V diagnostice lymeské boreliózy (LB) existuje i v současnosti řada problémů. Naše pracoviště vyvinulo vlastní metodiku přímého průkazu boreliové nukleové kyseliny PCR reakcí, která byla testována v prospektivní studii. Bylo vyšetřováno 32 pacientů s ověřenou diagnózou lymeské neuroboreliózy. Í^NA spirochét byla prokazována v moči a mozkomíšním moku. Moč byla odebírána před léčbou, po léčbě, 3 a 6 měsíců po ukončení hospitalizace, lumbální punkce byla provedena na začátku terapie. PCR reakce probíhala jako dvoustupňová amplifikace(„nesteď' PCR). Byly použity dvě sady primerů: pro chromozomální gen kódující 16S rDNA a pro plazmidový gen kódující protein OspC. Intratékální syntéza protilátek byla stanovována pomocí specifického protilátkového indexu (Alsb). 94 % pacientů mělo prokázanou autochtónni produkci specifických antiboreliových IgG protilátek v mozkoi ^míšním moku. Průkaz DNA spirochét u sledované skupiny v moči byl poměrně vysoký (72 % pozitivních alespoň v jednom vyšetření). Na začátku i na konci léčby byla boreliová nukleová kyselina v moči nalezena u poloviny nemocných, při tříměsíční kontrole byli PCR pozitivní pouze 4 (13 %) a při šestiměsíční již žádný pacient neměl toto vyšetření pozitivní. Z výsledků je zřejmý významný pokles pozitivity PCR během sledování, což může dokládat účinnost antibiotické léčby. Na začátku terapie byla DNA spirochét prokázána v mozkomíšním moku u 44 % pacientů a v moči u 50 %. Tyto výsledky naznačují, že u neuroboreliózy může být moč vhodným materiálem pro diagnostiku i vzhledem k její snadné dostupnosti.

In the diagnosis of Lymeborreliosis (LB) still some problems exist. The authors' department developed their own method of direct evidence of borrelia nucleic acid by the PCR reaction which was tested in a prospective study. 32 patients with a confirmed diagnosis of Lyme neuroborreliosis were examined. Spirochaetale DNA was proved in urine and cerebrospinal fiuid. Urine was collected before and after treatment, 3 and 6 months after termination of hospitalization, lumbar puncture was performed at the onset of therapy. The PCR reaction was implemented as a two-grade amplification („nested" PCR). Two sets of primers were used: For the chromosomal gene coding 16S rDN AN and for the plasmid gene coding protein OspC. Intrathecal synthesis of antibodies was assessed by means of a specific antibody index (Alsb). 94% patients had a confirmed autochthonous production of specific antiborrelia IgG antibodies in the cerebrospinal fluid. Evidence of spirochaetale DNA in the investigated group in urine was relatively high (72% positive in at least one examination). At the onset and at the end of treatment borrelia nuclear acid was found in the urine of half the patients, during the he 3-month check-up only 4 (13%) were PCR positive and during the 6-month check-up no patient was PCR positive. From the results a significant decline of PCR positivity during the investigation is apparent which may be evidence of the effectiveness of antibiotic treatment. At the onset of treatment spirochaetale DNA was detected in the cerebrospinal fluid in 44% patients and in the urine in 50%. These results indicate that in neuroborreliosis urine may be suitable material for the diagnosis, among others, also because it is readily available.

2 LF UK 1 infekční klinika FN Bulovka Praha

Dynamics of the polymerase chain reaction (PCR) and its value in Lyme borreliosis

Dynamika polymerázové řetězové reakce (PCR) a její význam v diagnostice lymeské neuroboreliózy = Dynamics of the polymerase chain reaction (PCR) and its value in Lyme borreliosis /

Dynamics of the polymerase chain reaction (PCR) and its value in Lyme borreliosis /

Lit: 23

Souhrn: eng