Focal adhesion kinase (FAK) is essential for vascular endothelial growth factor-A (VEGFA)/VEGF receptor-2 (VEGFR2)-stimulated angiogenesis and vascular permeability. We have previously noted that presence of the Src homology-2 domain adapter protein B (SHB) is of relevance for VEGFA-stimulated angiogenesis in a FAK-dependent manner. The current study was conducted in order address the temporal dynamics of co-localization between these components in HEK293 and primary lung endothelial cells (EC) by total internal reflection fluorescence microscopy (TIRF). An early (<2.5 min) VEGFA-induced increase in VEGFR2 co-localization with SHB was dependent on tyrosine 1175 in VEGFR2. VEGFA also enhanced SHB co-localization with FAK. FAK co-localization with VEGFR2 was dependent on SHB since it was significantly lower in SHB deficient EC after VEGFA addition. Absence of SHB also resulted in a gradual decline of VEGFR2 co-localization with FAK under basal (prior to VEGFA addition) conditions. A similar basal response was observed with expression of the Y1175F-VEGFR2 mutant in wild type EC. The distribution of focal adhesions in SHB-deficient EC was altered with a primarily perinuclear location. These live cell data implicate SHB as a key component regulating FAK activity in response to VEGFA/VEGFR2.
- MeSH
- adaptorové proteiny signální transdukční metabolismus MeSH
- endoteliální buňky metabolismus MeSH
- fokální adhezní tyrosinkinasy genetika metabolismus MeSH
- fyziologická neovaskularizace fyziologie MeSH
- HEK293 buňky MeSH
- lidé MeSH
- myši inbrední BALB C MeSH
- myši knockoutované MeSH
- myši MeSH
- pohyb buněk fyziologie MeSH
- protoonkogenní proteiny metabolismus MeSH
- receptor 2 pro vaskulární endoteliální růstový faktor metabolismus MeSH
- vaskulární endoteliální růstový faktor A genetika metabolismus MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- myši MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- kouření MeSH
- lidé MeSH
- odvykání kouření MeSH
- poruchy spojené s užíváním psychoaktivních látek MeSH
- zdravotní stav MeSH
- zdravotní výchova trendy MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- kongresy MeSH
- MeSH
- kouření MeSH
- lidé MeSH
- odvykání kouření MeSH
- postoj zdravotnického personálu MeSH
- prevalence MeSH
- těhotenství MeSH
- zákonodárství jako téma dějiny MeSH
- zdravotní stav MeSH
- zdravotní výchova trendy MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- těhotenství MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- kongresy MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
- Klíčová slova
- ISOLIPAN,
- MeSH
- agonisté serotoninových receptorů farmakologie terapeutické užití MeSH
- dietoterapie metody MeSH
- energetický metabolismus fyziologie MeSH
- hypothalamus chemie patofyziologie sekrece MeSH
- lidé MeSH
- obezita dietoterapie farmakoterapie metabolismus MeSH
- odvykání kouření MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- kongresy MeSH
According to previous studies, integrins play an important role in the mechanotransduction. The aim of this study was to examine the role of integrin subunits and its down-stream signaling molecules in the cyclic hydrodynamic pressure-induced proliferation of human bladder smooth muscle cells (HBSMCs) cultured in scaffolds. The HBSMCs cultured in scaffolds were subjected to four different levels of cyclic hydrodynamic pressure for 24 hours, which were controlled by a BOSE BioDynamic bioreactor. Flow cytometry was used to examine cell cycle distribution. Real-time RT-PCR and western blotting were used to examine the expression levels of integrin subunits and their downstream signaling molecules. Integrin alpha5 siRNA was applied to validate the role of integrin alpha5 in cell proliferation. Here, we showed that cyclic hydrodynamic pressure promoted proliferation of HBSMCs. The cyclic hydrodynamic pressure also increased expression of integrin alpha5 and phosphorylation of FAK, the key mediator of integrin alpha5 signaling, but not that of integrin alpha1, alpha3, alpha4, alphav, beta1 and beta3. Moreover, inhibition of integrin alpha5 decreased the level of p-FAK and abolished proliferation of HBSMCs stimulated by cyclic hydrodynamic pressure. Taken together, we demonstrate for the ?rst time that the integrin alpha5-FAK signaling pathway controls the proliferation of HBSMCs in response to cyclic hydrodynamic pressure.
- MeSH
- buněčný převod mechanických signálů fyziologie MeSH
- fokální adhezní kinasa 1 biosyntéza MeSH
- hydrodynamika * MeSH
- integrin alfa5 biosyntéza MeSH
- kultivované buňky MeSH
- lidé MeSH
- močový měchýř cytologie metabolismus MeSH
- myocyty hladké svaloviny metabolismus MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- kouření MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- morbidita MeSH
- nemoci plodu MeSH
- novorozenec MeSH
- prevalence MeSH
- těhotenství MeSH
- zdravotní stav MeSH
- zdravotní výchova MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- kojenec MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- novorozenec MeSH
- těhotenství MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- MeSH
- endorfiny sekrece MeSH
- lidé MeSH
- odvykání kouření MeSH
- pohybová aktivita MeSH
- poruchy spojené s užíváním psychoaktivních látek prevence a kontrola terapie MeSH
- poruchy vyvolané užíváním tabáku prevence a kontrola terapie MeSH
- zdravotní výchova MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- kongresy MeSH
- MeSH
- chronické poškození mozku chirurgie MeSH
- dítě MeSH
- epilepsie chirurgie MeSH
- hemiplegie MeSH
- neurochirurgie metody MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
- MeSH
- dějiny lékařství MeSH
- nemocnice fakultní dějiny MeSH
- oftalmologie dějiny MeSH
- Geografické názvy
- Československo MeSH
- MeSH
- abstinenční syndrom diagnóza terapie MeSH
- kouření MeSH
- lidé MeSH
- návykové chování MeSH
- odvykání kouření MeSH
- poruchy spojené s užíváním psychoaktivních látek farmakoterapie komplikace terapie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- kongresy MeSH
