Úvod: Syndrom DiGeorge je vrozené onemocnění asociované s vývojovými poruchami, mezi něž patří hypoplazie, aplazie nebo patologická migrace thymu. Příčinou onemocnění je delece genů na 22. chromozomu, označovaná jako del22q11. Patologie thymu spojená se syndromem DiGeorge by teoreticky měla způsobovat těžkou poruchu imunity. Proto jsme prospektivně sledovali soubor dětí s prokázanou delecí del 22q11. Pacienti a metody: U 14 chlapců a 23 dívek ve věku 4 dny až 19 let jsme provedli jedno až šest opakovaných vyšetření. Imunologické vyšetření bylo zaměřeno na vyšetření T lymfocytů a jejich funkcí. Vzhledem k předpokládané úloze thymu při selekci T lymfocytů jsme dále sledovali přítomnost dvojitě pozitivních CD4+CD8+ a g/d T lymfocytů v periferii. Výsledky: Nízký počet T lymfocytů jsme nacházeli u většiny pacientů do dvou let věku. U všech dětí se syndromem DiGeorge, které byly mladší než dva roky, byla ve srovnání s kontrolami překvapivě zvýšená spontánní i stimulovaná proliferace. Jak počet T lymfocytů, tak jejich proliferační aktivita se v průběhu vývoje u většiny pacientů normalizovala. Dvojitě pozitivní T buňky jsme zachytili u jednoho chlapce současně s pozitivitou antinukleárních protilátek. Počet g/d T buněk byl vyšší než 5% u 21% dětí. V průběhu pětileté prospektivní studie jsme dosud u pacientů nepozorovali závažné klinické známky imunodeficience nebo autoimunity s výjimkou recidivujících respiračních infektů, které bylo možné dobře kontrolovat antibiotickou terapií. Závěr: U všech pacientů se syndromem DiGeorge jsme pozorovali v souladu s poruchou funkce thymu v období vývoje imunitního systému sice opožděný, ale rozvíjející se obraz imunitních funkcí. Přesný patogenetický mechanismus těchto pochodů zatím není znám, ale s poznáváním genů v kritické oblasti 22. chromozomu lze očekávat v blízké době zásadní poznatky.

Syndrome DiGeorge is relatively common congenital disorder with developmental defects including hypoplasia, aplasia or pathological migration of thymus, associated with deletion of contiguous genes on chromosome 22. Thymus pathology associated with DiGeorge syndrome should theoretically cause the profound immunodeficiency. We then followed, on the prospective basis, the cohort of children with confirmed 22q11 deletion. Patients and methods: One up to six repeated investigations was performed in 14 boys and 23 girls, in the age range from 4 days to 19 years. Immune investigation focused on T lymphocytes and their function. Due to the proposed role of thymus in T lymphocyte selection we followed the presence of double positive CD4+CD8+ and g/d T lymphocytes in the periphery. Results: Low number of T lymphocytes was detected in majority of patients before the age of 2 years. Both spontaneous and PHA induced proliferation was unexpectedly increased in comparison with normal samples in all tested children less then 2 years old. Both T cell numbers and T lymphocyte proliferation normalized thereafter in majority of patients. Double positive T cells were detected in one boy, together with transient positivity of antinuclear antibodies. g/d T cells were higher than 5% in 21% of children. In the 5 years long prospective study we did not yet observe serious clinical signs of immunodeficiency or autoimmunity in patients besides repeated respiratory infections that were successfully controlled by antibiotic therapy. Conclusion: All patients, classified as partial DiGeorge syndrome, presented with delayed but gradual development of immune function on the background of impaired support of thymic tissue.

