MLVA
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Cíl práce: Zjištění klonálních charakteristik souboru kmenů Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) působících invazivní pneu-mokokové onemocnění (IPO) v České republice (ČR) v roce 2017. Porovnání klonálního členění kmenů probíhalo v Národní referenční laboratoři pro streptokokové nákazy (NRL) použitím rutinně využívané metody multilokusové sekvenační typizace (Multilocus Sequence Typing, MLST) a nově zavedené metody multilokusové analýzy tandemových repetic (Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis, MLVA). Materiál a metodika: Studován byl soubor 87 kmenů S. pneumoniae, vybraný z izolátů doručených v rámci programu surveillance IPO v roce 2017 do NRL z celé ČR. Výběr byl veden přes sérotypy S. pneumoniae tak, aby soubor zahrnoval izoláty sérotypů zastoupených v pneumokokové konjugované 13valentní vakcíně (sérotypy 1, 4, 9V) a izoláty sérotypů nevakcinačních, vyskytujících se však v ČR ve značném zastoupení (sérotypy 8, 9N, 22F). Pro studium byla použita metoda MLST, která je světově rozšířeným standardem klonální charakterizace pneumokokových izolátů a využívá sekvenování souboru genových oblastí a metoda MLVA, která charakterizuje izoláty podle počtu tandemově repetitivních úseků v intergenových oblastech. Výsledky: MLST analýza ukázala a potvrdila vysokou míru klonální homogenity izolátů S. pneumoniae sérotypů 1, 9N, 9V, 22F a značnou genetickou proměnlivost izolátů sérotypů 4 a 8. Mezi klonálním členěním, poskytnutým oběma metodami, byla rámcová korelace. V porovnání s metodou MLST poskytovala metoda MLVA detailnější klonální odlišení. U izolátů s nově zjištěnými MLVA profily je žádoucí přiřazení nového MLVA typu (MT). Tato webová podpora MLVA schématu S. pneumonie však ustupuje do pozadí a neposkytuje aktuálně všechny služby oproti webové podpoře pro MLST charakterizaci. Závěry: Metoda MLST je a nadále zůstává u izolátů S. pneumoniae standardem při klonální charakterizaci původců IPO při provádění surveillance na úrovni místní i mezinárodní. MLST charakteristiky izolátů jsou využity při sledování klonální proměnlivosti národními i nadnárodními orgány ochrany veřejného zdraví. Metoda MLVA rutinně používána není, lze ji však použít jako doplňkovou pro zrychlené zjištění klonální příbuznosti izolátů ze situací lokálního charakteru, například ohniskových výskytů infekce. Zde může snáze zachytit vznik a šíření virulentní klonální varianty.
Aim: To determine clonal characteristics of Streptococcus pneumoniae (S. pneumoniae) strains causing invasive pneumococcal disease (IPD) in the Czech Republic (CR) in 2017. Clonal assignment of strains was performed in the National Reference Laboratory for Streptococcal Infections (NRL) by the routinely used method, multilocus sequence typing (MLST), and a newly introduced method, multiple-locus variable number tandem repeat analysis (MLVA). Material and method: The study strains were 87 isolates of S. pneumoniae selected from those referred to the NRL within the IPD surveillance programme from all over the CR in 2017. The study set covers S. pneumoniae isolates of both pneumococcal 13-valent conjugate vaccine serotypes (1, 4, and 9V) and non-vaccine serotypes (8, 9N, and 22F) widely spread in the CR. The study methods were MLST, the standard method used worldwide for the characterisation of pneumococcal isolates based on sequencing of a set of gene regions, and MLVA, which allows to characterise isolates based on the number of tandem repeats in intergenic regions. Results: MLST revealed and confirmed a high level of clonal homogeneity of S. pneumoniae isolates of serotypes 1, 9N, 9V, and 22F and a considerable genetic variability of serotype 4 and 8 isolates. There was a general correlation between the MLST and MLVA clonal complex assignments. In comparison with MLST, MLVA has superior clonal discriminatory power. Isolates with the newly determined MLVA profiles should be assigned to new MLVA types (MT). Nevertheless, the new web support of the MLVA scheme for S. pneumoniae is less relevant as it does not provide services comparable to those available from the web support for MLST characterisation. Conclusions: MLST continues to be the standard method for clonal characterisation of S. pneumoniae isolates from IPD for the purposes of both national and international surveillance. MLST characteristics of isolates are helpful in the study of clonal variability conducted by both national and transnational public health protection authorities. MLVA is not routinely used but can serve as a complementary method for rapid identification of clonal relatedness between isolates, e.g. those from local outbreaks. It is more suitable for the detection of emergence and spread of a virulent clonal variant.
