of agglutination clusters from suspensions of erythrocytes and subsequently calculated the area of agglutination clusters. The size of the area was (inversely) related to the presence of ABH substances in saliva. Both the secretor phenotypes and the intensity of secretion into saliva were statistically analysed in relation to gender, blood type, blood group genotype frequencies and secretor genotype frequencies.
- MeSH
- ABO systém krevních skupin analýza MeSH
- erytrocyty chemie MeSH
- kolorimetrie MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- počítačové zpracování obrazu metody MeSH
- sliny chemie MeSH
- software MeSH
- testy inhibice hemaglutinace metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
