Juvenile idiopathic arthritis (JIA) is a multifactorial autoimmune disease with involvement of adaptive and also innate immunity. The biological therapy (IL-1ß, IL-6 and TNFa inhibitors) revolutionized patient care, but there is still substantial variability in response to these drugs among JIA patients. Predictors for good clinical outcome are still missing and moreover, the therapy might bring complications such as drug-induced autoimmune diseases or increased susceptibility to infections. Neutrophils have an important role in pathology of these adverse effects, therefore we plan to focus on neutrophil functions in JIA patients during biological therapy. Our approach will include detailed phenotyping, functional tests, neutrophil extracellular trap formation and an effect on other immune cells. Subsequently, we will investigate especially neutrophils from the synovial fluid by mass cytometry and transcriptomics to obtain their complex characteristics. We believe that, our work will help to define neutrophil-related biomarker that could help to improve clinical decision-making.

Juvenilní idiopatická artritida (JIA) je multifaktoriální autoimunitní onemocnění zahrnující jak adaptivní tak i přirozenou imunitu. I přes revoluční přínos biologické léčby při péči o pacienty, je stále velká variabilita u JIA pacientů v odpovídavosti na léčbu. Predikátory dobrého klinického vývoje se stále hledají a terapie také může přinést řadu komplikací, jako například indukci autoimunitních onemocnění nebo náchylnost k infekcím. Jelikož je známo, že se neutrofily se podílejí na patologii těchto nežádoucích účinků, plánujeme se zaměřit na funkční vlastnosti neutrofilů u JIA pacientů během biologické léčby (IL-1ß, IL-6, TNFa inhibitory). Projekt bude zahrnovat detailní fenotypizaci, funkční testy, tvorbu neutrofilních extracelulárních pastí a interakce s ostatními imunitními buňkami. Komplexní chatakteristiku doplníme detekcí neutrofilů v synoviální tekutině, jejich fenotypizací pomocí hmotnostní cytometrie a RNA sekvenace. Věříme, že tato práce poslouží k podrobnějšímu definování netrofilů jako biomarkerů, které napomohou nasměrovat klinická rozhodnutí a zlepší péči o pacienty.

• Klíčová slova
• synoviální tekutina, synovial fluid, biologická léčba, neutrofily, neutrophils, dendritické buňky, dendritic cells, juvenilní idiopatická artritida, juvenile idiopathic arthritis, CyTOF, RNA-seq, biologic therapy, RNA-seq, CyTOF,

• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu AZV MZ ČR

We aimed to evaluate in vivo effects of abatacept on phenotypes of T and B cells in the circulation of myositis patients in a sub-study of the ARTEMIS trial. Twelve patients with paired frozen PBMCs before and after 6-month abatacept treatment were included in this sub-study where mass cytometry (CyTOF) was chosen as a technology to be tested for its utility in a real-life clinical immune monitoring setting. Using CyTOF, the peripheral T cell phenotypes demonstrated considerable variation over time and between individuals precluding the identification of treatment-specific changes. We therefore conclude that studies of patient cohorts displaying wide clinical heterogeneity using mass cytometry must be relatively large in order to be suited for discovery research and immune monitoring. Still, we did find some correlations with functional muscle outcome, namely positive correlations between the ratio of CD4+ T cells and CD8+ T cells (CD4/CD8) in peripheral blood samples both at baseline and after treatment with muscle endurance improvement as assessed by the functional index-2 (FI-2) test. Our data suggest that the CD4/CD8 ratio in circulation at time of active disease may be a predictor of treatment efficacy in myositis patients.

• MeSH
• abatacept terapeutické užití   MeSH
• dermatomyozitida krev   farmakoterapie   imunologie   MeSH
• dospělí MeSH
• imunosupresiva terapeutické užití   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• podskupiny B-lymfocytů účinky léků   MeSH
• polymyozitida krev   farmakoterapie   imunologie   MeSH
• T-lymfocyty - podskupiny účinky léků   MeSH
• Check Tag
• dospělí MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• randomizované kontrolované studie MeSH

Monocyte homing to the liver and adhesion to the liver sinusoidal endothelial cells (LSECs) are key elements in nonalcoholic steatohepatitis (NASH) pathogenesis. We reported previously that VCAM-1 mediates monocyte adhesion to LSECs. However, the pathogenic role of VCAM-1 in NASH is unclear. Herein, we report that VCAM-1 was a top upregulated adhesion molecule in the NASH mouse liver transcriptome. Open chromatin landscape profiling combined with genome-wide transcriptome analysis showed robust transcriptional upregulation of LSEC VCAM-1 in murine NASH. Moreover, LSEC VCAM-1 expression was significantly increased in human NASH. LSEC VCAM-1 expression was upregulated by palmitate treatment in vitro and reduced with inhibition of the mitogen-activated protein 3 kinase (MAP3K) mixed lineage kinase 3 (MLK3). Likewise, LSEC VCAM-1 expression was reduced in the Mlk3-/- mice with diet-induced NASH. Furthermore, VCAM-1 neutralizing Ab or pharmacological inhibition attenuated diet-induced NASH in mice, mainly via reducing the proinflammatory monocyte hepatic population as examined by mass cytometry by time of flight (CyTOF). Moreover, endothelium-specific Vcam1 knockout mice were also protected against NASH. In summary, lipotoxic stress enhances the expression of LSEC VCAM-1, in part, through MLK3 signaling. Inhibition of VCAM-1 was salutary in murine NASH and might serve as a potential therapeutic strategy for human NASH.

• MeSH
• cévní buněčněadhezivní molekula-1 antagonisté a inhibitory   genetika   metabolismus   MeSH
• endoteliální buňky účinky léků   metabolismus   MeSH
• játra účinky léků   metabolismus   patologie   MeSH
• lidé MeSH
• MAP kinasový signální systém účinky léků   MeSH
• messenger RNA genetika   MeSH
• modely nemocí na zvířatech MeSH
• myši inbrední C57BL MeSH
• myši knockoutované MeSH
• myši MeSH
• nealkoholová steatóza jater etiologie   genetika   metabolismus   MeSH
• neutralizující protilátky aplikace a dávkování   MeSH
• palmitany toxicita   MeSH
• stanovení celkové genové exprese MeSH
• upregulace účinky léků   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• myši MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Research Support, N.I.H., Extramural MeSH