Přesná analýza karyotypu leukemických buněk hraje významnou roli při diagnostice, klasifikaci, stanovení prognózy a monitorování léčby nemocných s leukémiemi. U dětských ALL byla popsána řada specifických chro- mozómových aberací, které mají velký prognostický význam. K nejdůležitějším patří hyperdiploidie s více než 50 chromozómy a t(12;21), které jsou považovány za příznivý prognostický faktor a t(9;22) a přestavby MLL genu, které korelují se špatnou prognózou. Proto je včasná a přesná detekce těchto aberací velmi důležitá. Metody FISH překonávají některá omezení metod konvenční cytogenetiky a molekulární genetiky a díky své citlivosti umožňují detekovat specifické chromozómové aberace v mitózách i v nedělících se interfázních jádrech. K detekci hyperdi- ploidních buněčných klonů a strukturních přestaveb používáme dvoubarevnou fluorescenci s centromerickými, respektive lokus-specifickými sondami. K analýze složitých komplexních přestaveb používáme malovací sondy a mnohobarevnou fluorescenční in situ hybridizaci (mFISH). Během posledních 8 let jsme různými metodami vyšetřili celkem 275 dětí s ALL. Translokaci t(9;22) jsme nalezli u sedmi a přestavby MLL genu u 14 nemocných z tohoto souboru. Detekcí hyperdiploidních buněk a t(12;21) se zabýváme od roku 1988. Buňky s vysokou hyper- diploidií jsme detekovali u 35 pacientů, 10 z nich mělo v karyotypu další komplexní přestavby. Translokaci t(12;21) jsme detekovali u 37 nemocných a komplexní přestavby jsme prokázali u 22 z nich. FISH se spolu s cytogenetikou a molekulární genetikou stala v dnešní době nezbytnou součástí laboratorních vyšetření u dětí s ALL, a to nejen při diagnostice, ale i v průběhu léčby.

Classical cytogenetic analysis plays an important role in the diagnosis, classificat ion, therapy monitoring and prognosis of patients with leukemia. Many recurrent cytogenetic abnormalities with major prognostic values have been described in childhood ALL. Hyperdiploidy and/or t(12;21) are associated with good prognosis, whereas t(9;22) and/or rearrangements of MLL gene correlate with poor outcome and therefore early detection of these abnormalities is very important. FISH can overcome some limitations of conventional cytogenetic and molecular-genetic analyses and due to high sensitivity specific chromosomal aberrations in mitoses and/or interphase nuclei can be detected. In the Center of Oncocytogenetics of the 3rd Medical Department for assesment of hyperdiploidy and structural rearrangements we use double-color FISH with centromeric and/or locus-specific probes and complex aberrations are ascertained by whole chromosome painting probes and multicolor FISH. Among 275 children with ALL examined during the last 8 years by different FISH methods we found seven patients with translocation t(9;22) and 14 patients with MLL rearrangements in bone marrow cells. Since 1988 we focus on detection of hyperdiploidy and/or t(12;21). High hyperdiploidy was found in 35 children, 10 of them had further complex rearrangements. Translocation t(12;21) was proved in 37 patients and complex rearrangements were found in 22 of them. FISH, cytogenetic and molecular-genetic analyses become obligatory for the first diagnostic examination as well as for monitoring of treatment effect in children with ALL.

3 interní klinika 1 LF UK a VFN Praha

FISH at diagnosis of childhood acute lymphoblastic leukemia

Fluorescenční in situ hybridizace (FISH) v diagnostice dětských akutních lymfatických leukémií (ALL) = FISH at diagnosis of childhood acute lymphoblastic leukemia /

FISH at diagnosis of childhood acute lymphoblastic leukemia /

Lit: 31

Souhrn: eng