• MeSH
• delece genu MeSH
• DiGeorgeův syndrom diagnóza   etiologie   imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• kojenec MeSH
• lidé MeSH
• lidské chromozomy, pár 22 MeSH
• mladiství MeSH
• novorozenec MeSH
• prospektivní studie MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti diagnóza   etiologie   MeSH
• T-lymfocyty fyziologie   růst a vývoj   MeSH
• thymus fyziologie   MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• kojenec MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• novorozenec MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• srovnávací studie MeSH

Syndrom DiGeorge je primární imunodeficiencí spojenou s agenezí thymu a T lymfopenií. Pacienti s kompletní formou trpí život ohrožující kombinovanou imunodeficiencí. Jedinou terapeutickou možností pro ně v minulosti byla transplantace kostní dřeně, která je však spojena s řadou rizik a špatnou dlouhodobou prognózou. V tomto textu představujeme transplantaci thymu jako novou terapeutickou metodu léčby kompletního syndromu DiGeorge na příkladu první české pacientky, která tuto transplantaci podstoupila. Kazuistika je popsána z klinického i laboratorního hlediska, doplněna grafy laboratorních výsledků a fotografiemi. Text se dále věnuje metodologii procedury a dotýká se praktických aspektů indikace, organizace a realizace této v současné době revoluční procedury.

DiGeorge syndrome is a primary immunodeficiency tied to thymic aplasia and T lymphopenia. Patients with complete DiGeorge syndrome suffer from life-threatening combined immunodeficiency. Until recently, the only therapeutic option for treatment of complete DiGeorge syn-drome was bone marrow transplantation, which was however encumbered by many risks and had unfavorable long-term prognosis. In this text we present thymic transplantation as a novel therapeutic option for patients with complete DiGeorge syndrome, via the case report of the first Czech patient who underwent this procedure. The case report includes both clinical and laboratory story and is accompanied by photos and charts of laboratory results. The text also presents the methodology of the procedure and touches on practical aspects of diagnosis, indication and organization of this current ground-breaking procedure

• MeSH
• DiGeorgeův syndrom * terapie   MeSH
• lidé MeSH
• předškolní dítě MeSH
• syndromy imunologické nedostatečnosti terapie   MeSH
• T-lymfocyty MeSH
• thymus * imunologie   patofyziologie   MeSH
• transplantace kostní dřeně * metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• předškolní dítě MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

• Publikační typ
• abstrakty MeSH

DiGeorgeův syndrom se řadí k nejčastějším genetickým mikrodelečním syndromům. Cesta k diagnostice bývá velmi složitá, především díky obrovskému množství až 180 fenotypových znaků. K nejčastějším z nich patří vrozené srdeční vady, hypokalcemie na podkladě hypoparatyreoidismu, imunodeficience pro hypoplazii až aplazii thymu a rozštěpové vady měkkého patra. Pro různorodý klinický obraz a v některých případech i pozdní diagnostiku se jedná o onemocnění, na které by měli pomýšlet nejen dětští lékaři, ale i praktičtí lékaři pro dospělé a specialisté interních a chirurgických oborů, což je prezentováno i v následující kazuistice 13letého chlapce s parciální formou DiGeorgeova syndromu. Názorně je zde poukázáno na významnou roli mezioborové spolupráce, která je důležitá nejen pro diagnostiku, ale i pro následnou dispenzarizaci pacientů s DiGeorgeovým syndromem.

DiGeorge syndrome belongs to the most common genetic microdeletion syndromes. The way to its diagnosis could be often very difficult, mainly because of enormous number (up to 180) phenotypic features. Among the most common of these features belong congenital heart diseases, hypocalcemia due to hypoparathyroidism, immunodeficiency for hypoplasia to thymic aplasia and palatal cleft. Not only pediatricians but also general practitioners and specialists in internal medicine and surgery should consider DiGeorge syndrome for its variability of presentation and posibility of late diagnosis in some cases, described in the following case report of a 13-year-old boy with a partial type of this syndrome. A significant role of multidisciplinary cooperation is graphically pointed out, which is important not only for diagnostics, but also for the subsequent dispensarization of patients with DiGeorge syndrome.

