free light chains
Dotaz
Zobrazit nápovědu
Východisko. Při diagnostice monoklálních gamapatií – jedním z nejčastějších hematologických onemocnění – se využívá imunochemických testů, kdy v biologickém materiálu pátráme po produkci paraproteinu. Metody a výsledky. Běžně používanými laboratorními testy jsou elektroforéza sérových bílkovin (SPE – serum protein electrophoresis) a imunofixační elektroforézou (IFE). Novou metodou je detekce volných lehkých řetězců v séru. Ve studii porovnáváme tyto tři metody z hlediska citlivosti záchytu paraproteinu. Ke stanovení detekce volných lehkých řetězců byl použit analyzátor využívající systému Freelite (Immunotech Beckman Coulter). Vyšetřeno bylo 51 pacientů s mnohočetným myelomem, nízce maligními ne-hodgkinskými lymfomy, primární amyloidózou a monoklonální gamapatií nejasného významu. Závěry. Detekce FLC může sloužit jako cenná diagnostická metoda, která zpřesňuje diagnostiku i hodnocení odpovědi na léčbu v indikovaných případech.
Background. To diagnose monoclonal gamopathy, one of the most frequent haematological diseases, we use immunochemical assays, which are based on the detection of paraprotein in serum and/or urine. Methods and Results. The most common laboratory assays we use are SPE (serum protein electrophoresis) and IFE (immunofixation electrophoresis). New method represents the detection of free light chain (FLC) in serum. In our study we compared those three methods (SPE, IFE and FLC) from the point of sensitivity of paraprotein detection. For FLC detection was used Freelite system analyzer (Immunotech Beckman Coulter). We examined 51 patients with diagnosis of multiple myeloma, nonHodgkin’s lymphoma, primary amyloidosis and monoclonal gammopathy of undetermined significance. Conclusions. Detection of FLC is a valuable method which sometimes could specify diagnosis of MG and make the treatment more accurate.
- MeSH
- diagnostické techniky a postupy statistika a číselné údaje trendy MeSH
- imunoelektroforéza metody trendy MeSH
- krevní nemoci diagnóza etiologie MeSH
- lehké řetězce imunoglobulinů chemie imunologie krev MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom diagnóza krev moč MeSH
- paraproteiny chemie imunologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Práce podává základní informace o lehkých řetězcích imunoglobulinů. V přehledu uvádí vývoj metod používaných v klinické biochemii na jejich stanovení. Upozorňuje na četné limity a problémy stanovení volných lehkých řetězců a na jejich možné klinické využití.
The publication contains basic information about free light chains of immunoglobulins. In a short review it shows evaluation methods used in clinical biochemistry for the determination of free light chains of immunoglobulins. Authors summarize methodical limitation of determination of free light chains and discuss their clinical utilization.
Cíl: Ověření základních vlastností analýzy volných lehkých řetězců v séru. Metody: Imunoturbidimetrické stanovení s použitím diagnostické soupravy FreeLite firmy The Binding Site, adaptované na analyzátor Modular Roche. Metoda ELISA, použitá v soupravě firmy BioVendor. Výsledky: Hodnoty stanovené u souboru dárců krve mužů a žen. Index kappa/lambda imunoturbidimetrií 0,53–1,92; metodou ELISA 0,24–1,17. Přesnost měření kappa imunoturbidimetrií 5,6–6,9 %, metodou ELISA 6,6–11,0 %, lambda imunoturbidimetricky 6,1 až 9,2 %, metodou ELISA 7,3–8,6 %. Studovali jsme vliv ředění vzorků na výsledky analýz a potvrdili jsme potřebnost ověřování stupně ředění u každého patologicky změněného vzorku. Regresní analýzou byla určena rovnice y = -9,84 + 1,53 x a korelační koeficient r = 0,73. U imunoturbidimetrie bylo ve sledované populaci nalezeno 58,9 % výsledků hodnocených jako patologických, metodou ELISA 45,5 %. U 4,5 % patologických výsledků byla nalezena neshoda mezi oběma metodami. U výsledků uvnitř referenčního intervalu byly nalezeny neshody u 17,8 % pozorování. Diskuse: Hlavními problémy úspěšného použití stanovení volných lehkých řetězců jsou validita referenčních intervalů, ředění vzorků individuálních pacientů, diference v diagnostické klasifikaci při použití různých metod. Závěr: Stanovení volných lehkých řetězců v séru nelze prozatím považovat za úplně rutinní záležitost, vyžaduje pečlivou přípravu vzorků a analýzu výsledků podmíněnou nadstandardní úrovní odbornosti laboratorního personálu.
