Cíl práce: Noroviry patří do čeledi Caliciviridae. V současnosti jsou tyto viry klasifikovány minimálně do 10 genoskupin. Význam norovirů v České republice není zatím intenzivně sledován. Cílem studie bylo přispět ke znalostem o jejich cirkulaci v naší populaci na základě určení jednotlivých genotypů u pacientů, u kterých byla norovirová infekce diagnostikována rutinním vyšetřením během hospitalizace ve Fakultní nemocnici v Plzni. Materiál a metody: Od června 2017 do března 2020 byla diagnóza norovirové infekce potvrzena u 118 pacientů. Laboratorní vyšetření: Vzorky nativní stolice nemocných s projevy gastroenteritidy byly rutinně zpracovány kvalitativním imunochromatografickým testem RIDAQuick Norovirus (R-Biopharm AG) na stanovení noroviru genoskupiny I a II podle pokynu výrobce. Následně byla provedena molekulárně-biologická analýza vzorků. Ze vzorků stolice byla připravena 10% suspenze v roztoku fosfátového pufru, ze které byla soupravou QIAamp Viral RNA Mini Kit (Qiagen) izolována nukleová kyselina podle návodu výrobce. Dále byla provedena reverzní transkripce a amplifikace (PCR) specifické oblasti genomu norovirů (tzv. region C). PCR produkty o specifické velikosti byly přečištěny pomocí QIAquick PCR Purification Kit (Qiagen) a odeslány na sekvenování (Eurofins Genomics). Získané sekvence byly analyzovány v programu MEGA verze X. Zařazení prokázaných virů do jednotlivých genotypů bylo ověřeno s použitím Norovirus Typing Tool Version 2.0 (https://www.rivm.nl/mpf/typingtool/norovirus/). Výsledky: Během sledovaného období bylo prokázáno 14 různých genotypů, resp. variant z genoskupin GI, GII a GIX (dříve GII.15). Nejčastěji byly potvrzeny infekce vyvolané noroviry (NoV) GII.4 Sydney-2012, které vyvolaly 70,3 % onemocnění. Tato varianta norovirů byla prokázána ve 24 měsících z celkového počtu 34 měsíců sledování. Norovirové infekce se vyskytovaly především v podzimních a zimních měsících (říjen-březen), v tomto období bylo diagnostikováno 68, tj. 57,6 % onemocnění. Norovirová infekce byla potvrzena ve všech věkových skupinách, věk pacientů se pohyboval od 0 do 96 let (medián 8, průměr 27,9 let). Analýza zastoupení nejčastější varianty NoV GII.4 Sydney-2012 potvrdila statisticky významný rozdíl ve výskytu této varianty ve věkové skupině 0-4 let při porovnání se staršími osobami (χ2 = 5,37, P = 0,02). Pacienti s norovirovou infekcí měli bydliště vesměs v okrese Plzeň-město (51 osob). Z anamnézy nemocných vyplynulo, že 35 z nich (29,7 %) mělo v době prvních příznaků dalšího nemocného s příznaky gastroenteritidy v rodině. Závěr: Studie je prvním pokusem o zmapování molekulární epidemiologie norovirů nejen v Plzeňském kraji, ale v celé České republice. I přes relativně nízké počty oficiálně hlášených onemocnění patří nepochybně noroviry i u nás k velmi důležitým původcem gastroenteritid, je proto žádoucí rozšiřovat spektrum našich znalostí o jejich cirkulaci.

Objective: Noroviruses are members of the Caliciviridae family and are currently segregated into at least 10 genogroups. The distribution of these viruses in the Czech Republic has not yet been investigated in detail. A pilot study was performed to contribute to the overall knowledge and understanding of norovirus circulation in the population. Clinical specimens from patients diagnosed with norovirus infection during their hospitalization at the Pilsen University Hospital were genotyped. Material and methods: A total of 118 patients were diagnosed with norovirus infection between July 2017 and March 2020. Stool samples from patients presenting with gastroenteritis were routinely screened by the RIDA®QUICK Norovirus Test (R-Biopharm AG), a rapid chromatographic immunoassay for the qualitative detection of Norovirus genogroups I and II, according to the manufacturer’s instructions. Norovirus positive samples were subsequently analysed by molecular biological methods. Stool suspensions (10%) were prepared with phosphate-buffered saline, and nucleic acid was extracted using the QIAamp Viral RNA kit (Qiagen) according to the manufacturer’s instructions. To investigate the genotype distribution, RT-PCR targeting specific sections of the norovirus genome (region C) was employed, followed by purification of PCR products using the QIAquick PCR Purification Kit (Qiagen) and sequencing (Eurofins Genomics). The sequences obtained were analysed by the MEGA X software, and the results of phylogenetic analyses were confirmed by Norovirus Typing Tool Version 2.0 (https://www.rivm.nl/mpf/typingtool/ norovirus/. Results: During the study period, 14 norovirus genotypes or genogroup variants NoV GI, NoV GII and NoV GIX (previously NoV GII.15) were identified. The major genotype NoV GII.4 Sydney-2012 accounted for a total of 70.3% of norovirus gastroenteritis cases. This norovirus variant was detected in 24 months out of 34 months of the study period. In general, the number of norovirus infections increased during autumn and winter months (October to March) when 68 (57.6%) cases were diagnosed. Although norovirus infection was confirmed in all age categories (age range 0–96 years, median 8, mean 27.9), the statistical analysis revealed a significant difference in the incidence of NoV GII.4 infection between the age group 0–4 years and older patients (χ2 = 3.95, P = 0.047). Many patients (51) were residents of the Pilsen-city district. The case history data showed that 35 of them (29.7%) had another family member who developed symptoms of gastroenteritis at the time of the onset of their infection. Conclusion: The pilot study is the first attempt to map the molecular epidemiology of noroviruses, not only in the Pilsen Region but also in the whole Czech Republic. Despite the relatively low number of officially reported cases, noroviruses are undoubtedly one of the most important causes of gastroenteritis in this country. Further studies are therefore necessary to expand the body of knowledge of their ecology and circulation.

