Znalosti o původu a vlastnostech prionů v krvi jsou velmi omezené. Detekce patologického prionového proteinu (PrPtse) v krvi je komplikována přítomností normálního buněčného prionového proteinu (PrPc). Detekce PrPtse na krevních buňkách je omezena nedostupností protilátek schopných rozlišit mezi PrPc a PrPtse. Až v posledni době se podařilo připravit unikátní protilátky schopné specificky rozeznat PrPtse. Dvě z nich, V5B2 a 4C2, nám byly poskytnuty zahraničními spolupracovníky pro realizaci tohoto projektu. Předpokládáme, že PrPtse se v krvi koncentruje v malé specifické subpopulaci buněk. Použití konformačních protilátek by pak mělo umožnit jeho detekci. Pro ověření naší hypotézy plánujeme provést kvantitativní studii exprese PrPc / PrPtse na subpopulacích krevních buněk pacientů s CJN pomocí multibarevné průtokové cytometrie. Kromě toho budeme sledovat hladinu PrPc / PrPtse v plazmě a likvoru pomocí vysoce citlivé ELISA a vyšetříme krevní hladiny mRNA pro vybrané potenciální markery CJN.; Very little is known about the nature of prions in blood. Detection of pathological prion protein (PrPtse) in blood is complicated by the presence of substantial amount of cellular prion protein (PrPc) and by unavailability of PrPtse specific antibodies.Recently, a small number of antibodies that can discriminate between PrPc and PrPtse was developed. Two of these, V5B2 and 4C2, were made available to us by collaborating laboratories. We hypothesize that PrPtse may be preferentially present and concentrated on a minor population of blood cells and that the use of conformation specific antibodies may allow its detection. To test our hypothesis we plan to utilize quantitative multi-color flow cytometry to study PrPc / PrPtse expression on blood cells ofsymptomatic CJD patients. In addition we will evaluate the level of PrPc / PrPtse in plasma and cerebral spinal fluid by sandwich ELISA and blood levels of mRNA for selected potential markers of CJD using quantitative PCR.

Doba řešení: 2009-2011