Voľná cirkulujúca nádorová DNA (circulating tumour DNA – ctDNA) je typ extracelulárnej voľnej DNA (circulating cell-free DNA – cfDNA) uvoľňovaná do krvi pacientov s onkologickým ochorením apoptózou a nekrózou nádorových buniek. Predstavuje alternatívny biomarker, ktorého kvalitatívna i kvantitatívna analýza môže, doplňujúc zobrazovacie vyšetrenie, spresniť hodnotenie liečebnej odpovede u pacientov s Hodgkinovým lymfómom. Ako dynamický parameter by si svoje uplatnenie mohla nájsť pri upresňovaní diagnózy, v skríningu mutácií a pri vstupnej stratifikácii pacienta podľa rizika, v priebehu liečby a po jej ukončení pri hodnotení jej účinnosti aj v ďalšom sledovaní za účelom včasnej predikcie prípadného relapsu.

Circulating tumour DNA (ctDNA) is a type of extracellular circulating cell-free DNA (ccfDNA, cfDNA) released into the blood of cancer patients by apoptosis and necrosis of tumour cells. It represents an alternative biomarker for the qualitative and quantitative analysis that may together with PET/CT imaging refine the assessment of treatment response in patients with Hodgkin lymphoma. As a dynamic parameter, it could be applied for refining diagnosis, initial screening for mutations and patient risk stratification. During treatment and at its the end, it could be used to evaluate treatment efficacy and may also be useful for further monitoring and relapse prediction.

• MeSH
• cirkulující nádorová DNA * analýza   MeSH
• Hodgkinova nemoc * diagnóza   terapie   MeSH
• lidé MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• tekutá biopsie metody   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• přehledy MeSH

Úvod: Kolorektální karcinom (KRK) je celosvětově třetím nejčastějším zhoubným onemocněním. Stadium onemocnění v době diagnózy a záchyt časné rekurence mají přímý vliv na přežívání pacientů. Stávající kontrolní vyšetřovací metody často neodrážejí průběh metastazujícího onemocnění v reálném čase. U pacientů s detekovatelnou cirkulující nádorovou DNA (ctDNA) může být tento marker účinným monitorujícím nástrojem. Kazuistika: V roce 2012 jsme na našem pracovišti provedli resekci sigmatu u 57letého pacienta pro pokročilý karcinom. V rámci pravidelných dispenzárních kontrol pacient podstupoval zobrazovací vyšetření, odběry krve na CA 19-9 a CEA, endoskopii. Zároveň jsme odebírali vzorek periferní krve ke stanovení hladiny ctDNA. Její hodnota po celou dobu odpovídala vývoji nemoci. Dvakrát předstihla v diagnostice zobrazovací metody. CEA vykazoval určitou míru nespolehlivosti, zejména po delší době trvání nemoci. CA 19-9 byl po celou dobu v rozmezí normálních hodnot. Závěr: ctDNA je účinným nástrojem v diagnostice rekurence metastazujícího KRK. U pacientů s detekovatelnou ctDNA její hladina koreluje s přítomností nádorové masy v reálném čase. Má prediktivní význam při sledování odpovědi na léčbu. Její implementace do sledování pacientů s KRK může mít vliv na volbu léčebné strategie a přežívání pacientů.

Introduction: Colorectal cancer (CRC) is the third most common malignant disease worldwide. The stage of the disease at the time of diagnosis and the capture of an early recurrence have a direct impact on long-term survival. Existing control screening methods often do not reflect real-time metastatic disease. In patients with detectable circulating tumor DNA (ctDNA), liquid biopsy can be an effective monitoring tool.Case report: In 2012, we performed sigmoid resection in a 57 years old patient for advanced CRC. The follow-up assessments included: blood samples for CA 19-9 and CEA, endoscopy and imaging methods. We also sampled peripheral blood to determine the level of ctDNA. Its value corresponded to the development of the disease throughout the period. Twice it outperformed imaging methods. CEA showed some degree of unreliability, especially after prolonged illness. CA 19-9 was in the normal range at all times. Conclusion: Circulating tumor DNA is an effective tool in the diagnosis of recurrent metastatic CRC. In patients with detectable ctDNA, its level correlates with the tumoral mass in real time. It has a predictive value in monitoring the treatment response. Its implementation in the follow-up of patients with CRC may have an impact on the choice of treatment strategy and consequently on patient survival.