• MeSH
• DiGeorgeův syndrom * diagnóza   terapie   MeSH
• dítě MeSH
• lidé MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH

Current proposal covers systematic and prospective immunological investigation of a cohort of children with syndrome diGeorge. As a part of their genetic defect these patient have impaired development of thymus that substantially affects their immune functions. We plan to investigate in a prospective study not only T cells that were in past studied in detail, but also B cells potentially affected by impaired T cells help. We also plan to investigate T regulatory cells and T regulatory cells expressing Helios as a marker of thymus derived Tregs. We finally plan to correlate all these finding with age and clinical status of diGeorge children.

Předkládaný projekt se zabývá systematickým a prospektivním sledováním dětí se syndromem diGeorge. Součástí tohoto geneticky podmíněného syndromu je porucha funkce thymu, která následně ovlivňuje vývoj imunitního sysstému. V plánu tohto projektu je studium nejenom T lymfocytů, které byly již v minulosti opakovaně vyšetřovány a výsledky publikovány, ale také B lymfocytů a protilátkové odpovědi, s předpokladem jejich ovlivnění abnormální pomocí T lymfocytů. Tato vyšetření doplníme vyšetřováním T regulačních buněk, včetně T regs exprimujících Helios, který umožní odlišení Tregs pocházejících z thymu. Všechna data budou korelována s klinikou a věkem dětí. Souhrnná analýza umožní detailní zmapování vývoje imunity u dětí se syndromem diGeorge.

• MeSH
• B-lymfocyty cytologie   MeSH
• DiGeorgeův syndrom MeSH
• fenotyp MeSH
• průtoková cytometrie MeSH
• regulační T-lymfocyty MeSH
• syndrom delece 22q11 MeSH
• T-lymfocyty cytologie   MeSH
• thymus imunologie   MeSH
• transkripční faktor Ikaros MeSH

• Konspekt
• Patologie. Klinická medicína
• NLK Obory
• alergologie a imunologie
• genetika, lékařská genetika
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

• MeSH
• DiGeorgeův syndrom genetika   imunologie   terapie   MeSH
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• lidé MeSH
• registrace MeSH
• T-lymfocyty imunologie   MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

• MeSH
• DiGeorgeův syndrom imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• finanční podpora výzkumu jako téma MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• T-lymfocyty imunologie   MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Background The DiGeorge syndrome, the most common of the microdeletion syndromes, affects multiple organs, including the heart, the nervous system, and the kidney. It is caused by deletions on chromosome 22q11.2; the genetic driver of the kidney defects is unknown. Methods We conducted a genomewide search for structural variants in two cohorts: 2080 patients with congenital kidney and urinary tract anomalies and 22,094 controls. We performed exome and targeted resequencing in samples obtained from 586 additional patients with congenital kidney anomalies. We also carried out functional studies using zebrafish and mice. Results We identified heterozygous deletions of 22q11.2 in 1.1% of the patients with congenital kidney anomalies and in 0.01% of population controls (odds ratio, 81.5; P=4.5×10(-14)). We localized the main drivers of renal disease in the DiGeorge syndrome to a 370-kb region containing nine genes. In zebrafish embryos, an induced loss of function in snap29, aifm3, and crkl resulted in renal defects; the loss of crkl alone was sufficient to induce defects. Five of 586 patients with congenital urinary anomalies had newly identified, heterozygous protein-altering variants, including a premature termination codon, in CRKL. The inactivation of Crkl in the mouse model induced developmental defects similar to those observed in patients with congenital urinary anomalies. Conclusions We identified a recurrent 370-kb deletion at the 22q11.2 locus as a driver of kidney defects in the DiGeorge syndrome and in sporadic congenital kidney and urinary tract anomalies. Of the nine genes at this locus, SNAP29, AIFM3, and CRKL appear to be critical to the phenotype, with haploinsufficiency of CRKL emerging as the main genetic driver. (Funded by the National Institutes of Health and others.).

