Cíl: Záměrem studie bylo vyhodnocení testu 3. generace EIA Borrelia recombinant IgM and IgG (TestLine, Brno, ČR) v séru a mozkomíšním moku (mm) dětí s lymeskou neuroborreliózou (LNB). Metodika: Ke srovnání byly využity 3 testy: celobuněčná EIA z Borrelia garinii (EIA 1) byla srovnána s EIA testem využívajícím rekombinantní antigeny (EIA 2) a imunoblot. Celkem bylo vyšetřeno 364 vzorků sér a mm. V první skupině dětí s LNB bylo vyhodnoceno 86 párových vzorků sér a mm. Druhou skupinu tvořilo 36 dětí s pravděpodobnou LNB. Jako kontroly byly využity vzorky 66 dětí s neuroinfekcí neborreliové etiologie. Výsledky: V první skupině dětí s prokázanou LNB, EIA 2 vykazovala více pozitivních výsledků v séru ve třídě IgG protilátek ((p = 0.006; OR = 7,5), stejně jako v mm (p < 0,001; OR = 4,5). V pozitivních výsledcích ve třídě IgM v séru nebyl statisticky významný rozdíl mezi EIA 1 a EIA 2 (p = 0,54; OR = 0,71). V mm dětí s LNB bylo pomocí EIA 2 stanoveno signifikantně méně pozitivních vzorků ve třídě IgM (p = 0,001; OR = 0,06). Protilátkový index IgG (AI) vyhodnocený oběma metodami vykazoval obdobné výsledky (p = 0,646; OR = 1,38). Obě metody jsou srovnatelné, ale AI IgM stanovené pomocí EIA 2 prokázalo signifikantně méně pozitivních výsledků (p < 0,001; OR = 0,04). Ve skupině dětí s pravděpodobnou LNB a v kontrolní skupině nebyly rozdíly v detekci pozitivních IgM/IgG protilátek v séru a mm statisticky významné. Závěr: EIA 2 vykazovala více pozitivních výsledků než EIA 1 a než imunoblot v detekci pozitivních protilátek v séru a mm. Ve skupině dětí s prokázanou LNB nebyl mezi oběma metodami rozdíl ve výpočtu protilátkového indexu IgG. Po srovnání IgG a IgM protilátkových indexů počítaných z výsledků obou metod byla citlivost EIA 2 pro IgG 68 % a 26 % pro IgM. Pro oba testy je specificita 100 %.

Background: The purpose of the study was to evaluate new 3rd-generation test kits, EIA Borrelia recombinant IgM and IgG (TestLine, Brno, Czech Republic), in serum and cerebrospinal fluid (CSF) of children with Lyme neuroborreliosis. Methods: Comparison of three tests was used: the whole-cell EIA from Borrelia garinii (EIA 1) was compared with the EIA using recombinant antigens (EIA 2) and immunoblot. In total, 364 samples of serum and CSF were examined. Eighty-six paired sera and CSF samples were evaluated in the first group of children with Lyme neuroborreliosis. The second group consisted of 30 children with probable Lyme neuroborreliosis. Sixty-six samples from children with neuroinfections other than borrelial etiology were used as controls. Results: In the first group of children with proven LNB, EIA 2 gave significantly more positive results for IgG in serum (P = 0.006; OR = 7.5) as in CSF (P < 0.001; OR = 4.5). There was no statistically significant difference in the IgM positivity of serum (P = 0.54; OR = 0.71). EIA 2 determined significantly (P = 0.001; OR = 0.06) less positive results of IgM in CSF in the LNB patients. IgG antibody index (AI) assessed by both methods revealed similar results (P = 0.646; OR = 1.38). Both methods are comparable, but IgM AI assessed by EIA 2 showed significantly less positive results (P < 0.001; OR = 0.04). The differences in the detection of positive IgM/IgG antibodies in serum and CSF did not reach statistical significance either in the groups of children with excluded LNB or in controls. Conclusions: EIA 2 showed better results than EIA 1 and western blot for the detection of positive IgG antibodies in serum and CSF. The difference in the calculation of AI IgG by EIA 1 and EIA 2 was not noticeable in the group of LNB patients. Comparing IgG and IgM AIs calculated from both tests, the sensitivity for EIA 2 was 68% for IgG and 26% for IgM. The specificity is 100% for both tests.

Department of Children's Infectious Diseases University Hospital Brno Faculty of Medicine Masaryk University Brno Czech Republic

Department of Clinical Biochemistry University Hospital Brno Department of Laboratory Methods Faculty of Medicine Masaryk University Brno Czech Republic

Department of Clinical Microbiology University Hospital Brno Czech Republic

Zlepšení diagnostického přístupu použitím rekombinantních antigenů v detekci intratekální produkce protilátek IgM/IgG u dětí s lymeskou neuroboreliózou