Two valuable forensic tools based on enzyme-linked immunoassays (ELISAs) for the analysis of 17α-methylated steroids were developed using haptens of stanazolol and its conjugates with biotin. Haptens containing terminal carboxylic group were conjugated to bovine serum albumin (BSA), rabbit serum albumin (RSA) or ovalbumin (OVA). Eight batches of antisera (RAbs) obtained by immunization of rabbits were tested in an indirect competitive ELISA system using immobilization of RSA conjugate (RSA/hapten) and competitor immobilization of the biotinylated conjugate (AB-ELISA) to avidin (avidin/hapten). The best results were achieved with the RAb 212 antibodies in RSA/ST-3 and avidin/ST-10 assembled variants. For the RSA/ST-3 system, an IC50 of 0.3 ng/mL and a detection limit of 0.02 ng/mL were measured. In case of avidin/ST-10 variant, IC50 was of 3.9 ng/mL and a detection limit of 0.57 ng/mL were obtained. The effect of solvent was tested as well as the stability of coated microtiter plates over four-month period. The cross-reactivity of the developed assays with other anabolic steroids was tested and high sensitivity towards 17α-methylated steroids was observed. RSA/ST-3 assay showed significant cross-reactivity with 17α-methyltestosterone (81.2%), oxymetholone (30.4%), methandienone (10.0%) and methyl dihydrotestosterone (7.7%). Similarly, in the avidin/ST-10 assay, 17α-methyltestosterone (34.5%), mestanolone (32.1%), oxymetholone (22.7%), methandienone (14.2%), 9-dehydromethyltestosterone (12.5%) and oxandrolone (1.2%) exhibited high cross-reactivity. The functionality of the developed systems was verified by the successful identification of a series of 17α-methylated anabolic steroids in a set of real samples including pharmaceutical preparations seized by the Police of the Czech Republic on the black market.
- MeSH
- antisérum MeSH
- ELISA * MeSH
- kalibrace MeSH
- kongenery testosteronu analýza MeSH
- králíci MeSH
- metylace MeSH
- molekulární konformace MeSH
- sérový albumin chemie MeSH
- skot MeSH
- soudní lékařství * MeSH
- stanozolol chemie MeSH
- stereoizomerie MeSH
- zvířata MeSH
- Check Tag
- králíci MeSH
- skot MeSH
- zvířata MeSH
- Publikační typ
- časopisecké články MeSH
- práce podpořená grantem MeSH
- MeSH
- dospělí MeSH
- folikuly stimulující hormon krev MeSH
- globulin vázající pohlavní hormony metabolismus MeSH
- kongenery testosteronu terapeutické užití MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- luteinizační hormon krev MeSH
- poměr CD4 a CD8 lymfocytů MeSH
- postmenopauzální osteoporóza farmakoterapie imunologie MeSH
- stanozolol krev terapeutické užití MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- MeSH
- dospělí MeSH
- hyperkalcemie krev metabolismus MeSH
- kongenery testosteronu aplikace a dávkování farmakologie terapeutické užití MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- luteinizační hormon krev metabolismus MeSH
- menopauza fyziologie krev MeSH
- parathormon MeSH
- stanozolol farmakologie MeSH
- vápník farmakologie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- ženské pohlaví MeSH
- MeSH
- Behcetův syndrom farmakoterapie MeSH
- dospělí MeSH
- ethylestrenol * aplikace a dávkování škodlivé účinky terapeutické užití MeSH
- fenformin * aplikace a dávkování škodlivé účinky terapeutické užití MeSH
- fibrinolytická aktivita MeSH
- fibrinolýza * fyziologie imunologie účinky léků MeSH
- flebitida farmakoterapie MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- pilotní projekty MeSH
- stanozolol aplikace a dávkování škodlivé účinky terapeutické užití MeSH
- vaskulitida farmakoterapie komplikace MeSH
- žilní trombóza farmakoterapie MeSH
- Check Tag
- dospělí MeSH
- lidé středního věku MeSH
- lidé MeSH
- Publikační typ
- kazuistiky MeSH