• MeSH
• cirkulující nádorová DNA * krev   MeSH
• kolorektální nádory * chirurgie   diagnóza   MeSH
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• metastázy nádorů diagnóza   terapie   MeSH
• nádorové biomarkery analýza   MeSH
• protokoly protinádorové léčby MeSH
• Check Tag
• lidé středního věku MeSH
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• kazuistiky MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Úvod: Nemocní s pokročilými stadii zhoubných novotvarů mívají často zvýšené hladiny cirkulující volné DNA (cell-free DNA, cfDNA) v periferní krvi. Část cfDNA pocházející z tumoru představuje zdroj materiálu pro molekulární profilaci tumoru především za účelem predikce léčebné odpovědi biologické cílené léčby. Ve skupině nemocných s pokročilým NSCLC jsme s využitím detekce nádorově-specifických mutací sledovali výskyt nádorové složky cfDNA a v ní následně prováděli metylační vyšetření zaměřená na panel 30ti genů. Metodika: V souboru 107 NSCLC pacientů jsme v tumorózní tkáni vyšetřovali přítomnost somatické mutace EGFR nebo KRAS. U pacientů s nalezenou mutací byla vyšetřena přítomnost dané mutace v cfDNA získané z plazmy. U pozitivních vzorků bylo provedeno vyšetření DNA metylace v cfDNA. Výsledky: Z celkového počtu 107 pacientů ve studii byla některá z mutací EGFR nebo KRAS nalezena u 26 pacientů (14 x EGFR, 12 x KRAS). Z tohoto počtu byla přítomnost tumorové cfDNA detekována v plazmě 8 pacientů, u kterých bylo následně provedeno metylační vyšetření. U 7 cfDNA-pozitivních pacientů (7/8, 87 %) byla potvrzena shoda metylace v tumoru i v cfDNA u minimálně 3 ze sledované sady genů. Závěr: Přítomnosti cfDNA v plazmě pacientů s pokročilým NSCLC může být využita pro profilování primárního tumoru, a to jak pro neinvazivní vyšetřování genových mutací, tak i pro vyšetřování metylačních nádorových aberací majících význam pro biologické chování nemalobuněčného karcinomu.

Introduction: Patients in advanced stages of cancer often display elevated levels of circulating cell-free DNA (cfDNA) in peripheral blood. The part of cfDNA originating from a tumor represents a viable source of material for molecular profiling of the tumor, mainly in order to predict the biological response of targeted therapy. In a group of patients with advanced NSCLC, the frequency of tumor cfDNA was assessed by detecting tumor-specific gene mutations. The tumor cfDNA was subsequently subjected to methylation analysis using a panel of 30 genes. Methods: In a group of 107 NSCLC patients, primary tumor tissue was evaluated for the presence of somatic mutations in EGFR and KRAS genes. In mutation-positive patients, the presence of a particular mutation in cfDNA obtsdned from plasma was studied. The positive samples were subjected to analysis of DNA methylation in cfDNA. Results: Either of the EGFR or KRAS mutations was found in 26 out of the 107 patients (EGFR 14 x, KRAS 12 x). Of those, eight were found to have tumor cfDNA present in plasma. Subsequently, they underwent methylation tests. In 7 of these cfDNA-positive patients (87 %), methylation was found in both tumor and cfDNA in at least 3 of the observed set of genes. Conclusion: The presence cfDNA in plasma of patients with advanced NSCLC may be used for primary tumor protiling, for both non-invasive investigation of gene mutations and investigation of tumor methylation aberrations of relevance for the biological behaviour of non-small cell lung carcinoma.

