Analysis of chemokine gene expression in lung cells by polymerase chain reaction
Jazyk angličtina Země Česko Médium print
Typ dokumentu časopisecké články, práce podpořená grantem
PubMed
10743742
Knihovny.cz E-zdroje
- MeSH
- bronchoalveolární lavážní tekutina cytologie MeSH
- chemokiny genetika MeSH
- genetická transkripce * MeSH
- lidé MeSH
- messenger RNA analýza genetika MeSH
- plíce metabolismus MeSH
- polymerázová řetězová reakce s reverzní transkripcí metody MeSH
- Check Tag
- lidé MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- Názvy látek
- chemokiny MeSH
- messenger RNA MeSH
The article describes a polymerase chain reaction (PCR) based method for semiquantitative assessment of mRNA expression for chemotactic cytokines in the lower respiratory tract cells. Cytokine mRNA was detected using PCR preceded by reverse transcription of mRNA into cDNA. The procedures of RNA extraction and of reverse transcription-PCR assay are described in the first part of the article. The second part demonstrates optimalisation experiments performed to ensure specificity, accuracy and reproducibility of the RT-PCR assay and discuss the approach to mRNA quantification using normalisation of cytokine mRNA expression to the expression of beta-actin mRNA.