Pro klonální analýzu kmenů Streptococcus pneumoniae z invazivního pneumokokového onemocnění byla v NRLpro streptokokové nákazy SZÚ zavedena a ověřena metoda Multiple-Locus Variable number tandem repeat Ana-lysis (MLVA). Oproti rutinně používané metodě Multilocus Sequence Typing (MLST) je výhodou metody MLVAsnadnost a rychlost provedení i nižší nákladnost. Rozlišení klonů je u obou metod obdobné. Standardem klonálníanalýzy pro molekulární surveillance původců závažných pneumokokových infekcí je však MLST, MLVA můžebýt doplňkem pro klonální porovnání izolátů z lokálních epidemiologických situací.
The NRL for Streptococcal Infections implemented and tested Multiple-Locus Variable number tandem repeatAnalysis (MLVA) for clonal analysis of Streptococcus pneumoniae strains from invasive pneumococcal disease.As compared to the routinely used Multilocus Sequence Typing (MLST) method, MLVA has the advantage of beingeasier, faster, and less expensive to perform. Both methods have similar resolution. Nevertheless, the standardmethod for clonal analysis in molecular surveillance of causative agents of severe pneumococcal infections isMLST, and MLVA can be used as a complementary method for clonal comparison of local isolates.
- MeSH
- DNA bakterií genetika MeSH
- minisatelitní repetice genetika MeSH
- multilokusová sekvenční typizace * metody MeSH
- pneumokokové infekce diagnóza epidemiologie MeSH
- Streptococcus pneumoniae * genetika izolace a purifikace MeSH
- techniky typizace bakterií metody MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- Klíčová slova
- Salmonella enteritidis fagotyp 8 MLVA profil 2-9-7-3-2,
- MeSH
- Evropská unie MeSH
- Salmonella enteritidis * genetika MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
Investigating genetically-structured diversity in pathogen populations over time is important to better understand disease maintenance and spread. Herd-level surveillance of Mycobacterium bovis genotypes (multi-locus VNTR analysis types, MLVA types) from all culture-confirmed bovine tuberculosis (TB) herd cases was undertaken in Northern Ireland (NI), generating an unparalleled, longitudinal, population-level 14-year survey for this pathogen. Across this population, 295 genetically-distinct M. bovis MLVA types were identified in the 19,717 M. bovis isolates surveyed. Of these, the most frequent was MLVA type 002 (23.0%); 151 MLVA types were represented more than once, in groups ranging from 2 to 4438 isolates. Only 23 MLVA types were isolated in all 14 years. Investigating inter-annual frequency of M. bovis MLVA types, examples of statistically-significant expansions (MLVA types 002, 004, 006, 009 and 027), contractions (MLVA types 001, 007 and 011) and maintenance (MLVA types 003 and 005) were disclosed, during a period of fluctuating bovine TB herd-level incidence at the NI scale. The fixed period frequency distribution of MLVA types remained highly right-skewed. Novel VNTR copy number variant MLVA types (N = 242; an average of 17 per annum) were identified throughout the survey. The MLVA type distribution in the landscape was not random; MLVA types showed statistically-significant geographical localization and strong spatial associations with Divisional Veterinary Office (DVO) regions. There was also evidence of differential risk of particular MLVA types across breeds (Holstein/Friesian vs. other), age-class, and sex and some evidence of an association between the number of animals testing positive for bovine TB during the disclosing test and particular MLVA types, although there was substantial variation.
