Na stanovení koncentrace isepamicinu v séru byla zavedena HPLC metoda s derivatizací. Isepamicin a tobramicin (vnitřní standard) se extrahovaly ze séra na kolonkách plněných Amberlitem XAD-2. Derivatizace se prováděla 1-fluor-2,4-dinitrobenzenem 1 hod na vodní lázni při teplotě 80 °C. Na chromatografickou analýzu se použila microbore kolona 1x150 mm s reversní octadecylovou fází, mobilní fáze byla složena následovně: acetonitril/methanol/voda/triethylamin 20:80:140:0,05 v/v/v/v, pH 3,8. Detekce se prováděla při 365 nm. Linearita metody byla testována v rozsahu 0-100 mg/ml, recovery bylo 96-102 % a variační koeficient okolo 5 % v koncentracích 10, 25 a 100 mg/l. U 17 pediatrických pacientů (osm bylo mladších než šest let a devět starších) byla stanovována minimální a maximální koncentrace isepamicinu. Průměrný věk dětí byl 8,4±5 let a hmotnost 26,7±13,4 kg. Dávka 13,3±2,9 mg/kg isepamicinu se podávala ve 30 minutové infuzi jednou denně. Průměrné údolní koncentrace isepamicinu byly 1,05±1,5 mg/l a v píku 35,4±19,5 mg/l. Farmakokinetické parametry se získaly pomocí farmakokinetického programu MW- PHARM 3.30. Jako model se použila populační farmakokinetika gentamicinu pro různé věkové skupiny. U dětí pod šest let jsme zjistili následující farmakokinetické parametry: CL 2,41±1,71 ml/min/kg, Vd 0,49±0,12 l/kg, t1/2 3,03±2,12 hod., Cmax 28,77±19,46 mg/l, Cmin 0,58±0,75mg/l a tmax 0,51±0,24 hodin. U dětí nad 6 let: CL 1,50±1,45 ml/min/ kg, Vd 0,32±0,087 l/kg, t1/2 3,83±1,97 hod.,Cmax 41,23±23,81 mg/l, Cmin 1,47±1,92 mg/l a tmax 0,40±0,17 hod. Zavedení HPLC metody a farmakokinetické modelování může snížit riziko toxicity isepamicinu.
HPLC method with derivatisation for measuring isepamicin concentration in serum has been developed. The assay utilised extraction of isepamicin and tobramicin (IS) from serum on Amberlite XAD-2 columns. Derivatisation was performed with 1-fluor-2,4-dinitrobenzene for 1 hour in water bath at 80 °C. Chromatography was carried out using microbore column (1 × 150 mm) with reverse octadecyl phase and acetonitril/methanol/water/triethylamine 20:80:140:0,05 v/v/v/v, pH 3,8 as mobile phase. Separation was monitored at 365 nm. Linearity was 0-100 mg/ml, recovery 96-102 % and coefficient of variations about 5 % in tested concentrations (10, 25 and 100 mg/ml). Trough and peak serum levels of isepamicin were measured during the treatment of 17 paediatric patients (8 were under 6 and 9 over 6 years). Mean age was 8,4±5 years and weight 26,7±13.4 kg. The dose of isepamicin 13,3±2,9 mg/kg was given in 30 minutes infusion once daily. Trough level was found 1,05±1,51 mg/l and peak level 35,4±19,5 mg/l, respectively. Pharmacokinetic data were obtained by the aid of pharmacokinetic program MW-PHARM 3.30. Gentamicin population pharmacokinetic model for different age groups was used. In the group of children under 6 year the pharmacokinetic data were CL 2,41±1,71 ml/min/kg, Vd 0,49±0,12 l/kg, t1/2 3,03±2,12 hours, Cmax 28,77±19,46 mg/l, Cmin 0,58±0,75mg/l and tmax 0,51±0,24 hours. While in the group of children over 6 year were CL 1,50±1,45 ml/min/kg, Vd 0,32±0,08 l/kg, t1/2 3,83±1,97 hours, Cmax 41,23±23,81 mg/l, Cmin 1,47±1,92 mg/l and tmax 0,40±0,17 hours. Implementation of HPLC method and pharmacokinetic modelling may reduce risk of isepamicin toxicity.
- Klíčová slova
- ISEPAMICIN,
- MeSH
- dítě MeSH
- monitorování léčiv MeSH
- nežádoucí účinky léčiv MeSH
- tobramycin farmakokinetika krev MeSH
- vysokoúčinná kapalinová chromatografie metody MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
Sledovali sme potlačenie bakteriálneho rastu siedmich kmeňov Acinetohacter spp. po 30 min účinku tobramycínu v suprainhibičných koncentráciách (postantibiotický účinok - PAE) a v supra-subinhibičných koncentráciách (postantibiotický účinok subinhibičných koncentrácií - PA SME) ako aj zmeny v povrchovej hydrofobicite, v produkcii lipázy a histamínu u týchto exponovaných kmeňov. Sledované farmakodynamické parametre (PAE a PA SME) ako aj zmeny v testovaných vlastnostiach Študovaných kmeňov boli závislé na koncentrácii antibiotika a na kmeni. Potlačenie bakteriálneho rastu po účinku tobramycínu v koncentrácii 2x MIC sa pohybovalo v rozsahu od 0,6-4,5 h, vyššia koncentrácia (4x MIC) indukovala dlhšie PAE (1,9-5,4 h). Tobramycín v supra-subinhibičných koncentráciách (2x MIC + 0,2x MIC a 4x MIC + 0,2x MIC) spôsobil úplnú supresiu bakteriálneho rastu. U väčšiny testovaných kmeňov sa po účinku tobramycínu zistilo zvýšenie hydrofobicity hodnotenej adherenciou baktérií na xylén, ako aj zvýšenie lipolytickej aktivity. Tobramycín v testovaných koncentráciách neovplyvnil produkciu histamínu.
Suppression of bacterial growth in seven strains of the Acinetobacter species after 30 min treatment with tobramycin at suprainhibitory concentrations (postantibiotic effect - PAE) and at supra-subinhibitory concentrations (postantibiotic effect of subinhibitory concentrations - PA SME) as well as changes in surface hydrophobicity and in the production of lipase and histamine in the exposed strains were studied. Pharmacodynamic parameters (PAE and PA SME) as well as changes in bacterial characteristics tested were dependent on antibiotic concentration and on the strain used. Suppression of bacterial growth after treatment with tobramycin at 2x MIC was in a range of 0.6-4.5 h, a higher concentration (4x MIC) induced a longer PAE (1.9-5.4 h). Tobramycin at supra-subinhibitory concentratinos (2x MIC + 0.2x MIC and 4x MIC + 0.2x MIC) caused total suppression of bacterial growth. In the majority of the tobramycin-treated strains, an increase in hydrophobicity manifested by adherence of bacteria to xylene as well as an increase in hpolytic activity was observed. Tobramycin at the concentrations tested did not affect the production of histamine.
