Myoblasty jsou zodpovědné za reparaci svalové hmoty u nemocných zotavujících se z protrahovaného kritického stavu. Práce si klade za cíl in vitro charakterizovat závislost metabolismu myoblastů získaných z biopsie od prolongovaně kriticky nemocých s těžkou svalovou slabostí a zdravých kontrol v závislosti na nabídce glukózy, mastných kyselin a anabolické stimulaci inzulínem a růstovým hormonem. Umožní to současné měření spotřeby kyslíku a produkce laktátu v reálném čase a současně a opakovaně ve 24 jamkách s možností automatického přidání až 4 enzymových inhibitorů pro případnou lokalizaci metabolického defektu (XF24 Extracellular flux analyzer, Seahorse Bioscience). Metoda bude poprvé aplikována na kulturu lidských myoblastů kultivovaných in vitro. Výsledky mohou přispět ke zdokonalení metabolické podpory u pacientů se svalovou slabostí, zotavujících se z dlouhodobé intenzívní péče.; Myoblasts are cells primarily responsible for muscle mass regain during recovery from protracted critical illess. Myoblasts can be cultured in vitro. We aim to describe in vitro how ATP turnover in myoblasts can be influenced by manipulating energy substrates (NEFA, glucose) in their environment and whether they can be stimulateg by insulin and/or growth hormone. A novel high-throughput method of XF24 Extracellular flux analyzer, Seahorse Bioscience simultaneously measures oxygen consumption rate (i.e.aerobic respiration) a extracellular acidification rates (i.e. anaerobic glycolysis) in a 24 well microplate allowing simultaneous measurement of cellular metabolism in 24 different environments. Moreover, when enzyme inhibitors are added, metabolic deffect can be localized. This would be the first application of this innovative method on cultured human myoblasts. Results might help in planning metabolic and hormonal support of weak and muscle depleted patients recovering after intensive care.

Doba řešení: 2011-2014

Obsahuje literaturu