- MeSH
- chov MeSH
- genotypizační techniky veterinární MeSH
- longitudinální studie MeSH
- minisatelitní repetice * MeSH
- multilokusová sekvenční typizace veterinární MeSH
- Mycobacterium bovis klasifikace genetika růst a vývoj izolace a purifikace MeSH
- rizikové faktory MeSH
- skot MeSH
- surveillance populace MeSH
- tuberkulóza skotu diagnóza epidemiologie MeSH
- variabilita počtu kopií segmentů DNA MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- mužské pohlaví MeSH
- skot MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Severní Irsko MeSH
Cíl práce: Cílem práce je Multiple-locus variable number tandem repeat analýza (MLVA) souboru kmenů B. pertussis ze sbírky Národní referenční laboratoře pro pertusi a difterii (NRL/DIPE) Státního zdravotního ústavu (SZÚ) Praha. Jedná se o kmeny získané ze vzorků klinického materiálu převážně na území ČR v téměř padesátiletém období 1967–2015 (červen). Je porovnávána genetická diverzita a zastoupení detekovaných MLVA typů (MT) ve třech obdobích lišících se vakcinační strategií a trendem výskytu pertuse. Na podkladě získaných výsledků je posouzena vhodnost použití metody MLVA pro analýzu epidemických výskytů B. pertussis v ČR. Materiál a metodiky: Vzorky DNA extrahované z kmenů B. pertussis studovaného souboru byly analyzovány metodou MLVA podle standardizovaného postupu. Data byla zpracována pomocí algoritmu eBURST, pro statistické zpracování byl zvolen výpočet Simpsonova indexu diverzity (DI). Data byla zpracována pro celý soubor a též odděleně pro skupiny kmenů z tří období: 1967–1980, 1990–2007 a 2008–2015 (červen). Výsledky: V souboru bylo detekováno 14 různých MT, z toho 3 dosud nezjištěné. Nejčetnější byly v celém souboru MT27 a MT29. MT29 převládal v období 1967–1980, MT27 v obdobích 1990–2007 a 2008–2015 (červen). Hodnota DI byla nejnižší (0,49) pro období 2008–2015 (červen), pro dvě předchozí období byly hodnoty vyšší a vzájemně srovnatelné (0,667 pro období 1967–1980 a 0,654 pro období 1990–2007). Závěr: MLVA analýzou souboru kmenů B. pertussis izolovaných z klinického materiálu na území ČR v období 1967–2015 (červen) byl prokázán pokles genetické diverzity ve studované populaci a změny v zastoupení a četnosti jednotlivých MT. Tyto změny lze charakterizovat jako postupný nárůst výskytu celosvětově rozšířených MT v České republice na úkor MT regionálně unikátních. Převažujícím MT, stejně jako ve většině geografických oblastí s dlouhodobě proočkovanou populací, je MT27. Výsledky MLVA analýzy souboru 136 kmenů B. pertussis mohou být podkladem pro účelné využití metody k molekulárně epidemiologickému zpracování souborů menšího rozsahu.
Aim: To perform multiple-locus variable number tandem repeat analysis (MLVA) of B. pertussis strains from the collection of the National Reference Laboratory for Diphtheria and Pertussis (NRL/DIPE), National Institute of Public Health (NIPH), Prague. The study strains were isolated from clinical specimens collected mostly in the Czech Republic over a nearly 50-year period from 1967 to 2015 (June). The isolates from three periods characterized by different vaccination strategies and trends in pertussis are compared for genetic diversity and distribution of MLVA types (MT). Based on the results obtained, the suitability for use of MLVA in the analysis of epidemic outbreaks of B. pertussis in the Czech Republic is considered. Material and methods: DNA samples extracted from B. pertussis strains included in the present study were examined by MLVA using the standard protocol. Data were processed by means of the eBURST algorithm and the calculation of the Simpson diversity index (DI) was used for the statistical analysis. Data were analyzed as a whole and also separately for strains from the three periods: 1967–1980, 1990–2007, and 2008–2015 (June). Results: Fourteen different MT were detected in the study strains, with three of them not being reported before. The most common MTs were MT27 and MT29. MT29 was predominant in 1967–1980 while MT27 was the most prevalent in 1990–2007 and 2008–2015 (June). The DI was the lowest (0.49) in 2008–2015 (June), and comparably higher DIs were calculated for the two previous periods (i.e. 0.667 for 1967–1980 and 0.654 for 1990–2007). Conclusion: MLVA revealed a decrease in genetic diversity and shifts in MT distribution of B. pertussis strains isolated from clinical specimens in the Czech Republic from 1967 to 2015 (June). These shifts in the Czech Republic can be characterized as a progressive increase in global MTs at the expense of the locally unique ones. The most common MT, similarly to other geographical areas with long-term high vaccination coverage, is MT27. The results of MLVA of 136 B. pertussis strains can provide a background for using this method in molecular epidemiological analysis of smaller groups of strains.
