Cíl studie: Cílem tohoto sdělení je přinést informaci o porovnání stanovení protilátek anti-SARS-CoV-2 dvěma různě postavenými metodami, ECLIA (Roche Diagnostics) a ELISA (Euroimmun). Název a sídlo pracoviště: Oddělení klinické biochemie a Imunologická laboratoř Fakultní Thomayerova nemocnice Praha. Materiál a metody: Vybrali jsme 134 vzorků séra od 90 pacientů, zaměstnanců Fakultní Thomayerova nemocnice a dárců rekonvalescentní plazmy (33 PCR-negativních a 57 PCR-pozitivních) s různým odstupem od začátku klinických symptomů (1–136 dní). Vyšetřili jsme protilátky anti-SARS-CoV-2 simultánně metodou ELISA ve třídě IgG a IgA a (DSX) a ECLIA (Cobas e602) a výsledky statisticky zpracovali. Měřením kontrolních materiálů, pozitivních a negativních poolů jsme vyhodnotili vybrané analytické charakteristiky. Výsledky: Zjistili jsme vysokou míru shody mezi ELISA a ECLIA. Specificita i senzitivita byla velmi vysoká u obou testů, senzitivita narůstala s odstupem od začátku symptomů s maximem po více než 20 dnech. U ECLIA lze senzitivitu ještě zvýšit aplikací optimalizovaného cut-off. Ve vysoké míře přetrvávaly protilátky ještě po 60 dnech od začátku symptomů, především ve třídě IgG. Mezilehlá preciznost a opakovatelnost klinickým účelům vyhovovaly. Závěr: Obě metody jsou velmi dobře využitelné pro sledování stavu protilátkové odpovědi na infekci SARS-CoV-2. Pro každodenní rutinu a potřebný rychlý screening je vhodnější ECLIA metoda využívající vysoce imunogenní nukleokapsidový antigen, která zachytí vysoce afinitní protilátky všech tříd. Ke konfirmaci a následnému rozlišení jednotlivých imunoglobulinových tříd je pak možné využít ELISA testy s konzervativním spike proteinem.

Objective: The aim of this study is to provide information on the comparison of the determination anti-SARS-CoV-2 antibodies by two differently designed assays, ECLIA (Roche Diagnostics) and ELISA (Euroimmun). Settings: Department of Clinical Biochemistry and Immunology Laboratory, Thomayer University Hospital Materials and Methods: We selected 134 serum samples from 90 patients, Thomayer Hospital staff, and convalescent plasma donors (33 PCR-negative and 57 PCR-positive) at various intervals from the onset of clinical symptoms (1-136 days). We examined anti-SARS-CoV-2 antibodies simultaneously by ELISA in the IgG and IgA classes (DSX) and ECLIA (Cobas e602) and statistically processed the results. By measuring control materials, positive and negative pools we evaluated selected analytical characteristics. Results: We found a high degree of agreement between ELISA and ECLIA. Specificity and sensitivity were very high in both tests, the sensitivity increasing with the distance from the beginning of the symptoms with a maximum of more than 20 days. For ECLIA, the sensitivity may be further increased by application an optimized cut-off. Antibodies persisted to a high degree after 60 days from the onset of symptoms, especially in the IgG class. Intermediate precision and repeatability suited clinical purposes. Conclusion: Both methods are very useful serological monitoring of the antibody response status to SARS-CoV-2 infection. ECLIA method using a highly immunogenic nucleocapsid antigen that captures high affinity antibodies of all classes is preferable for daily routine and the rapid screening. ELISA tests with a conservative spike protein can then be used to confirm and distinguish individual immunoglobulin classes.

Imunologická laboratoř Fakultní Thomayerova nemocnice Praha

Oddělení klinické biochemie Fakultní Thomayerova nemocnice Praha

Measurement of anti-SARS-CoV-2 antibodies nucleocapsid versus spike, ECLIA versus ELISA