• MeSH
• adaptorové proteiny signální transdukční genetika   MeSH
• chromozomální delece * MeSH
• dánio pruhované MeSH
• DiGeorgeův syndrom genetika   MeSH
• dítě MeSH
• exom MeSH
• haploinsuficience * MeSH
• heterozygot MeSH
• jaderné proteiny genetika   MeSH
• kojenec MeSH
• ledviny abnormality   MeSH
• lidé MeSH
• lidské chromozomy, pár 22 MeSH
• mladiství MeSH
• mladý dospělý MeSH
• močové ústrojí abnormality   MeSH
• modely u zvířat MeSH
• myši MeSH
• novorozenec MeSH
• sekvenční analýza DNA MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• kojenec MeSH
• lidé MeSH
• mladiství MeSH
• mladý dospělý MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• myši MeSH
• novorozenec MeSH
• ženské pohlaví MeSH
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Research Support, N.I.H., Extramural MeSH

Project is the continuation of prospective study of patients with immunodeficiency based on the syndrome diGeorge. The majority of patients has detectable microdeletion on chromosome 22 and subsequent complex symptomatology including missing thymus. Dysregulation of the immune system is followed according to the investigation of double positive CD4+CD8+cells, that might escape central tolerance, TCR Vbeta clonality, gama/delta T lymphocytes, systemic and organ specific autoantibodies. All patients are tested for 22q11 microdeletion by in situ hybridisation FISH. Patients with diGeorge phenotype, but not proven 22q11 vaste microdeletion, would be included to more detailed analysis of critical 22q11 region. The genetic investigation of these patients would include gene Tbx1, described as candidate gene involved most probably in the pathogenesis of syndrome diGeorge.

Projekt je pokračováním dlouhodobého prospektivního sledování skupiny pacientů s imunodeficiencí na podkladě syndromu diGeorge. Většina pacientů s tímto onemocněním má mikrodeleci na 22 chromozomu a následné komplexní postižení zahrnující chybění thymu.U pacientů sledujeme dysregulaci imunitního systému, dvojitě pozitivní T lymnfocyty, které mohou uniknoout procesům centrální tolerance, TCR Vbeta restrikci lymfocytárních klonů, systémové a orgánově specifické autoprotilátky. U všech pacientů mapujeme mikrodeleci na 22 chromozomu metodou in situ hybridizace FISH. Nově se zaměříme na pacienty, u kterých tato relativně rozsáhlá delece nebyla prokázána, u kterých budeme detailně mapovat kritickou oblast na 22 chromozomu. Při těchto genetických vyšetřeníchse zaměříme na popsaný gen Tbx1, který je kandidátním genem, hrajícím klíčovou roli v patogeneze syndromu diGeorge.

• MeSH
• autoimunita MeSH
• chromozomální delece MeSH
• cytogenetické vyšetření MeSH
• DiGeorgeův syndrom imunologie   MeSH
• dítě MeSH
• lymfatické nemoci MeSH
• spektrální karyotypizace MeSH
• T-lymfocyty MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH

• Konspekt
• Biochemie. Molekulární biologie. Biofyzika
• NLK Obory
• histologie
• hematologie a transfuzní lékařství
• alergologie a imunologie
• pediatrie
• NLK Publikační typ
• závěrečné zprávy o řešení grantu IGA MZ ČR