- MeSH
- acelulární vakcíny imunologie MeSH
- bakteriální geny genetika MeSH
- Bordetella pertussis * genetika MeSH
- časové faktory MeSH
- DNA bakterií genetika MeSH
- genetická variace genetika MeSH
- hromadná vakcinace MeSH
- lidé MeSH
- minisatelitní repetice * genetika MeSH
- multilokusová sekvenční typizace * MeSH
- pertuse epidemiologie mikrobiologie prevence a kontrola MeSH
- pertusová vakcína imunologie MeSH
- tandemové repetitivní sekvence genetika MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- práce podpořená grantem MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
- Československo MeSH
AIM: To perform a retrospective analysis of the high occurrence of Clostridium difficile infection in the surgical department of a Czech tertiary care hospital and to identify weaknesses in C. difficile infection (CDI) prevention and control policies. METHODS: Clinical and epidemiological data on eleven CDI cases were collected. C. difficile isolates were characterized by capillary electrophoresis ribotyping, multilocus variable tandem repeat analysis (MLVA), gyrA gene fragment sequencing, and erm(B) fragment PCR amplification. Antibiotic susceptibility to metronidazole, vancomycin, ciprofloxacin, moxifloxacin, and clindamycin was tested. FINDINGS: Eleven CDI cases were caused by C. difficile PCR ribotype 001 strains. These strains revealed two different MLVA profiles with 11 tandem repeat differences. All isolates were susceptible to metronidazole and vancomycin and resistant to ciprofloxacin (MIC ≥32 mg/L), moxifloxacin (MIC ≥32 mg/L), and clindamycin (MIC ≥256 mg/L). All isolates revealed amino acid substitution Thr82Ile, in the GyrA and were erm(B) negative. CONCLUSION: Two fluoroquinolone and clindamycin-resistant C. difficile PCR ribotype 001 strain clusters occurred at one of the surgical departments of a tertiary care hospital. Ineffective decontamination with suboptimal concentration and time of exposure of sporicidal disinfectants may have resulted in C. difficile transmission.
- MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- centra terciární péče MeSH
- ciprofloxacin farmakologie MeSH
- Clostridioides difficile klasifikace účinky léků genetika izolace a purifikace MeSH
- DNA bakterií genetika metabolismus MeSH
- DNA gyráza genetika metabolismus MeSH
- elektroforéza kapilární MeSH
- exprese genu MeSH
- fluorochinolony farmakologie MeSH
- klindamycin farmakologie MeSH
- klostridiové infekce farmakoterapie mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- methyltransferasy genetika metabolismus MeSH
- metronidazol farmakologie MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- minisatelitní repetice MeSH
- mnohočetná bakteriální léková rezistence genetika MeSH
- multilokusová sekvenční typizace MeSH
- retrospektivní studie MeSH
- ribotypizace MeSH
- senioři MeSH
- substituce aminokyselin MeSH
- vankomycin farmakologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika MeSH
In 2011-2012, a survey was performed in three regional hospitals in the Czech Republic to determine the incidence of Clostridium difficile infections (CDIs) and to characterize bacterial isolates. C. difficile isolates were characterized by PCR ribotyping, toxin genes detection, multiple-locus variable-number tandem-repeat analysis (MLVA), and antimicrobial susceptibility testing to fidaxomicin, vancomycin, metronidazole, clindamycin, LFF571, and moxifloxacin using agar dilution method. The incidence of CDI in three studied hospitals was 145, 146, and 24 cases per 100,000 inhabitants in 2011 and 177, 258, and 67 cases per 100,000 inhabitants in 2012. A total of 64 isolates of C. difficile was available for molecular typing and antimicrobial susceptibility testing. 60.9% of the isolates were classified as ribotype 176. All 41 isolates of ribotypes 176 and 078 were positive for the presence of binary toxin genes. Ribotype 176 also carried 18-bp deletion in the regulatory gene tcdC. Tested isolates of C. difficile were fully susceptible to vancomycin and metronidazole, whereas 65.1% of the isolates were resistant to moxifloxacin. MLVA results indicated that isolates from three different hospitals were genetically related, suggesting transmission between healthcare facilities.
- MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- bakteriální toxiny analýza genetika MeSH
- Clostridioides difficile klasifikace genetika izolace a purifikace MeSH
- diskové difúzní antimikrobiální testy MeSH
- incidence MeSH
- klostridiové infekce epidemiologie mikrobiologie MeSH
- lidé MeSH
- minisatelitní repetice MeSH
- molekulární typizace * MeSH
- nemocnice MeSH
- ribotypizace MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Česká republika epidemiologie MeSH
PURPOSE: To characterise and compare twenty-eight Finnish Clostridium difficile RT027-like isolates, selected based on the presence of 18 bp deletion in the tcdC gene and toxin gene profile (A, B, binary), with eleven RT027 isolates from different Finnish geographical areas and time periods. METHODS: Twenty-eight C. difficile RT027-like isolates and 11 RT027 comparative strains were characterised by capillary-electrophoresis (CE) ribotyping, multi-locus variable tandem-repeats analysis (MLVA), multi-locus sequence typing (MLST), and sequencing of tcdC and gyrA gene fragments. Susceptibility to moxifloxacin was determined by E-test. RESULTS: Of 28 RT027-like isolates, seven RTs (016, 034, 075, 080, 153, 176 and 328), three WEBRIBO types (411, 475, AI-78) and three new profiles (F1-F3) were identified. MLVA revealed six clonal complexes (RTs 016, 027, 176 and F3). MLST showed eleven sequence types (1, 41, 47, 67, 95, 191,192, 223, 229, 264 and new ST). Twenty-two isolates (RTs 016, 080, 176, 328, F1, F2, F3 and WRTAI-78) carried Δ117 in the tcdC gene. Isolates of RTs 016, 027 and 176 were moxifloxacin resistant and harboured Thr82Ile in the GyrA. CONCLUSION: Our results show a high diversity within 28 Finnish RT027-like C. difficile isolates, with twelve CE-ribotyping profiles and eleven STs. MLVA revealed the regional spread of RTs 016, 027, 176 and F3. The presence of Δ117 in the tcdC gene in eight non-027 RTs highlights the importance of careful interpretation of the results from molecular systems targeting this site in the genome of C. difficile and the need of strain typing for epidemiological purposes.
- MeSH
- ADP-ribosatransferasy genetika MeSH
- antibakteriální látky farmakologie MeSH
- bakteriální léková rezistence MeSH
- bakteriální proteiny genetika MeSH
- bakteriální toxiny analýza genetika MeSH
- Clostridioides difficile klasifikace účinky léků genetika izolace a purifikace MeSH
- DNA bakterií analýza MeSH
- DNA gyráza genetika MeSH
- dospělí MeSH
- enterotoxiny genetika MeSH
- fluorochinolony farmakologie MeSH
- genotyp MeSH
- klostridiové infekce epidemiologie mikrobiologie MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mikrobiální testy citlivosti MeSH
- minisatelitní repetice genetika MeSH
- mladý dospělý MeSH
- molekulární epidemiologie MeSH
- moxifloxacin MeSH
- multilokusová sekvenční typizace metody MeSH
- polymerázová řetězová reakce metody MeSH
- represorové proteiny genetika MeSH
- ribotypizace metody MeSH
- sekvence nukleotidů MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- techniky typizace bakterií * MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladý dospělý MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- Geografické názvy
- Finsko MeSH
PURPOSE: The objective of this survey was to determine the incidence of Clostridium difficile infections (CDI) at the Department of Infectious Diseases, Bulovka Hospital, and to evaluate clinical and epidemiological data on CDI patients together with a detailed molecular characterisation of C. difficile isolates. The patient outcomes were correlated to causative C. difficile PCR-ribotype. METHODS: The twelve-month study (2013) comprised patients two years of age and older with CDI. CDI severity was estimated using ESCMID criteria and ATLAS scoring. C. difficile isolates were further characterized using ribotyping, Multiple-Locus Variable Tandem-Repeats analysis (MLVA) and investigation of antibiotic-resistance determinants (gyrA, gyrB, rpoB, ermB). RESULTS: A total of 