• Klíčová slova
• mutace EGFR, mutace KRAS, cirkulující volná DNA, nemalobuněčný karcinom,
• MeSH
• biologická terapie metody   využití   MeSH
• financování organizované MeSH
• geny erbB-1 genetika   MeSH
• geny ras genetika   MeSH
• lidé MeSH
• metylace DNA genetika   MeSH
• mutace genetika   MeSH
• nádorové cirkulující buňky MeSH
• nemalobuněčný karcinom plic genetika   krev   MeSH
• statistika jako téma MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• ženské pohlaví MeSH

Pancreatic ductal adenocarcinoma represents a disease with increasing incidence. Its prognosis is the worst among all malignancies despite the aggressive combined multimodal treatment across all stages. In metastatic disease, median survival is approximatelly one year. The mainstay of treatment is chemotherapy (neo/adjuvant, palliative) and in selected subgroups of patients even radiotherapy. Nevertheless, nowadays there are very few prognostic and/or predictive biomarkers available that can be used to identify and better stratify patients based on risk to tailored treatment. Potentially, promising areas of research are circulating tumor cells and circulating tumor DNA, which can be easily obtained from peripheral blood - so called liquid biopsy. They may serve as a tool to assess response to applied treatment, and to detect the emergence of treatment-resistant clones or early disease relapse. Moreover, their study may allow identification of potentially tumor-specific alterations, which may serve as target structures for targeted (tailored) therapy. Alternatively, different prognostic indexes/scores calculated by analysis of selected parameters of blood and/or biochemistry can be used to better stratify patients based on risk and better predict prognosis. The aim of this mini-review is to provide a basic overview of the current state of the art in this area and its potential significance for clinical practice.

• MeSH
• cirkulující nádorová DNA * genetika   MeSH
• duktální karcinom pankreatu * diagnóza   genetika   terapie   MeSH
• lidé MeSH
• lokální recidiva nádoru MeSH
• nádorové biomarkery genetika   MeSH
• nádorové cirkulující buňky * MeSH
• nádory slinivky břišní * diagnóza   genetika   terapie   MeSH
• prognóza MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• přehledy MeSH

Východiska: Maligní lymfomy představují vysoce heterogenní skupinu nádorů s rozmanitým klinickým chováním – od indolentních až po velmi agresivní formy s přežitím v rámci měsíců. Tato onemocnění jsou od počátku považována za systémová, často se vyskytující na několika místech současně. Nicméně diagnóza a přesná klasifikace obvykle probíhá z biopsie jediné patologické uzliny či infiltrátu. Klinické zkušenosti přitom ukazují, že biologické chování lymfomu nemusí být v různých jeho lokalizacích zcela shodné. Ve snaze vyřešit tento problém, ale také zlepšit diagnostiku z obtížně dostupných kompartmentů, je poslední dobou intenzivně zkoumána tzv. volná cirkulující DNA (cfDNA), jejíž součástí je také DNA uvolněná z nádorových buněk – cirkulující nádorová DNA (ctDNA). Tuto DNA lze snadno získat z tekutých biopsií, jako je krev, případně jiné tělní tekutiny. Cíl: Tento článek shrnuje dosavadní poznatky o cfDNA a ctDNA, zejména pak právě v kontextu maligních lymfomů, a nastiňuje potenciální směry jejího budoucího praktického využití. Závěr: Detekce a analýza ctDNA představuje novou modalitu, která může v budoucnu vést ke zkvalitnění všech fází léčby maligních lymfomů od diagnostiky až po sledování tzv. minimální zbytkové choroby.

Background: Malignant lymphomas represent a highly heterogeneous group of tumors with varied clinical behavior – from indolent to very aggressive forms with survival in the order of months. From the very beginning, these diseases are considered systemic, often occurring in several anatomical locations simultaneously. However, diagnosis and exact classification are usually inferred from a biopsy of a single pathological lymph node or infiltrate, even though clinical experience shows that the biological behavior of lymphoma is not necessarily identical across anatomical locations. In an effort to address this issue as well as the problem of biopsy of not easily accessible compartments, circulating free DNA (cfDNA), which contains circulating tumor DNA (ctDNA) released from dead tumor cells, has been extensively studied in recent years. This DNA is easily accessible from liquid biopsies such as blood or other patient‘s bodily fluids. Purpose: This article summarizes current scientific knowledge on cfDNA and ctDNA, particularly in the context of malignant lymphoma, and foreshadows its potential future uses. Conclusion: Detection and analysis of cfDNA represents a new approach that can lead to future improvements in all phases of lymphoma treatment from diagnostics to minimal residual disease monitoring.

