- MeSH
- biopsie MeSH
- cyklosporin farmakologie MeSH
- fokálně segmentální glomeruloskleróza * patofyziologie terapie MeSH
- lidé MeSH
- myší monoklonální protilátky MeSH
- podocyty cytologie MeSH
- potkani inbrední LEW MeSH
- přežívání štěpu MeSH
- proteinurie diagnóza MeSH
- recidiva MeSH
- renin-angiotensin systém MeSH
- transplantace ledvin * metody MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- zvířata MeSH
Podocyty tvoří zevní vrstvu glomerulární kapilární stěny a rozhodujícím způsobem ovlivňují její permeabilitu pro bílkoviny. Poškození podocytů u glomerulárních nemocí - glomerulonefritid (GN) může být doprovázeno odloučením podocytů, jejich výběžků a fragmentů. ím anti-podocalyxinové monoklonální protilátky jsme stanovovali pomocí průtokové cytometrie všechny elementy derivované od podocytů v moči. Elementy jsme pojmenovali podocalyxin pozitivní elementy (PCX+el). Použití polystyrénových kalibračních kuliček nám umožnilo stanovovat i absolutní počty těchto elementů, ne pouze relativní zastoupení. Na vyšetření byla odebírána ranní moč, ke které se ihned přidával prezervační roztok, čímž jsme získali možnost analyzovat vzorek až s 72hod latencí místo běžné 1hod u čerstvé moči. Celkově jsme vyšetřili 38 pacientů s různě aktivní glomerulonefritidou, 15 v dlouhodobé remisi a 44 zdravých kontrol. Močové hodnoty PCX+el byly signifikantně vyšší u pacientů s aktivní glomerulonefritidou v porovnání s pacienty v dlouhodobé remisi a zdravou kontrolou (aktivní GN 93 ± 100 PCX+el/pl, remise 6,3 ± 32 PCX+el/pl, zdravá kontrola 4,4+2.6/ PCX+el/pl, p < 0,000001). Tato pilotní data ukazují, že tato relativně jednoduchá metoda může být potenciálně laboratorní alternativou k opakované renální biopsii k zjištění a monitoraci aktivity některých typů glomerulárního onemocnění.
Podocytes form an outer aspect of the glomerular capillary wall and play a decisive role in its permeability for macromolecules. Main podocyte surface antigen podocalyxin, a highly electronegative sialoglycoprotein, prevents the podocyte foot processes from collapsing. Podocyte damage in glomerular disease is supposed to be accompanied by podocyte detachment and shed podocytes and their fragments (marked by podocalyxin) may be identified in the urine. Using anti-podocalyxin monoclonal antibody podocalyxin positive elements (PCX+EL) were counted by flow cytometry (FACS) in 38 patients with various types of active glomerulonephritis, 15 patients with chronic glomerulonephritis in long-term remission and 44 healthy controls. Urinary levels of PCX+EL were significantly higher in patients with active glomerulonephritis compared to patients with chronic glomerulonephri - tis in long-term remission (93±100 vs. 6,3±3,2/ μ l of urine, p < 0.000001) and healthy controls (4,4±2,6/ μ l of urine, p < 0.000001 compared to active glomerulonephritis, n.s. compared to chronic glomerulonephritis in long-term remission). These preliminary data suggest the potential of this simple method to monitor the activity of glomerular disease. Further prospective studies of larger cohorts of patients with individual glomerular diseases are clearly warranted.
- MeSH
- angiotensin II genetika imunologie MeSH
- glomerulární bazální membrána fyziologie patofyziologie MeSH
- glomerulonefritida etiologie patofyziologie MeSH
- kapilární permeabilita fyziologie imunologie účinky léků MeSH
- lidé MeSH
- membranózní glomerulonefritida etiologie imunologie patofyziologie MeSH
- nemoci imunitního systému etiologie imunologie patofyziologie MeSH
- podocyty cytologie fyziologie MeSH
- proteinurie genetika imunologie moč MeSH
- receptory vaskulárního endoteliálního růstového faktoru genetika imunologie MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
Podocytes (glomerular visceral epithelial cells) cover the exterior surface of the glomerular capillaries and contribute to the glomerular filtration membrane. Failure of podocyte function is involved in the progression of chronic glomerular disease; accordingly, research interest into podocyte biology is driven by the need for better protection and perhaps recovery of these cells in renal diseases. This review aims at summarizing available techniques for podocyte cell cultures from both the past and present, with special attention to the currently used methods. The establishment of classical primary cultures is based on isolation of glomeruli by differential sieving. Plating of glomeruli onto a collagen surface is followed by an outgrowth of cobblestone-like cells that, after replating, differentiate into arborized, mature podocytes. Currently, the majority of research studies use immortalized podocytic cell lines most often derived from transgenic mice bearing a conditional immortalizing gene. The podocytes can also be collected and cultured from healthy or diseased animal or patient urine. The urinary podocytes obtained from subjects with active glomerulopathies display higher proliferation potential and viability in vitro, perhaps due to disease-induced transdifferentiation. Finally, a list of phenotypic markers useful for identification and characterization of the cultured podocytic elements is provided. Copyright 2007 S. Karger AG, Basel.
