In situ fluorescence visualization of bromouridine incorporated into newly transcribed nucleolar RNA
Jazyk angličtina Země Německo Médium print
Typ dokumentu časopisecké články, práce podpořená grantem
PubMed
10726161
DOI
10.1078/0065-1281-00535
Knihovny.cz E-zdroje
- MeSH
- bromouracil analogy a deriváty MeSH
- buněčné jadérko metabolismus MeSH
- fibroblasty cytologie metabolismus MeSH
- fluorescenční protilátková technika nepřímá MeSH
- genetická transkripce * MeSH
- HeLa buňky cytologie metabolismus MeSH
- hybridizace in situ fluorescenční MeSH
- kultivované buňky MeSH
- ledviny cytologie metabolismus MeSH
- lidé MeSH
- organizátor jadérka metabolismus MeSH
- psi MeSH
- RNA ribozomální biosyntéza MeSH
- RNA-polymerasa I metabolismus MeSH
- uridin analogy a deriváty metabolismus MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- psi MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Názvy látek
- 5-bromouridine MeSH Prohlížeč
- bromouracil MeSH
- RNA ribozomální MeSH
- RNA-polymerasa I MeSH
- uridin MeSH
Bromouridine-triphosphate is commonly used for in situ immunocytochemical labeling of newly synthesized RNA in living cells. While extranucleolar transcripts do not require special conditions for visualization, special treatment prior to fixation (e.g. incubation with alpha-amanitine) is necessary for immunofluorescence detection of bromouridine-labeled nucleolar RNA in previous studies. We show in the present investigation that bromouridine-triphosphate is efficiently used by both extranucleolar and nucleolar RNA polymerases in living cultured cells. The failure to detect incorporated bromouridine within nucleoli is entirely due to improper treatment of cells after bromouridine incorporation. When methanol/acetone fixation is used, fluorescence signals within nucleoli can be routinely found.
Citace poskytuje Crossref.org
NORs and their transcription competence during the cell cycle