• MeSH
• cirkulující nádorová DNA analýza   MeSH
• difúzní velkobuněčný B-lymfom diagnóza   genetika   MeSH
• lidé MeSH
• lymfom diagnóza   genetika   klasifikace   MeSH
• progrese nemoci MeSH
• reziduální nádor diagnóza   genetika   MeSH
• tekutá biopsie metody   MeSH
• volné cirkulující nukleové kyseliny * analýza   MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

Úvod: Mutační analýza genu pro receptor epidermálního růstového faktoru (epidermal growth factor receptor - EGFR) z nádorové tkáně je v současnosti standardním testem u pacientů s nemalobuněčným karcinomem plic. Molekulární testování cirkulující nádorové DNA (circulating tumor DNA - ctDNA) z plazmy se ukazuje být spolehlivou alternativou detekce mutací v případech, kdy není možné získat bioptický či cytologický vzorek z nádoru či je třeba monitorovat léčebnou odpověď pomocí opakovaných vyšetření. Navíc dle recentních prací ctDNA lépe odráží heterogenitu nádorového procesu než odběr z izolované nádorové léze či metastázy. Za účelem zhodnocení analytické kvality testování mutací v genu EGFR z ctDNA izolované z plazmy bylo zorganizováno mezilaboratorní porovnání v rámci referenčních laboratoří prediktivní diagnostiky v České republice. Materiál a metody: Celkem 7 laboratořím bylo zasláno 13 komerčně dostupných referenčních vzorků 2 ml plazmy obsahující nejčastější senzitivní mutace genu EGFR (delece v exonu 19, L858R) a rezistentní mutaci T790M s frekvencí mutací 5; 0,5 a 0,05 %. Jeden vyšetřovaný vzorek obsahoval nemutovanou DNA. Vzorky byly analyzovány metodami standardně využívanými v diagnostické praxi. V 6 ze 7 laboratoří byl použit cobas® EGFR Mutation Test v2, v 1 laboratoři Super-ARMS® EGFR Mutation Detection Kit. Výsledky: Určeno bylo 91 genotypů s celkovou chybovostí 24,2 % (22/91). Na 0,5% a vyšší úrovni mutační frekvence činila celková chybovost 3,2 % (2/63), na 5% úrovni 0 % (0/35). Nebyly detekovány žádné falešně pozitivní výsledky. Platforma cobas® dosáhla konzistentně úspěšné detekce na hladině 0,05 % pro deleci v exonu 19. Pro mutace L858R a T790M byl práh detekce nad hodnotou 0,5 %. Závěr: Naše výsledky poukazují na limitovanou citlivost vyšetření mutací EGFR z plazmy, a to zejména mutace T790M. Obzvláště pro vyšetřování ctDNA z plazmy, jejíž frakce může být velice nízká (až 0,01 %), je nutné klást důraz na používání vysoce senzitivních molekulárních metod. Výsledky tohoto porovnání kvality potvrzují nutnost pokusu o rebiopsii u pacientů s negativním výsledkem, neboť oproti vyšetření solidního vzorku tkáně stoupá podíl falešně negativních případů.

Background: Detection of EGFR mutations in tumor tissue represents a standard testing procedure in patients with non-small cell lung cancer. Molecular testing of circulating tumor DNA (ctDNA) in plasma enables detection of mutations in cases where tumor specimens are unavailable or when monitoring of therapeutic responses is necessary. In addition, according to the recent literature, ctDNA better reflects the heterogeneity of the neoplastic cell population than isolated tumor lesion or metastasis. We report a national interlaboratory evaluation aimed at assessing the analytical quality of ctDNA EGFR testing in plasma across seven reference laboratories in the Czech Republic. Material and methods: Aliquots of 13 plasma samples were sent to 7 laboratories and consisted of commercially available 2 ml plasma specimens of genomic DNA with mutant allelic frequencies of 5, 0.5, 0.05, and 0% of the most common sensitizing mutations (deletion in exon 19, L858R) and the resistance mutation T790M. DNA extraction and EGFR testing were performed according to standard procedures. In 6/7 laboratories the cobas® EGFR Mutation Test v2 was used. One laboratory employed the Super-ARMS® EGFR Mutation Detection Kit. Results: In total, 91 genotypes were determined with an overall error rate of 24.2% (22/91). The overall error rates were 3.2% (2/63) for the 0.5% mutation frequency and 0% for the 5% mutation frequency (0/35), respectively. No false positive results were reported. The cobas® method achieved consistent results with the 0.05% mutation frequency for the exon 19 deletion. For L858R and T790M mutations, the threshold was above the 0.5% frequency. Conclusions: The results show that EGFR testing for ctDNA in plasma has limited sensitivity, especially for detection of the T790M mutation. Particularly, in ctDNA testing of very low mutated DNA plasma fractions (below 0.01%), emphasis should be placed on the use of highly sensitive molecular methods. The outcomes of this quality assessment confirm the need for rebiopsy in patients with negative plasma results because of a higher false negative rate in comparison to tissue testing.

• MeSH
• biopsie metody   MeSH
• cirkulující nádorová DNA analýza   MeSH
• erbB receptory * analýza   MeSH
• lidé MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nemalobuněčný karcinom plic * diagnóza   krev   MeSH
• reprodukovatelnost výsledků MeSH
• testování odbornosti laboratoří MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH

Somatic mutations of genes involved in NF-κB, PI3K/AKT, NOTCH, and JAK/STAT signaling pathways play an important role in the pathogenesis of Hodgkin lymphoma (HL). HL tumor cells form only about 5% of the tumor mass; however, it was shown that HL tumor-derived DNA could be detected in the bloodstream. This circulating tumor DNA (ctDNA) reflects the genetic profile of HL tumor cells and can be used for qualitative and quantitative analysis of tumor-specific somatic DNA mutations within the concept of liquid biopsy. Overall, the most frequently mutated gene in HL is STAT6; however, the exact spectrum of mutations differs between individual HL histological subtypes. Importantly, reduction of ctDNA plasma levels after initial treatment is highly correlated with prognosis. Therefore, ctDNA shows great promise as a novel tool for non-invasive tumor genome analysis for biomarker driven therapy as well as for superior minimal residual disease monitoring and treatment resistance detection. Here, we summarize the recent advancements of ctDNA analysis in HL with focus on ctDNA detection methodologies, genetic profiling of HL and its clonal evolution, and the emerging prognostic value of ctDNA.

• MeSH
• cirkulující nádorová DNA * genetika   MeSH
• DNA nádorová genetika   MeSH
• fosfatidylinositol-3-kinasy MeSH
• Hodgkinova nemoc * diagnóza   genetika   MeSH
• lidé MeSH
• mutace MeSH
• nádorové biomarkery genetika   MeSH
• NF-kappa B MeSH
• protoonkogenní proteiny c-akt MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• přehledy MeSH

Volná cirkulující DNA (cf‑DNA) je charakterizována jako extracelulární DNA, která může být přítomna v nízkých koncentracích v krvi zdravých jedinců. Cf‑DNA je do krevního řečiště uvolňována apoptózou, ale i nekrózou. Zvýšené hladiny se vyskytují u patologických stavů, jako je zánět, stres či autoimunitní onemocnění. Výrazně zvýšené hodnoty cf‑DNA jsou patrné zejména u pacientů s malignitami, a to především v pokročilých stadiích nemoci. V takovémto případě je nádorově specifická cf‑DNA uvolňována nekrózou z buněk primárního nádoru a metastáz. V poslední době se hodně studií zabývá tzv. liquid biopsy (tekutou biopsií), která umožňuje poměrně snadnou detekci cirkulujících nádorových buněk i cirkulujících molekul nukleových kyselin z periferní krve k diagnostice nádorových onemocnění. Kvantitativní stanovení a detekce genetických a epigenetických změn v cf‑DNA u pacientů s různými malignitami má potenciální využití v molekulární diagnostice, prognóze, monitorování průběhu nemoci a odpovědi na léčbu. Tento článek je zaměřen na potenciální využití cf‑DNA jako krevního biomarkeru u vybraných solidních nádorů a hematologických malignit.

Circulating cell‑free DNA (cf‑DNA) is characterized as extracellular DNA that may be present in the blood of healthy individuals in low concentrations. Cf‑DNA is released by apoptosis or necrosis into the bloodstream. Increased levels are found in pathological conditions, such as inflammation, autoimmune diseases, or stress. Significant increase of cf‑DNA is particularly evident in patients with malignancies, especially in the advanced stages of the disease. In this case, the tumor specific cf‑DNA is released by necrosis from the cells of primary tumor and metastases. Recently, many studies concentrate on the so‑called ‘liquid biopsies’ that allow detection of circulating tumor cells and circulating nucleic acids from peripheral blood for tumor diagnostics. Quantitative methods and detection of genetic and epigenetic alternations of cf‑DNA in patients with different malignancies have potential applications in molecular diagnosis, prognosis, monitoring of disease progression and response to treatment. This review focuses on potential utility of cf‑DNA as a blood biomarker in selected solid tumors and hematologic malignancies. Key words: circulating cell‑free DNA – tumor marker – solid tumors – hematological malignancies This study was supported by grant of Internal Grant Agency of the Czech Ministry of Health NT14575. The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 13. 3. 2015 Accepted: 18. 5. 2015

• MeSH
• biopsie metody   MeSH
• DNA * diagnostické užití   genetika   krev   MeSH
• hematologické nádory genetika   krev   MeSH
• kolorektální nádory krev   MeSH
• lidé MeSH
• metylace DNA MeSH
• mutace MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• nádory plic genetika   krev   MeSH
• nádory prsu genetika   krev   MeSH
• nádory * genetika   krev   MeSH
• senzitivita a specificita MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH

BACKGROUND: Testicular germ cell tumors (TGCT) are unique malignancies of young adult men; their biology is, however, underexplored and there has not been much progress in their treatment for decades. Circulating free tumor DNA (cfDNA) analysis represents a promising way of discovering novel diagnostic and treatment options. OBJECTIVE: The study evaluates the clinical value of cfDNA detection in TGCT patients. DESIGN AND METHODS: Total cfDNA concentration and ratio of its 2 main fragments (180 and 360 bp) were evaluated by spectrophotometry, capillary electrophoresis and qPCR in peripheral blood plasma of 96 TGCT patients (173 samples) and 31 normal controls. Non-parametric tests were used for statistical analyses. RESULTS: The total cfDNA concentration was significantly higher in TGCT than in controls (P < 0.0001), with the highest levels at disease progression, but with no clear threshold between malignant and normal samples. Patients with positive tumor markers had higher cfDNA concentrations than those with negative markers (P = 0.01). Longer 360 bp cfDNA fragments were found in 58% of TGCT patients including almost all samples from relapse or disease progression but no normal controls (P < 0.0001). CONCLUSION: Total cfDNA levels are significantly increased in TGCT patients but without a clear threshold separating normal and tumor samples, thus total cfDNA amount itself is not a sensitive enough marker to identify or monitor TGCT. Longer cfDNA fragments have been found exclusively in a proportion of tumors and predominantly at disease progression, representing a novel potential marker for TGCT monitoring that would deserve further exploration.

• MeSH
• cirkulující nádorová DNA * MeSH
• germinální a embryonální nádory * MeSH
• lidé MeSH
• mladý dospělý MeSH
• nádorové biomarkery MeSH
• progrese nemoci MeSH
• testikulární nádory * MeSH
• volné cirkulující nukleové kyseliny * MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• mladý dospělý MeSH
• mužské pohlaví MeSH
• Publikační typ
• časopisecké články MeSH
• práce podpořená grantem MeSH

Nalezení dostatečně citlivé metody pro detekci a monitorování onkologických onemocnění, která by zároveň nepředstavovala zbytečnou zátěž pro pacienta, je dlouholetou výzvou v nádorové diagnostice. Ideálním cílem jsou neinvazivní biomarkery – biologické molekuly, které by bylo možné detekovat z krve, a které by podaly co nejpřesnější obraz o stavu a vývoji onemocnění. V podstatě všechny typy nádorových buněk obsahují somatické mutace, které jim umožňují neregulovaně růst a vyvíjet se. Tyto mutace jsou přítomny pouze v DNA nádorových buněk a představují tedy vhodný biomarker. Genotypizace nádorových tkání se stává v klinické onkologii běžným postupem, má však své limity. Biopsie tkáně podává informaci jen o velmi malé lokalitě nádoru v konkrétním čase odběru a v některých případech je obtížné nebo téměř nemožné vzorek vůbec odebrat. Navíc, jako každá invazivní metoda, představuje zátěž pro pacienty. Řešením by se mohla stát analýza cirkulující nádorové DNA odebrané přímo z krve – tzv. tekuté biopsie. Umírající nádorové buňky uvolňují fragmenty své DNA do krevního oběhu, odkud mohou být izolovány, a díky novým citlivým a přesným metodám podrobeny analýze genomových změn. Tyto změny se navíc v čase vyvíjejí, protože nádorové onemocnění je charakterizováno postupnou evolucí a schopností selektovat nové mutace přinášející růstové výhody či rezistenci k aplikované léčbě. Nezachycení těchto změn je přitom častou příčinou neúspěchu léčby. Současné technologické pokroky v detekci a charakterizaci cirkulující nádorové DNA by mohly umožnit monitorování vývoje nádoru v reálném čase a stát se vodítkem pro včasné a přesné rozhodnutí o nejvhodnější léčbě.

Pursuing sensitive methods for detection and monitoring of oncologic diseases, that would limit the stress for patients, represents a long‑standing challenge in cancer diagnostics. As an ideal non‑invasive bio­markers may be considered‑ bio­logical molecules that can be detected in blood and that provide most relevant picture about the state and development of disease. In fact, all types of cancer cells carry somatic mutations that enable the cells to escape from regulation and to grow and progress. These mutations are only present in the DNA of tumor cells and thus are hallmarks of cancer cells. Genotyping of tumor tissues becomes a common technique in clinical oncology, but it has its limits. Tissue biopsy only yields information about a very small area of tumor at the time of extraction and in some cases it is difficult or impossible to obtain the tissue sample. Furthermore, it is an invasive method that can stress patients. Analysis of circulating tumor DNA from blood – the so‑called liquid biopsy – represents one possible solution. Dying tumor cells release fragments of their DNA into the blood stream. From blood, they can be isolated and subjected to analysis using new, sensitive and precise methods that detect genomic changes. These changes are evolving over time because cancer disease is characterized by evolution and ability to select new mutations that bring growth advantages or resistance to treatment. Our inability to capture the heterogeneity during tumor development is one of the major reasons responsible for failure of cancer treatment. Recent technological progress in detection and characterization of circulating DNA could enable tumor evolution monitoring in real time and become a guideline for an accurate and prompt treatment choice. Key words: circulating tumor DNA – tumor biomarkers – biopsy – liquid biopsy – blood – mutation This study was supported by the European Regional Development Fund and the State Budget of the Czech Republic – RECAMO, CZ.1.05./2.1.00/03.0101, by the project MEYS – NPS I – LO1413, GACR 13-00956S, MH CZ – DRO (MMCI, 00209805) and BBMRI_CZ (LM2010004). The authors declare they have no potential conflicts of interest concerning drugs, products, or services used in the study. The Editorial Board declares that the manuscript met the ICMJE “uniform requirements” for biomedical papers. Submitted: 7. 4. 2015 Accepted: 3. 7. 2015

• MeSH
• biopsie MeSH
• DNA nádorová * genetika   krev   MeSH
• genetické techniky MeSH
• lidé MeSH
• mutace MeSH
• nádorové biomarkery * genetika   krev   MeSH
• nádorové cirkulující buňky * MeSH
• nádory genetika   krev   patologie   MeSH
• tekutá biopsie MeSH
• Check Tag
• lidé MeSH
• Publikační typ
• práce podpořená grantem MeSH
• přehledy MeSH