Východiska: Dlaždicobuněčný karcinom ústní dutiny (oral squamous cell carcinoma – OSCC) je jedným z nejběžnějších nádorů ze skupin dlaždicobuněčných karcinomů hlavy a krku. Zvyšující se výskyt karcinomů ústní dutiny a jejich zjištění v pokročilých stadiích je celosvětovým zdravotním problémem. Stále více údajů svědčí o tom, že při růstu a progresi zhoubných nádorů hrají důležitou roli microRNA (miRNAs), zatímco o významu miR-7113-3p and miR-6721-5p v OSCC nejsou k dispozici žádné informace. Tento článek pojednává o zkoumání exprese MAP2K1, miR-7113-3p a miR-6721-5p pro možné biologické funkce při rozvoji dlaždicobuněčného karcinomu ústní dutiny. Materiál a metody: Pomocí kvantitativní polymerázové řetězové reakce v reálném čase jsme stanovili expresi mRNA u MAP2K1, miR-7113-3p a miR-6721-5p v čerstvě zmražených tkáních OSCC a v čerstvě zmražených přilehlých normálních tkáních 30 pacientů a zkoumali jsme jejich vztah ke klinickým parametrům. Výsledky: Exprese MAP2K1 v nádorové tkáni byla oproti normálním tkáním významně vyšší, zatímco exprese miR-7113-3p a miR-6721-5p byla významně nižší. Také byla pozorována statistická korelace p = 0,04 mezi zvýšenou expresí MAP2K1 a perineurální invazí. Navíc jsme zaznamenali, že mezi down-regulací miR-7113-3p a zvýšenou expresí MAP2K1 je pozitivní korelace (p = 0,0218) a mezi down-regulací miR-6721-5p a zvýšenou expresí MAP2K1 je negativní korelace (p = 0,7771). Závěr: Z těchto nálezů vyplývá, že u pacientů s OSCC mohou miR-7113-3p a miR-6721-5p sloužit jako prospektivní biomarkery, které by v budoucnu mohly být využívány k detekci OSCC v časném stadiu. Zvýšená exprese MAP2K1 je spojena s rozvojem OSCC a perineurální invazí.
Background: Oral squamous cell carcinoma (OSCC) is one of the most common cancers in the head and neck squamous cell cancer group. The increasing frequency of oral carcinomas and their late-stage appearance is a major worldwide health concern. MicroRNAs (miRNAs) appear to play an important role in cancer growth and progression, according to growing data, whereas no information is available regarding miR-7113-3p and miR-6721-5p involvement in OSCC. In this article, the expression of MAP2K1, miR-7113-3p, and miR-6721-5p was examined for possible biological functions in the advancement of oral squamous cell carcinoma. Material and methods: We used quantitative real-time PCR (to examine the mRNA expression of MAP2K1, miR-7113-3p, and miR-6721-5p in fresh frozen OSCC tissues and adjacent normal fresh frozen tissues from 30 patients, and we investigated their relationship with clinical parameters. Results: MAP2K1 expression was found to be dramatically increased in tumor tissues than in normal tissues, whereas miR7113-3p and miR-6721-5p expression was significantly decreased. Furthermore, a statistical correlation of P = 0.04 was also observed between increased MAP2K1 expression and perineural invasion. Additionally, we noted that the downregulation of miR-7113-3p appears to correlate positively with overexpression of MAP2K1 (P = 0.0218), and a negative correlation was observed between downregulation of miR-6721-5p and overexpression of MAP2K1 (P = 0.7771). Conclusion: Based on these findings, miR-7113-3p and miR-6721-5p might be prospective biomarkers for OSCC patients, and could be utilized to detect OSCC at an early stage for future diagnosis. MAP2K1 overexpression has been linked to the development of OSCC and perineural invasion.
- Klíčová slova
- miR-7113-3p, miR-6721-5p,
- MeSH
- dlaždicobuněčné karcinomy hlavy a krku * diagnostické zobrazování genetika MeSH
- kvantitativní polymerázová řetězová reakce metody MeSH
- lidé MeSH
- MAP kinasa-kinasa 1 genetika MeSH
- nádorové biomarkery analýza MeSH
- stanovení celkové genové exprese klasifikace metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- klinická studie MeSH
Sledovat ovlivnění či průběh genové exprese je v mnoha studiích velmi důležitou součástí výzkumu. V současné době dochází k rozvoji mnoha metod usnadňujících sledování regulace genové exprese, jedním z takových příkladů je využití tzv. genových reportérových testů (z angl. gene reporter assays). Tyto systémy představují rozsáhlý soubor nástrojů ke studiu regulačních sekvencí promotorů, zesilovačů a transkripčních faktorů. Existuje celá řada testů využívajících reportérové buňky pro stanovení biologické aktivity studovaných sloučenin. Cílem tohoto přehledového článku je představit přípravu reportérových plasmidů, což je vždy prvním krokem u testů využívajících reportérové geny. Následně budou popsány nejčastější druhy reportérových testů a představeny příklady jejich použití v testování in vitro.
Monitoring the influence or process of gene expression is a very important part of research in many studies. Currently, many methods are being developed to facilitate the monitoring of gene expression regulation, the use of gene reporter assays being one of the examples. These systems represent an extensive set of tools to study the regulatory sequences of promoters, enhancers, and transcription factors. There are several assays using reporter cells to determine the biological activity of the compounds studied. The aim of this review article is to present the preparation of reporter plasmids, which is always the first step in assays using reporter genes. Subsequently, the most common types of reporter test are described, and examples of their use in in vitro testing are presented.
