Jedním z ukazatelů proliferační aktivity nádorů je apoptóza. Ke studiu apoptózy na tkáňových řezech je nyní používána řada metodik zahrnující světelnou a elektronovou mikroskopii, in situ nick end-labeling (ISEL), TdT-mediated dUTP nick-end labeling (TUNEL) a imunohistochemický průkaz antigénu spojených s apoptózou. K průkazu apoptózy lze použít také monoklonální protilátku M30 CytoDEATH (M30), která se váže na neo-epitopy vzniklé při štěpení cytokeratinu 18 kaspazami v průběhu časných stadií apoptózy. K faktorům regulujícím apoptózu u řady nádoro vých onemocnění patří také protein bcl-2. V naší práci bylo imunohistochemicky vyšetřeno 26 invazivních duktálních adenokarcinomů pankreatu pomocí protilátek M30 a bcl-2. Průměmý apoptotický index (AI, procento apoptotických buněk z celkového počtu nádorových buněk) u vyšetřených karcinomů pankreatu byl 2,75 %. Vysoký AI (>10 %) byl zaznamenán ve 4 případech (15 %). Exprese proteinu bcl-2 byla imunohistochemicky prokázána ve 3 pnpadech (11,5 %). Korelace mezi AI a expresí proteinu bcl-2 nebyla prokázána. Ověřili jsme, že monoklonální protilátku M30 proti neo-epitopu cytokeratinu 18 lze použít k průkazu apoptotických buněk na tkáňových řezech a v tomto směru představuje nový přístup, který dosud nebyl u pankreatických karcinomů aplikován. Nízká pozitivita exprese bcl-2 ukazuje, že bcl-2 protein pravděpodobně nehraje hlavní roli v kancerogenezi a progresi duktálních karcinomů pankreatu.

Apoptosis plays a central role in the development and/or progression of cancer. There are several methods for detection of apoptotic cells in tissue sections including light and electron microscopy, in situ nick end-labeling (ISEL), TdT-mediated dUTP nick-end labeling (TUNED and immunohistochemical detection of proteins associated with apoptosis. Apoptosis was assessed by the monoclonal antibody M30 CytoDEATH (M30), which is specific for neo-epitope in cytokeratin 18 that becomes available at an early caspase cleavage during apoptosis. Expression of bcl-2 protein was evaluated, because bcl-2 protein plays an important role in the regulation of apoptosis. Twenty-six invasive ductal adenocarcinomas of the pancreas were studied immunohistochemically with antibodies M30 and bcl-2. The mean apoptotic index (AI, the percentage of apoptotic cells of the total tumor cells number) was 2.75%. High AI (>10%) was observed in 4 cases of the 26 pancreatic carcinomas (15%). Protein bcl-2 was expressed in 3 cases (11,5 %). The AI did not correlate with the expression of protein bcl-2. In conclusion, the detection of neo-epitope in y okeratin 18 by monoclonal antibody M30 can be used for quantification of apoptotic cells with immunohistochemical techniques in tissue sections. It is a new approach to evaluate apoptosis in pancreatic carcinomas. The low positivity of bcl-2 expression in pancreatic adenocarcinomas suggests that bcl-2 protein does not play a central role in pancreatic tumorigenesis and cancer progression.

Patologicko anatomický ústav FN Brno

Apoptosis and expression of bcl-2 protein in invasive ductal adenocarcinoma of the pancreas

Apoptóza a exprese bcl-2 proteinu u invazivního duktálního adenokarcinomu pankreatu = Apoptosis and expression of bcl-2 protein in invasive ductal adenocarcinoma of the pancreas /

Apoptosis and expression of bcl-2 protein in invasive ductal adenocarcinoma of the pancreas /

Lit: 28

Souhrn: eng