Objective: Verification of measurement procedures for serum free light chains analysis. Methods: Immunoturbidimetric measurement with using the FreeLite kit (The Binding Site), adapted on the Modular P (Roche). ELISA method performed by kit BioVendor. Results: The ratio kappa/lambda of blood donors values in men and women was from 0.53 to 1.92 by use FreeLite kit and from 0.24 to 1.17 by ELISA method. We obtained measurement precision as follows: kappa (FreeLite) 5.6–6.9%, 6.6–11.0% (ELISA), lambda 6.1–9.2% by FreeLite and 7.3–8.6% by ELISA kit. We assessed the influence of sample dilution on the results. It is necessary to verify dilution in each pathologically changed sample. Regression analysis is expressed by equation y = -9.84 + 1.53 x and Pearson regression coefficient is r = 0.73. We found 58.9% results obtained with immunoturbidimetry, but only 45.5% of results obtained by ELISA method out off reference limit. Four and a half % of pathologic results showed disagreement frequency in paired results while in results inside reference interval there was a disagreement frequency even 17.8%. Conclusion: It is unsuitable to consider the measurement of free light chains in serum as a routine event. This determination requires careful work and high professional level of laboratory personal.
V předloženém sdělení je podán souhrn informací o nejdůležitějších laboratorních metodách používaných k průkazu a kvantifikaci monoklonálních imunoglobulinů a jejich strukturních komponent v séru a v moči. Nově zavedené automatizované imunochemické metody umožňují s vysokou senzitivitou a specifitou kvantitativní hodnocení hladin volných lehkých řetězců imunoglobulinů v séru (s-VLŘ). Vyšetřování koncentrace VLŘ v séru, poměru kappa/lambda a jejich změn, významně rozšiřují současné spektrum standardních ukazatelů používaných v diagnostice a hodnocení výsledků léčby u jednotlivých typů monoklonálních gamapatií.
There is a presentation of the most important laboratory methods used for the evidence and quantification of monoclonal immunoglobulins and their structure components in serum and urine. The new applicated automated immunochemical methods allow to evaluate with high sensitivity and specificity the quantitative values of free light chains of immunoglobulins in serum (s-FLC). The estimation of s-FLC concentration, ratio kappa/lambda and their changing allows us significantly to extend the current spectrum of regularly used methods in diagnostics and assessment of results of the treatment of individual types of monoclonal gammopathies.
Cílem sdělení je podání souhrnné informace o současném pohledu na význam hodnocení sérových hladin volných lehkých řetězců imunoglobulinu u jednotlivých typů monoklonálních gamapatií z pohledu potřeb klinické praxe. Úvodem jsou zhodnoceny současné technické možnosti a úskalí vyšetřování monoklonálních imunoglobulinů a jejich strukturálních komponent v séru a/nebo v moči. Hlouběji jsou diskutovány metodické a interpretační aspekty nově zavedené automatizované imunochemické metody umožňující s vysokou senzitivitou a specifitou kvantitativní hodnocení hladin volných lehkých řetězců imunoglobulinů v séru (S-VLŘ). Je zdůrazněn významný přínos vyšetřování hladin S-VLŘ a poměru kappa/lambda především pro diagnostiku Bence-Jonesova, nesekretorického a IgD typu mnohočetného myelomu ale i pro průběžné hodnocení charakteru vývoje nemoci, hloubky léčebné odezvy, dosažení stabilní/“plateau“ fáze, časné detekce progrese či relapsu i léčebné rezistence u všech forem a typů mnohočetného myelomu. Pozornost je věnována rovněž i významu vyšetření hladin S-VLŘ v diagnostice a hodnocení výsledků léčby u primární systémové AL-amyloidózy, primární makroglobulinémie i u méně obvyklých typů MG (solitární plazmocytom, B-typ nehodgkinských lymfomů, nemoc z depozice lehkých řetězců), opomenuta nezůstala ani problematika monoklonální gamapatie nejistého významu. Možno konstatovat, že vyšetřování koncentrace VLŘ v séru, kappa/lambda indexu a jejich změn významným způsobem rozšiřuje dosavadní spektrum standardních ukazatelů, používaných v diagnostice a hodnocení výsledků léčby u jednotlivých typů monoklonálních gamapatií.
The study is aimed at current view of significance of evaluation of serum immunoglobulin free light chain levels in different types of monoclonal gammapathies according to clinical practice needs. In the beginning, current technical means and pitfalls of the examination of monoclonal immunoglobulins and their structural components in serum and/or urine were evaluated. Methodical and interpretative aspects of a new established automated immunochemical method are described more deeply. It enables quantitative evaluation of serum free light chains (S-FLC) with high sensitivity and specificity. Significant benefit of the evaluation of both S-FLC levels and kappa/lambda ratio, particularly for the diagnosis of Bence-Jones, non-secretory and IgD multiple myeloma, is emphasized in this paper. It is also important for the continuous evaluation of the progression of the disease, response to treatment, and stable “plateau” achievement, early detection of the progression or relapse of the disease as well as treatment resistance in all types of multiple myeloma. The attention is also paid to the importance of the examination of S-FLC for the diagnosis and evaluation of the treatment of primary systemic AL-amyloidosis, primary macroglobulinaemia as well as less common types of MG (solitary plasmocytoma, B-type non-Hodgkin’s lymphoma, light-chain deposition disease). Issues of monoclonal gammapathy of undetermined significance were also mentioned. It can be claimed that examination of the serum FLC, kappa/lamda ratio and theirs changes significantly extend spectrum of standard parameters using for the diagnosis and evaluation of the outcome of several types of monoclonal gammapaties treatment.
