Komplex vyvíjejícího se zubu a okolních struktur zahrnuje řadu typů diferencovaných buněk. Ty se často vyskytujíve velmi malých počtech, ale mají velký biologický význam v morfogenezi (např. signální centra sklovinných uzlů). Možnost izolace homogenních vzorků z konkrétních tkáňově vázaných buněčných populací byla dlouhou dobu omezena. Nová technologie systému laserové záchytové mikrodisekce (LCM) zprostředkovává řadu přesných výzkumů na buněčné a subbuněčné úrovni. V posledním desetiletí bylo techniky LCM využito také pro některé studie zaměřené na mechanismy vývoje zubů a související poruchy. Cílem tohoto článkuje stručné shrnutí přístupu LCM, jeho aplikací ve výzkumu odontogeneze i nejaktuálnějších modifikací kombinujících LCM a průtokovou cytometrii pro analýzy jednotlivých buněk na úrovni nukleových kyselin a proteinů.

Complex of developing tooth and surrounding structures comprises several types of differentiated cells. They often occur in very small numbers but with a high biological impact on morphogenesis (e. g. signalling centres of enamel knots). However, isolation of specific homogenous samples from distinct tissue bound cell populations was long time limited. With appearance of novel technologies, the laser capture microdissection (LCM) system mediates many exact investigations at the cellular and subcellular level. In the last decade, the LCM technique has been used also for several studies focused on mechanisms of tooth development and related disorders. This paper aims to briefly review the LCM approach, its application in odontogenesis research, and the most recent modification combining LCM and flow cytometry for single cell analysis at nucleid acid and protein levels.

Laboratoř embryologie živočichů Ústav živočišné fyziologie a genetiky AV ČR v v i Brno

Laser capture microdissection in odontogenesis research

Lit.: 24