Vytvořili jsme linii transgenních králíků produkujících v mléčné žláze lidský erytropoetin (hEPO). Zakládající jedinec (samice) byl získán mikroinjekcí patentovaného genového konstruktu do pronuklea jednobuněčného embrya. Expresní vektor obsahoval 5,0 kb velký fragment z lidské genomové DNA s kódující oblastí genu pro lidský erytropoetin, jehož exprese byla řízena vloženou 8,5 kb velkou regulační oblastí s promotorem pro králičí protein mléčné syrovátky (WAP). Kontrola integrace transgenu do genomu narozených zvířat byla prováděna metodou PCR. Přítomnost hEPO v mléce a krvi byla zjišťována Western blotingem s následnou imunochemickou detekcí, koncentrace transgenního proteinu byla analyzována komerční ELISA metodou. Dále byla srovnávána biologická aktivita mléčného sekretu transgenního a netransgenního jedince pomocí 3H-thymidin – inkorporačního testu podle Krystala (Exp. Hematology 11, 649-660, 1983). Koncentrace hEPO v mléce zakládající transgenní samice se pohybovala v rozmezí 60 – 180 mIU/ml, v krevní plazmě byly zjištěny hodnoty 40–160 mIU/ml. U vybraných transgenních jedinců byly sledovány i některé základní hematologické parametry. Vysoké koncentrace hEPO v plazmě negativně ovlivnily některé hematologické ukazatele a zdravotní stav transgenních jedinců.

BIOPHARM Výzkumný ústav biofarmacie a veterinárních léčiv a s Pohoří Chotouň