Práce se zabývá vyšetřením volných lehkých řetězců kappa (FKLC) v mozkomíšním moku a v séru u pacientú s roztroušenou sklerózou mozkomféní (RS). Soubor zahrnoval 84 žen (průměrný věk 34,03 ± 10,33 let) a 24 mužů (průměrný věk 33,81 ± 10,61 let). Průměrná doba trvání onemocnění byla u žen 8,04 ± 7,59 let. U mužů 7,59 ± 7,07 let). Kvantitativní stanovení bylo provedeno metodou ELISA, průkaz oligoklonality pomocí izoelektrické fokusace následované afínitním imunoblotingem. Při použití kvocientu FKLC (QfklC = likvorpKLC : sérumFKLc) a indexu FKLC (Qfklc :Qaibumin) byl stanoven podíl intratékálně syntezovaných FKLC. Byly provedeny korelace výsledků FKLC s parametry biochemickými a též s parametry klinickými. Přítomnost FKLC byla zjištěna u 102 ze 110 vyšetřených pacientů, je významná korelace mezi počtem oligoFKLC a pozitivitou oligo-IgG. Vyšetření volných lehkých řetězců kappa lze doporučit ve všech případech klinického podezření na RS, kdy výsledek oligoklonálního IgG bude negativní.
The paper deals with examination of free kappa light chains (FKLC) in the cerebrospinal fluid and serum of patients with multiple sclerosis (MS). The patient group included 84 women (mean age 34.03 ± 10.33 years) and 24 men (mean age 33.81 ± 10.61 years). The average disease duration was 8.04 ± 7.59 years for women and 7.59 ± 7.07 years for men. Quantitative determination was performed with ELISA, proof of oligoclonality with isoelectric focusation followed by immunoblotting. The proportion of intrathecally synthesized FKLS was determined using the FKLC quotient (QFKLC = CSFFKLC / serumFKLC) and FKLC index (QFKLC / Qalbumin). FKLC results were correlated with clinical parameters as well as biochemical ones. The presence of FKLC was detected in 102 of 110 examined cerebrospinal fluid samples, there is a significant correlation between the number of oligo FKLC and positivity of oligo-IgG. Examination of free kappa light chains can be recommended in cases of clinical suspicion for MS, when the oligoclonal IgG examination is negative.
Kvantitativní stanovení volných lehkých řetězců imunoglobulinů (FLC) v séru a jejich poměru ?/? se stává součástí souboru vyšetření při diagnostice a diferenciální diagnostice monoklonálních gamapatii. Patologický poměr ?/? v séru je projevem dysregulace syntézy imunoglobulinů a může být časným laboratorním nálezem u lymfoproliferativního onemocnění. Koncentrace volných lehkých řetězců imunoglobulinů v séru je významně závislá na funkci ledvin, zejména na glomerulární filtraci. Ve sdělení uvádíme změny koncentrací volných lehkých řetězců a poměru ?/? u nemocných se sníženou glomerulární filtrací ve vztahu k velikosti její redukce.
The quantitative measurement of free light chains of immunoglobulins (FLC) in serum and their ?/? ratio have been integrated into the diagnostics of monoclonal gammopathy. The pathological ?/? ratio in serum is a sign of dysregulation of immunoglobulin synthesis and can be an early manifestation of B cell proliferative disorders. The FLC concentrations in serum are dependent significantly on the kidney function, mainly on the glomerular filtration rate (GFR). In our report the changes in concentration of FLCs and the ?/? ratio in patients with reduced GFR are demonstrated in dependence on the degree of GFR reduction.
- MeSH
- chemické techniky analytické * metody přístrojové vybavení MeSH
- imunochemie metody MeSH
- imunoglobuliny - kappa-řetězce analýza MeSH
- imunoglobuliny - lambda-řetězce analýza MeSH
- lehké řetězce imunoglobulinů * analýza krev MeSH
- lidé MeSH
- mnohočetný myelom diagnóza krev MeSH
- monoklonální gamapatie nejasného významu * diagnóza MeSH
- prediktivní hodnota testů MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- srovnávací studie MeSH
Práca sa zaoberá stručným prehľadom markerov používaných v laboratórnej diagnostike sclerosis multiplex. Zamerali sme sa na stanovenie voľných ľahkých reťazcov imunoglobulínov a jeho využitie v procese diagnostiky sclerosis multiplex.
This work gives a brief review of the markers used in the laboratory diagnosis of multiple sclerosis. We focus on the determinationof free light chains of immunoglobulins and its possible application in the process of diagnosis of multiple sclerosis.