• MeSH
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• epidemiologické modely MeSH
• feces mikrobiologie   MeSH
• gastroenteritida etiologie   mikrobiologie   MeSH
• genotyp MeSH
• infekce viry z čeledi Caliciviridae * epidemiologie   MeSH
• lidé MeSH
• Norovirus izolace a purifikace   MeSH
• pacienti hospitalizovaní MeSH
• Check Tag
• dítě MeSH
• dospělí MeSH
• lidé MeSH

Hepatitis E virus (HEV) is the etiological agent behind hepatitis E infection. Domestic pigs and wild boars are the main animal reservoirs of HEV. Very few papers describe HEV infection in goats and sheep. As the data pertaining to the presence of HEV virus in the milk of small ruminants in Europe are lacking, the aim of this paper was to examine a representative number of milk samples from these animals. The detection of HEV genome (HEV RNA) was performed using reverse transcriptase real-time polymerase chain reaction (RT-qPCR). HEV RNA was found in 2.8% of the examined samples. Positivity ranged from 101 to 103 genome equivalents/mL (GE/mL) with a median of 9.99 × 102 GE/mL. On the basis of these results, the milk of small ruminants could represent a source of HEV infection to consumers.

• MeSH
• hepatitida E veterinární   MeSH
• kozy virologie   MeSH
• mléko virologie   MeSH
• nemoci zvířat diagnóza   virologie   MeSH
• ovce virologie   MeSH
• RNA virová MeSH
• virus hepatitidy E genetika   izolace a purifikace   MeSH
• zvířata MeSH
• Check Tag
• zvířata MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH
• Geografické názvy
• Česká republika MeSH

The induced differentiation of tumor cells into mature phenotypes is a promising strategy in cancer therapy. In this study, the effects of combined treatment with all-trans retinoic acid (ATRA) and lipoxygenase/cyclooxygenase inhibitors were examined in two osteosarcoma cell lines, Saos-2 and OSA-01. Caffeic acid and celecoxib were used as inhibitors of 5-lipoxygenase and of cyclooxygenase-2, respectively. Changes in the cell proliferation, matrix mineralization, and occurrence of differentiation markers were evaluated in treated cell populations at intervals. The results confirmed the capability of caffeic acid to enhance the antiproliferative effect of ATRA in both cell lines. In contrast, celecoxib showed the same effect in Saos-2 cells only. Furthermore, the extension of matrix mineralization was observed after combined treatment with ATRA and celecoxib or caffeic acid. The increased expression of osteogenic differentiation markers was observed in both cell lines after the combined application of ATRA and inhibitors. The obtained results clearly demonstrate the capability of lipoxygenase/cyclooxygenase inhibitors to enhance the antiproliferative and differentiating effect of ATRA in osteosarcoma cells, although some of these effects are specific and depend on the biological features of the respective tumor or cell line.

• MeSH
• antitumorózní látky farmakologie   MeSH
• buněčná diferenciace účinky léků   MeSH
• inhibitory cyklooxygenasy farmakologie   MeSH
• inhibitory lipoxygenas farmakologie   MeSH
• kyseliny kávové farmakologie   MeSH
• lidé MeSH
• nádorové buněčné linie MeSH
• nádory kostí farmakoterapie   patologie   MeSH
• osteosarkom farmakoterapie   patologie   MeSH
• proliferace buněk účinky léků   MeSH
• pyrazoly farmakologie   MeSH
• sulfonamidy farmakologie   MeSH
• tretinoin farmakologie   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH