Úkolem této studie je porozumění změn v genové expresi na buněčné úrovni v souvislosti se zablokováním exprese COX1 resp. COX2 pomocí RNA interference (RNAi). Pomocí RNAi, syntetických siRNA nebo shRNA exprimujících plasmidů či retrovirů, budou vytvořenybuněčné linie se zablokovanou expresí COX1 resp. COX2. Profil genové exprese bude určen pomocí DNA mikročipů srovnáním s mateřskou linií a ověřením pomocí real-time PCR. Na základě prvních výsledků bude sestaven experimentální jednoúčelový DNA mikročipobsahující vybrané geny. Na základě výsledků bude posouzena fyziologická funkce COX1 a COX2 v souvislosti s absencí jedné z izoforem.; The aim of this study is to better understand the cellular gene expression changes upon the RNA interference (RNAi) mediated down-regulation of COX1 resp. COX2 gene expression. The corresponding cell-lines with COX1 resp. COX2 gene expression down regulated will be constructed via RNAi, the synthetic siRNA or plasmid or retrovirus mediated shRNA expression, respectively. The gene expression profile will be determined by DNA microarrays comparing the gene expression with parental cell-line. Based on theresults, experimental, single-purpose DNA microarray containing selected genes will be constructed. Altered physiological function of COX1 resp. COX2 in the absence of one of the isoforms will be discussed.

Doba řešení: 2006-2009

Obsahuje literaturu