619 diarrhoeal stools were investigated. Seventy-two stool samples were GDH and toxin A/B positive, and 39 samples were GDH positive only and subsequently toxigenic C. difficile was cultured. In total, 111 C. difficile isolates were characterized, of which 64 (57.7%) belonged to PCR-ribotype 176. MLVA analysis of PCR-ribotype 176 isolates revealed 11 clonal complexes. Seventy-two isolates (64.9%) showed amino acid substitution Thr82Ile in the GyrA, and sixty-two isolates (55.9%) showed amino acid substitutions Arg505Lys together with His502Asn, or Asp492Glu together with Arg505Lys in the RpoB. Twelve isolates (10.8%) were ermB positive. Severe CDI according to the ESCMID criteria was recorded in forty-two patients (37.8%), and sixteen patients (14.4%) had ATLAS score ≥ 6. Twenty-nine patients (26.1%) had recurrent CDI and twenty-four patients (21.6%) died during the study period. CONCLUSIONS: A higher rate of severe CDI, recurrences and mortality in association with PCR-ribotype 176 infections were observed. The high incidence of PCR-ribotype 176 in the study, and the presence of clonal relatedness between PCR-ribotype 176 isolates, indicate its higher capacity to spread in a hospital setting, which in turn highlights the need to implement strict epidemic measures when PCR-ribotype 176 occurs.
- MeSH
- analýza přežití MeSH
- antibakteriální látky terapeutické užití MeSH
- bakteriální léková rezistence genetika MeSH
- bakteriální proteiny genetika MeSH
- Clostridioides difficile klasifikace účinky léků genetika izolace a purifikace MeSH
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- exprese genu MeSH
- infekce spojené se zdravotní péčí diagnóza farmakoterapie mortalita patologie MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- multilokusová sekvenční typizace MeSH
- mutace MeSH
- předškolní dítě MeSH
- průjem diagnóza farmakoterapie mortalita patologie MeSH
- pseudomembranózní enterokolitida diagnóza farmakoterapie mortalita patologie MeSH
- retrospektivní studie MeSH
- ribotypizace MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- stupeň závažnosti nemoci MeSH
- výsledek terapie MeSH
- Check Tag
- dítě MeSH
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- mladiství MeSH
- mužské pohlaví MeSH
- předškolní dítě MeSH
- senioři nad 80 let MeSH
- senioři MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
We aimed to characterize Clostridioides difficile isolates cultured during a six-month single-center study from stool samples of patients with C. difficile infection (CDI) genotyped by the Xpert®C. difficile/Epi assay by polymerase chain reaction (PCR) ribotyping, toxin genes' detection and multi-locus variable number tandem repeats analysis (MLVA). The susceptibility to metronidazole, vancomycin and moxifloxacin was determined by agar dilution. In addition, the presence of Thr82Ile in the GyrA and a single nucleotide deletion at position (Δ117) in the tcdC gene were investigated. Between January 1 and June 30, 2016, of 114 CDIs, 75 cases were genotyped as presumptive PCR ribotype (RT) 027 infections using a commercial assay. C. difficile isolates cultured from presumptive RT027 stool samples belonged to RT176. These isolates carried genes for toxin A (tcdA), B (tcdB), binary (cdtA/B) and had Δ117 in the tcdC gene. Using MLVA, the 71/75 isolates clustered into two clonal complexes (CCs). Of these, 39 isolates (54.9%) were from patients hospitalized in acute care and 32 isolates (45.1%) were isolated from patients hospitalized in the long-term care department. All isolates were susceptible to metronidazole and vancomycin, and 105 isolates were resistant to moxifloxacin (92%) carrying Thr83Ile in the GyrA. An outbreak of RT176 CDIs, suspected as RT027, was recognized in a Slovakian hospital. In order to monitor the emergence and spread of RT027-variants, the identification of a presumptive RT027 CDI should be confirmed at a strain level by PCR ribotyping.
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH