Monoclonal antibody (mAb) therapy often encounters resistance due to downmodulation of the target antigens. The exact underlying mechanisms remain unknown as well as the efficacy of newly developed mAbs. We propose to investigate the impact of several clinically advanced mAbs on the expression level of their target antigen and determine functional consequences of lower target expression on the potency of mAbs in cell killing. We will characterize cellular mechanisms regulating the surface expression of antigens that are downregulated in response to any of the mAbs. We shall investigate how are these antigens degraded and explore changes on the transcriptional and translational level, changes in promoter activity and epigenetic alterations. Finally, we will perform rescue screen with inhibitors of epigenetic modifying enzymes and a whole genome loss-of-function screen using novel state-of-the-art technique. This will identify proteins involved in the regulation of surface expression and suggest intervention strategies that may lead to upregulation of the antigens on the cell surface.

Terapie monoklonálními protilátkami (mAbs) se často potýká s rezistencí způsobenou snížením exprese cílových antigenů. Podstata zapříčiňujících mechanismů zůstává neznámá, stejně jako účinnost nově vyvinutých mAbs. V tomto projektu budeme testovat vliv několika klinicky nejvíce pokročilých mAbs na úroveň exprese jejich cílového antigenu a určíme funkční důsledky snížené exprese na efektivitu protilátek v usmrcování buněk. Charakterizujeme buněčné mechanismy regulující povrchovou expresi antigenů, které jsou downregulovány v reakci na některou z mAbs. Prozkoumáme, jakými mechanismy jsou tyto antigeny degradovány a budeme sledovat změny na úrovni transkripce a translace, změny v aktivitě promotoru a epigenetické modifikace. Na závěr provedeme screening s inhibitory epigenetických enzymů a celogenomový “loss-of-function” screening s využitím nové technologie na úrovni dnešní doby. Tento přístup povede k identifikaci proteinů podílejících se na regulaci povrchové exprese a navrhne intervenční strategie, které mohou vést k upregulaci antigenů na buněčném povrchu.

Resistance to monoclonal antibody therapy at B-CLL and B-lymphomas: its foundations and potential intervention strategies

Doba řešení: 2015-2018

Obsahuje literaturu