DiGeorgeův syndrom (velokardiofaciální syndrom, VCFS, 22q11DS) je způsobený mikrodelecemi přibližně 40 genů na jedné kopii chromosomu 22. Projevem syndromu je variabilní kombinace více než 190 fenotypových příznaků, mezi nejčastější patří vrozené vady srdce, orofaciální rozštěp a velofaryngeální insuficience. Končetinové defekty v oblasti rukou a nohou nepatří do klasického klinického obrazu DiGeorgeova syndromu. Cílem práce bylo u pacienta s typickým fenotypovým projevem 22q11DS a současně s raritním nálezem těžké ektrodaktylie na všech čtyřech končetinách zhodnotit rozsah genomické odchylky metodou celogenomových SNP arrayí za účelem vysvětlení končetinové vady. Bylo provedeno vyšetření metodou FISH, sekvenace genu TP63 a celogenomová SNP array pomocí kitu HumanCytoSNP-12 DNA Analysis Beadchip (Illumina Inc.). Metodou FISH byl potvrzen DiGeorgeův syndrom, sekvenace genu TP63 neodhalila patogenní mutaci, vyšetření metodou SNP arrayí potvrdilo deleci v oblasti 22q11.2 obvyklého rozsahu 2,9 Mb. Nebyla potvrzena původní hypotéza, že by se u pacienta mohlo jednat o deleci 22q11.2 většího rozsahu, než je obvyklé, která by zahrnovala gen asociovaný s vývojem končetin a vysvětlila těžký končetinový defekt. Ačkoli končetinové defekty nepředstavují typickou patologii v rámci DiGeorgeova syndromu, je nutno myslet na tuto diagnózu u každého novorozence s vrozenou srdeční vadou, rozštěpem obličeje a anomáliemi končetin. Přestože je u DiGeorgeova syndromu běžná značná variabilní expresivita, nelze u našeho pacienta vyloučit také náhodnou koincidenci dvou nezávislých genetických vad, DiGeorgeova syndromu v důsledku mikrodelece 22q11.2 a ektrodaktylie způsobené mutací jiného/jiných genů.

DiGeorge syndrome (velocardiofacial syndrome, VCFS, 22q11DS) is caused by a microdeletion of approximately 40 genes from one copy of chromosome 22. Expression of the syndrome is a variable combination of more than 190 phenotypic characteristics, the most common are congenital heart disease, cleft palate and velopharyngeal insufficiency. Limb anomalies of hands and feets are not a typical clinical symptoms of DiGeorge syndrome. The aim of the study was to evaluate the extent of genomic changes in a 4.5 years old child with classical phenotypic features of 22q11DS in combination with severe ectrodactyly of all four limbs in addition; using microarray based single nucleotide polymorphism techniques in order to explain the origin of limb anomaly defects. FISH analysis, TP63 gene sequencing and whole genome SNP array analysis using HumanCytoSNP-12 DNA Analysis Beadchip (Illumina Inc.) were performed. FISH method revealed DiGeorge syndrome, TP63 gene sequencing did not detect any deleterious mutation, microarray SNP analysis established microdeletion of 22q11.2 region in standard defined range of 2,9 Mb. The original possible hypothesis, that in a patient it could exist a much more genomic changes than only these related to 22q11.2 region, involving genes associated with limb development and formation and thus explaining devastating limbs damage in patient, unfortunately was not confirmed. Although limb defects do not belong to the typical pathogenic signs of DiGeorge syndrome, this diagnosis should be considered in all neonate with congenital heart defect, cleft palate and limb anomalies. Even though variable phenotypical expressivity in DiGeorge syndrome is frequent, we can not exclude the possibility of coincidence of two independent genetic defects in our patient; DiGeorge syndrome due to 22q11.2 microdeletion and ectrodactyly which results of another gene/s mutation.

• Klíčová slova
• SNP microarray, ektrodaktylie, ruka s rozštěpem, klepeto, split hand/split foot malformation,
• MeSH
• chromozomální delece MeSH
• cytogenetické vyšetření MeSH
• DiGeorgeův syndrom * diagnóza   genetika   MeSH
• fenotyp MeSH
• hybridizace in situ fluorescenční MeSH
• lidé MeSH
• lidské chromozomy, pár 22 MeSH
• nádorové supresorové proteiny genetika   MeSH
• novorozenec MeSH
• předškolní dítě MeSH
• rozštěp patra MeSH
• rozštěp rtu MeSH
• sekvenční analýza hybridizací s uspořádaným souborem oligonukleotidů MeSH
• syndaktylie MeSH
• transkripční faktory genetika   MeSH
• vrozené deformity nohy (od hlezna dolů) MeSH
• vrozené deformity ruky MeSH
• vrozené srdeční vady MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• novorozenec MeSH
• předškolní dítě MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH