Prognóza pacientů s chronickou lymfocytární leukemií (CLL) může být upřesněna některými biologickými rizikovými faktory, jejichž stanovení ale musí být před zavedením do klinické praxe dostatečně standardizováno. V této studii se u 73 pacientů stanovoval mutační stav variabilních segmentů genů pro těžký řetězec imunoglobulinu (IgVH), mutace genu p53 a pomocí flow-cytometrie (FCM) exprese CD38 a tyrozinkinázy ZAP-70. Nemutovaný stav IgVH mělo 58 % nemocných, mutaci p53 19 %, pozitivní expresi CD38 26 % a pozitivní expresi ZAP-70 dle FCM 62 %. Pacienti s nemutovaným IgVH, pozitivní expresí ZAP-70 dle FCM a mutací p53, měli statisticky významně kratší čas od diagnózy do zahájení terapie. Celková konkordance mezi expresí ZAP-70 a mutačním stavem IgVH byla 85 %. Validace FCM analýzy exprese ZAP-70 byla provedena srovnáním s imunohistochemickou detekcí ZAP-70 na histologických preparátech a kvantitativní Real-Time PCR na úrovni ZAP-70 mRNA, kdy celková shoda byla 86 %. Exprese ZAP-70 se ukázala být stabilní v průběhu onemocnění; při mediánu 12 měsíců mezi odběrem prvního a posledního vzorku byla zaznamenána kvalitativní změna exprese ZAP-70 pouze u jednoho pacienta, kdy se stala pozitivní při progresi onemocnění.

Individual prognosis in patients with chronic lymphocytic leukemia (CLL) may be specified by biological risk factors, detection of which must however be sufficiently standardized prior to their introduction into clinical practice. In the presented study of 73 patients we have assessed immunoglobulin variable heavy-chain gene (IgVH) status, presence of mutation in p53 gene and with the use of flow cytometry (FCM) expression of CD38 and ZAP-70 tyrosine kinase. Unmutated IgVH status was present in 58 % patients, p53 mutation in 19 %, positive expression of CD38 in 26 % and positive expression of ZAP-70 using FCM in 62 %. Patients with unmutated IgVH, positive expression of ZAP-70 assessed by FCM and p53 mutation had significantly shorter time from diagnosis to initiation of therapy. Overall concordance between ZAP-70 expression and IgVH mutational status was 85 %. Validation of the FCM ZAP-70 detection was performed by comparison to the immunohistochemical analysis on histological sections and quantitative real-time PCR on the mRNA level; overall concordance was 86 %. Expression of ZAP-70 showed to be stable over time; with median time of 12 months from the acquisition of the first sample to the last, qualitative change of ZAP-70 expression was noted in only one patient, who became positive upon disease progression.

Oddělení klinické hematologie 3 LF UK a FNKV Praha

Risk factors in chronic lymphocytic leukemia, validation of flow cytometric detection using RT-PCR and immunohistochemistry

Lit.: 30